先天性巨结肠症中Neuroligin2基因的表达及相关血浆GABA临床意义

发布时间：2017-07-05 08:30

  本文关键词：先天性巨结肠症中Neuroligin2基因的表达及相关血浆GABA临床意义

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【摘要】：研究背景及研究目的：先天性巨结肠(Hirschsprung's Disease, HD),是病变肠管神经节细胞缺如的一种先天性消化道发育畸形。目前虽然对HD发病机制的基础性研究很多,如RET、SOX10、EDNRB等,但仍不能解释所有患儿的发病机制。Neuroligin2基因存在于中枢神经系统(Central Nervous System, CNS),对突触的形成、发育以及突触功能循环具有重要的作用,且肠神经系统(Enteric Nervous System, ENS)与CNS是有密切关联的。据此,本文研究HD患儿各段肠管中Neuroligin2基因的表达情况,探讨Neuroligin2基因表达与HD发生的可能关系。已证实,Neuroligin2基因在CNS表达于γ-氨基丁酸(Gamma-Aminobutyric Acid, GABA)能神经元,且GABA能反应Neuroligin2的表达水平,临床上对HD的诊断缺乏血液学检查指标,血浆GABA可能为HD新的诊断方法,本文探索HD患儿血浆GABA表达水平及对临床诊断的意义。实验方法：选取山东大学齐鲁医院小儿外科行手术治疗的52例HD患儿切除病变结肠及血浆作为研究标本,52例腹股沟斜疝(Indirect Inguinal Hernia, ⅡH)患儿的血浆作为研究对照。应用免疫组织化学染色、Western blot及实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法观察Neuroligin2在各肠段的表达情况,应用ELISA实验方法测量血浆中GABA的表达水平。实验结果：Western blotting结果示Neuroligin2蛋白在狭窄段相对表达量为0.012±0.0011,明显少于移行段和扩张段(0.039±0.0014,0.057±0.0018；P0.05)。qRT-PCR结果显示Neuroligin2基因的mRNA水平与蛋白表达趋势一致。免疫组织化学染色示HD患儿扩张段肠管的肌间肠神经节细胞中有Neuroligin2强阳性表达,而在狭窄段弱阳性表达,移行段可见Neuroligin2阳性表达。ELISA示HD患儿血浆GABA水平(23.69±2.30)较对照组(7.65±1.16)高,统计学有意义。实验结论：Neuroligin2基因在人ENS有表达,HD患儿狭窄段肠管中Neuroligin2的表达缺失可能与HD的发生有关；与Neuroligin2基因相关的血浆GABA的表达水平可能成为一种诊断HD新的临床指标。
【关键词】：先天性巨结肠 Neuroligin2基因 实时荧光定量聚合酶链式反应 血浆γ-氨基丁酸
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R725.7
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 英文缩略词表10-11
• 第一章 前言11-14
• 第二章 材料与方法14-26
• 第三章 实验结果26-27
• 第四章 讨论27-31
• 第五章 结论31-32
• 附表及附图32-36
• 参考文献36-41
• 致谢41-42
• 攻读硕士学位期间发表的论文42-43
• 附件43

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本文编号：521253