金欣口服液及白藜芦醇对RSV体内外感染模型相关炎症因子表达的调控作用

发布时间：2017-07-16 16:09

  本文关键词：金欣口服液及白藜芦醇对RSV体内外感染模型相关炎症因子表达的调控作用

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【摘要】：呼吸道合胞病毒(Respiratory Syncytial Viral, RSV)是近些年来在世界范围内能够引起婴幼儿下呼吸道感染最重要的病毒病原,其所致的肺炎临床症状较重,病死率较高,因此受到高度关注。RSV感染机体后能够使参与细胞免疫的T辅助细胞Th1/Th2的比例失衡,诱导相关细胞因子的表达,造成机体的免疫损害。RSV是Toll样受体(Toll-like receptors)重要的配体,能够诱导TLRs信号转导通路的活化,引起下游诸如IL-6、IL-8和IL-1β等细胞因子的分泌。导师汪受传教授研制的金欣口服液在前期的临床和实验研究中中被证实具有抗RSV感染和调节免疫等作用,其有效单体白藜芦醇亦有抗病毒的作用。因两者拮抗RSV感染的作用机制目前尚不明确,因此,本研究拟从RSV活化诱导的Toll样受体信号转导通路入手,探讨金欣口服液及白藜芦醇对RSV体内外感染模型相关炎症因子表达的调控作用,推测其在分子免疫学方面抗RSV肺炎的作用机制。 目的： 1观察RSV体内外感染模型IL-6、IL-8、IL-1β表达水平,探讨其在免疫学方面的作用机理。 2观察金欣口服液及白藜芦醇对RSV体内外感染模型IL-6、IL-8、IL-1p表达水平的调控作用,探讨其在免疫学方面抗RSV感染的作用机理。 方法： 本实验采用实验动物学、细胞培养学、分子免疫学、ELISA法检测BALB/c小鼠肺泡灌洗液IL-1β及hep-2细胞上清IL-6和IL-8的含量变化。实验数据采用Excel和SPSS17.0软件进行统计。 结果： 1体内实验：RSV感染BALB/c小鼠24h后IL-1β的表达量较之于正常组显著增加(P0.01),金欣高预防组和等效预防组均能下调其表达且以等效预防组的下调作用更为明显(P0.01)；当RSV感染BALB/c小鼠72h后,IL-1β的表达量较之于正常组也显著增加(P0.05),但较24h的表达量稍有减少。金欣治疗组下调IL-1p表达的作用,两个高剂量组IL-1β的含量较之于RSV模型组也有所下降,但无统计学意义(P0.05)；RSV感染BALB/c小鼠144h后IL-1β的表达量较之于24h、72h显著减少,但表达量仍高于正常组,而金欣口服液的两个剂量治疗组则均能下调其表达。 2体外实验：①RSV感染Raw264.7细胞24h后上清中检测到IL-1β的表达量极低；②RSV感染hep-2细胞后24h时,RSV感染模型组中IL-6和IL-8的表达量均显著增高(P0.01)；金欣组IL-6(P0.05)和IL-8(P0.01)的表达均低于RSV感染组；白藜芦醇50μmol/L组均能显著下调IL-6(P0.01)和IL-8(P0.05)的高表达,25μmol/L组IL-6和IL-8的含量也有所降低,但无统计学意义(P0.05)。 结论： 1.金欣口服液能够减轻RSV感染的BALB/c小鼠肺部及全身炎症反应。 2.金欣口服液及白藜芦醇均能够下调RSV感染的体内外模型中IL-6、IL-8、IL-1p的高表达,并将其调控在接近于正常范围,由此推测两者可能为拮抗RSV感染的作用机制之一。
【关键词】：金欣口服液 呼吸道合胞病毒 白藜芦醇 白介素-6 白介素-8 白介素-1β
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R272
【目录】：

• 中文摘要8-10
• Abstract10-12
• 绪论12-13
• 第一部分 文献研究13-22
• 1 中医学对RSV肺炎的认识13-17
• 1.1 病名溯源13
• 1.2 病因13-14
• 1.3 病机14-15
• 1.4 现代辨证分型研究15
• 1.5 治则治法15-16
• 1.6 现代中医药抗RSV感染的研究进展16-17
• 2 西医学对RSV肺炎的研究进展17-19
• 2.1 RSV的生物学特性17-18
• 2.2 关于RSV的病原学研究18
• 2.3 RSV的流行病学研究18
• 2.4 抗RSV感染的药物18-19
• 3 金欣口服液及白藜芦醇抗RSV的研究19-22
• 3.1 临床研究及成果19-20
• 3.2 实验研究及成果20-21
• 3.3 白藜芦醇抗RSV的作用研究21-22
• 第二部分 研究思路22-23
• 第三部分 实验研究23-35
• 1 实验材料23-25
• 1.1 病毒23
• 1.2 细胞23
• 1.3 动物23
• 1.4 药物23
• 1.5 试剂及溶液23-24
• 1.6 仪器与设备24-25
• 2 实验方法与步骤25-31
• 2.1 金欣口服液、利巴韦林含药血清制备及白藜芦醇、利巴韦林溶液配制25
• 2.2 含药血清及药物的最大无毒浓度测定25-26
• 2.3 RSV的体外扩增与滴度测定26-27
• 2.4 体外实验27-28
• 2.5 体内实验28-29
• 2.6 hep-2细胞TLR3免疫荧光细胞标本的制备29-30
• 2.7 金欣口服液及白藜芦醇对RSV体内外感染模型相关炎症因子表达的影响30-31
• 3 实验结果31-35
• 3.0 金欣口服液对RSV感染Raw264.7细胞IL-1β表达的影响31
• 3.1 金欣口服液对RSV感染的BALB/c小鼠IL-1β表达的调控作用31-32
• 3.2 金欣口服液及白藜芦醇对RSV感染hep-2细胞IL-6和IL-8的调控作用32-33
• 3.3 金欣口服液对RSV感染的hep-2细胞TLR3蛋白表达的比较33
• 3.4 RSV感染后24h、72h及144h时的肺组织病理切片结果33-35
• 第四部分 讨论与总结35-38
• 1 讨论35-36
• 2 总结36-37
• 2.1 动物模型的选择36
• 2.2 金欣口服液及白藜芦醇抗RSV感染的可能的作用机制36
• 2.3 实验的创新性36-37
• 3 不足与展望37-38
• 附录38-42
• 参考文献42-45
• 英文缩略词表45-46
• 攻读硕士学位期间发表的论文46-47
• 致谢47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 赵霞;汪受传;张沛;周娣;徐建亚;;金欣口服液对呼吸道合胞病毒感染大鼠Ⅰ型干扰素表达的影响[J];中华中医药杂志;2011年07期

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本文编号：549456