EphB4基因甲基化异常与儿童ALL发病的临床研究

发布时间：2017-08-05 21:21

  本文关键词：EphB4基因甲基化异常与儿童ALL发病的临床研究

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【摘要】：目的本课题拟通过研究骨髓标本EphB4基因启动子区甲基化状态对其表达的转录调控作用，探讨EphB4基因甲基化在儿童ALL发生发展中的生物学意义，以及EphB4基因甲基化状态对ALL患儿预后的影响。 方法（1）分离骨髓单个核细胞并提取基因组DNA，采用亚硫酸氢盐修饰后（BisulfiteSequencing PCR，BSP）法检测EphB4基因甲基化水平。（2）提取骨髓样本总RNA，采用实时荧光定量核酸扩增（real time quantitation PCR, QPCR）检测EphB4基因mRNA表达；（3）提取骨髓样本总蛋白质，以Western blot法检测EphB4蛋白表达水平。（4）对比甲基化组及非甲基化组ALL患儿对诱导缓解治疗的效果，分析EphB4基因甲基化对ALL儿童治疗效果的影响。 结果：（1）、确定ALL患儿骨髓单个核细胞EphB4基因启动子区域CpG岛存在甲基化,甲基化水平在7.94-36.5%之间，平均水平为15.76%，甲基化率为32.5%（13/40），对照组均未发生甲基化，经Fisher精确检验差异有统计学意义（P0.05）；（2）、对照组及未发生甲基化患儿mRNA相对表达量（21.14±4.95及11.24±3.03）明显高于发生甲基化ALL患儿（5.89±2.40），，并且ALL患儿中甲基化程度越高者表达越少；（3）、Western blot检测发现发生甲基化的ALL患儿骨髓单个核细胞中几乎无该基因的表达，而对照组细胞可检测到EphB4基因的表达，非甲基化的ALL患儿EphB4基因表达减弱。（4）、甲基化组2年EFS率（68.4±1.58）%高于非甲基化组2年EFS率为（91.7±8）%。 结论： ALL患儿骨髓EphB4基因启动子区域CpG岛存在异常甲基化并影响其表达，对照组患儿未发生甲基化。EphB4基因甲基化状态在儿童ALL的发病及预后中发挥作用。
【关键词】：EphB4 儿童 ALL 甲基化
【学位授予单位】：暨南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R733.71
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-6
• 1 前言6-8
• 2 实验材料8-12
• 3 实验方法12-18
• 4 实验结果18-23
• 5 讨论23-29
• 6 结论29
• 7 展望29
• 参考文献29-34
• 附文综述34-39
• 参考文献38-39
• 英文缩略词索引39-41
• 致谢41-42

【参考文献】

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1 文飞球,陈亦欣,曹励之,刘冯,周克英,陈霆;儿童急性白血病端粒酶活性与p15基因表达关系的研究(英文)[J];中国当代儿科杂志;2005年02期

2 李玉华;文飞球;陈亦欣;陈俐丽;;5-Aza-CdR对CEM细胞生长抑制的实验研究[J];实用医学杂志;2012年10期

3 文飞球,陈亦欣,曹励之,周克英,李博,李玉华,刘智屏;急性髓性白血病p15~(INK4B)基因表达和基因甲基化状态的研究[J];中华儿科杂志;2005年03期

本文编号：626971