硼替佐米在肺动脉高压大鼠模型中的实验性及机制性研究

发布时间：2017-08-16 00:17

  本文关键词：硼替佐米在肺动脉高压大鼠模型中的实验性及机制性研究

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【摘要】：背景与目的先天性心脏缺陷引起的肺动脉高压(pulmonary arterial hyper-tension, PAH)是临床常见疾病,以持续增高的肺动脉压并最终导致患儿右心衰竭和过早死亡为特点。肺动脉高压最基本的病理特征是肺小动脉血管重构,主要表现为内皮细胞功能紊乱,平滑肌细胞增殖和凋亡失衡及细胞外基质过度沉积等。近年来的研究表明硼替佐米(bortezomib, velcade, PS-341)可以遏制或者部分改善高肺血流性肺动脉高压引起的肺小动脉血管重构,但具体的机制仍未完全清楚。因此我们从基因和分子水平进行深入的研究,阐明肺动脉高压发病的具体机制,为临床治疗肺动脉高压提供理论依据,并进一步寻求根治肺动脉高压的有效方法 在本研究中,我们认为肺动脉高压的形成机制涉及多种因子,比如核因子kappa B(nuclear factor-KB、转化生长因子β1(transforming growth factor beta-β, TGF-β1)/Smads (drosophila mothers against decapentaplegic protein)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)等。我们的目的是观察硼替佐米是否可以改善高肺血流性肺动脉高压大鼠模型的肺小动脉血管重构及其引起的肺脏和心脏的损伤,并进一步探讨NF-KB,TGF-β1/Smads及VEGF信号通路在硼替佐米影响高肺血流性肺动脉高压形成过程中的作用机制。 方法采用腹主动脉-下腔静脉造瘘术(aorto-caval shunt method, ACS)的方法建立高肺血流性肺动脉高压大鼠模型。术后3天分别给予硼替佐米(50ugkg-1,2次／周,8周)或等体积的生理盐水。至此48只Wistar大鼠随机分为4组.(n=12/组)：Ⅰ：假手术组；Ⅱ：分流组；Ⅲ：分流+生理盐水组；Ⅳ：分流+硼替佐米组。术之后第8周测量并计算心率(HR),中心静脉压(CVP),右心室收缩压(RVSP),平均右心室压(MRVP)及右心室肥厚指数(RVHI),并对右心室的损伤型度进行评估。采用HE及Massion染色法观察肺动脉形态学改变,计算WT%及WA%。采用免疫组化法、Western Blot法检测肺组织中NF-κB, I-κBα, TGFβ1, Smad2/3和VEGF的蛋白表达,实时荧光定量PCR (RT-PCR)分析法检测各组大鼠肺组织中Ubiquitin (Ub), TGF-β1, Smad2, Smad3和VEGF的nRNA表达水平。 结果与假手术组相比,分流组及分流+生理盐水组的大鼠肺小动脉管壁明显增厚、官腔狭窄,甚至闭塞,RVSP、MRVP、RVHI及WT%、WA%增高(P＜0.05)。与此同时,免疫组化、Western Blot和RT-PCR检测结果显示肺组织中Ub、 NF-κB、TGF-β1、Smad2、Smad3和VEGF的表达增强(P＜0.05),而I-κBα表达减弱。与分流组相比,硼替佐米明显改善了大鼠的血流动力学指标,减轻了大鼠右心室的损伤程度(P＜0.05),显著下调了Ub、NF-κB、TGF-β1、Smad2、Smad3和VEGF的表达(P＜0.05),同时上调1-kBα的表达水平(P＜0.05)。 结论本研究的结果显示硼替佐米可能通过调控NF-κB和TGF-β1/Smads信号通路,并影响VEGF的表达,从而明显的改善高肺血流性肺动脉高压的血管重构及其引起的肺部、心脏的损伤。
【关键词】：肺动脉高压 硼替佐米 NF-κB TGF-β1 VEGF
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R725.4;R-332
【目录】：

• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 英文~.写及符号说明10-11
• 前言11-14
• 材料与方法14-26
• 结果26-30
• 讨论30-37
• 结论37-38
• 附图表38-44
• 参考文献44-53
• 致谢53-54
• 攻读学位期间发表的学术论文目录54-55
• 学位论文评阅及答辩情况表55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 李波;何巍;;肺动脉高压动物模型的理论研究及其制备特点[J];中国组织工程研究与临床康复;2010年11期

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中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 于晓晓;高血流肺血管重建中内皮细胞NF-κB的活性研究[D];山东大学;2010年

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本文编号：680587