先天性巨结肠相关标志物的研究及临床意义

发布时间：2017-08-22 09:46

  本文关键词：先天性巨结肠相关标志物的研究及临床意义

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【摘要】：目的：利用免疫组化和实时荧光定量PCR研究先天性巨结肠（HD）不同节段肠壁肠神经系统（ENS）、平滑肌、肠间质细胞(ICCs)、组织蛋白酶D（CAD）及层粘连蛋白（LN）的病理改变及病变范围，探讨HD手术切除肠管范围、LN与HD发病的关系等问题。 方法：以34例手术切除HD标本为HD组，以11例死于与胃肠道或神经系统无关疾病患儿结肠标本为对照组。分别行肠壁S－100蛋白、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、c－kit蛋白、CAD、LN免疫组化研究，观察两组的分布情况，另取HD组标本行LN实时荧光定量PCR，观察其各段肠壁分布情况，并行统计学处理。 结果：1.HD组狭窄段、移行段S－100、α-SMA、c-kit阳性表达与对照组相比明显降低，扩张段上述指标逐渐增加。至扩张段8cm处，三者总体趋于正常。 2.CAD染色观察到自狭窄段向扩张段成熟神经节细胞逐渐增多，未成熟节细胞逐渐减少。 3.LN染色面积从狭窄段到正常段依次减弱，差异有统计学意义；LN基因在狭窄段的表达明显高于正常段，其表达水平由狭窄段向正常段递减。 结论：1.HD组ENS、平滑肌和ICCs均存在病变，至扩张段8cm处病变缓解。在患儿结肠长度允许的情况下，手术切除范围应达到或超过此范围。 2.CAD染色可鉴别成熟与未成熟神经节细胞。 3.HD中LN的分布出现异常，，是HD发病的重要原因。
【关键词】：先天性巨结肠 肠神经系统 肠间质细胞 组织蛋白酶D 层粘连蛋白
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R726.5
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 中英文缩略词表8-9
• 第1章 引言9-11
• 第2章 材料与方法11-19
• 2.1 材料11-13
• 2.1.1 主要试剂11-12
• 2.1.2 试剂配制12
• 2.1.3 主要仪器12-13
• 2.1.4 实验器具处理13
• 2.2 方法13-14
• 2.2.1 收集临床资料13
• 2.2.2 标本处理13-14
• 2.3 HE 染色14
• 2.4 免疫组化染色14-16
• 2.5 实时荧光定量 PCR 步骤16-18
• 2.5.1 提取 RNA16
• 2.5.2 RNA 质量、浓度检测16
• 2.5.3 RNA 逆转录16-17
• 2.5.4 实时荧光定量 PCR 反应17-18
• 2.6 结果判定18
• 2.7 统计处理18-19
• 第3章 结果19-25
• 3.1 HE 染色结果19
• 3.2 免疫组织化学染色结果19-23
• 3.2.1 S-100 蛋白染色结果19-20
• 3.2.2 α-SMA 染色结果20
• 3.2.3 c-Kit 染色结果20-21
• 3.2.4 组织蛋白酶 D 染色21-22
• 3.2.5 层粘连蛋白染色22-23
• 3.3 实时荧光定量 PCR 结果23-24
• 3.4 随访评分结果24-25
• 第4章 讨论25-32
• 4.1 先天性巨结肠的诊断25-26
• 4.2 先天性巨结肠术后肠功能紊乱的原因探讨26-28
• 4.3 HD 病变肠管切除范围问题28-29
• 4.4 HD 的发病机制29-32
• 第5章 结论与展望32-33
• 致谢33-34
• 参考文献34-38
• 附图38-43
• 攻读学位期间的研究成果43-44
• 综述44-48
• 参考文献46-48

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 侯豫;杨烨;赵新;仝海霞;王宝西;;胶质细胞源性神经营养因子在先天性巨结肠中的表达[J];实用儿科临床杂志;2008年07期

2 王宝西;侯豫;杨烨;;胶质细胞源性神经营养因子、Cajal间质细胞和缝隙连接蛋白43在先天性巨结肠中的表达分布研究[J];中国循证儿科杂志;2008年05期

本文编号：718446