EPEC胃肠感染小鼠模型血浆Th1、Th2、Th17淋巴细胞因子变化及意义

发布时间：2017-08-25 01:43

  本文关键词：EPEC胃肠感染小鼠模型血浆Th1、Th2、Th17淋巴细胞因子变化及意义

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【摘要】：目的:儿童感染性腹泻病中关于CD4~+T淋巴细胞亚群及其代表因子的研究在轮状病毒性腹泻中多有报道，在细菌性腹泻病例中此类研究少有报道。本实验利用EPEC E2348/69型给昆明小鼠灌胃，模仿人类胃肠感染主要感染途径（经口感染），制造人类细菌感染性腹泻疾病动物模型。检测小鼠发病时的外周血浆中的Th1、Th2、Th17淋巴细胞代表因子的水平，探索小鼠胃肠道感染时的免疫反应变化。 对象与方法：研究对象：普通健康昆明小鼠40只，分成生理盐水对照组(20只)和实验组（20只）。实验组给予EPEC-E2348/69混悬液灌胃，浓度5×10~8CFU/ml，剂量0.5ml。对照组处理因素将EPEC混悬液更换为生理盐水，余同实验组。灌胃8小时后观察小鼠的大便性状、精神状态、行为动作，计算腹泻指数、腹泻率、粪便培养EPEC检出率。灌胃前及灌胃后24h取小鼠外周血行血细胞分析，细菌灌胃后24h取实验组和对照组外周血，离心后取血浆。采用CBA技术检测血浆中的IL-2、TNF、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-4、IL-17A淋巴细胞因子水平。 结果： 1.小鼠感染性腹泻动物模型制备成功，实验组小鼠灌胃前WBC（7.45±1.86）×10~9较灌胃后24小时WBC（6.22±1.42）×10~9差异有统计学意义（P=0.0130.05）。N(%)、L(%)灌胃前后虽有改变但未有统计学意义（P=0.071，0.0760.05）；实验组腹泻指数（1.12±0.66）高于对照组（0.00±0.00）且有统计差异（P0.05），，实验组腹泻率（85%）及粪便培养EPEC检出率（75%）高于对照组0%；细菌灌胃后约8小时小鼠出现倦怠、精神萎靡、行动迟缓，部分小鼠出现粘液便、稀便，部分小鼠出现松软大便（较正常粪便含水多）。对照组小鼠大便性状及精神状态等无明显改变。 2.小鼠灌胃24h后外周血浆中Th1细胞因子：IL-2实验组（2.56±0.31）pg/ml较对照组（2.25±0.31）pg/ml升高且差异有统计学意义（P=0.006）,实验组TNF（11.89±3.12）pg/ml、IFN-γ（25.45±69.20）pg/ml较对照组TNF（10.42±3.35）pg/ml、IFN-γ（7.45±7.80）pg/ml水平升高，但差异无统计学意义（P=0.164，0.262）；Th2细胞因子：实验组IL-6（16.71±19.64）pg/ml、IL-10（12.11±3.61）pg/ml、IL-4（3.10±0.62）pg/ml与对照组IL-6（5.96±6.75）pg/ml、IL-10（12.11±3.61）pg/ml、IL-4（2.54±0.24）pg/ml比较水平升高，差异有统计学意义（P=0.030，0.022，0.001）；Th17细胞因子： IL-17A实验组（3.01±0.58）pg/ml较对照组（2.62±0.39）pg/ml升高且差异有统计学意义（P=0.020）。 3.实验组Th1细胞因子总水平（39.91±71.00）pg/ml较对照组（20.13±10.46）pg/ml水平上升，但差异无统计学意义（P=0.2370.05）.实验组Th2细胞因子总水平（34.84±20.06）pg/ml较对照组（20.62±8.37）pg/ml水平上升，差异有统计学意义（P=0.0070.05）.实验组Th1/Th2比例(0.975)较对照组(1.024)有所降低，但差异无统计学意义（P=0.8320.05）。 结论： 1.本实验采用经口灌喂EPEC感染小鼠，模仿人类胃肠感染主要诱发途径（经口感染），人类细菌感染性腹泻疾病动物模型复制成功。 2. EPEC感染小鼠后，小鼠外周血浆中IL-2、IL-6、IL-10、IL-4、IL-17A淋巴细胞因子水平明显升高，Th1/Th2/Th17细胞（因子）均参与了免疫反应过程，小鼠胃肠道感染后体内炎症反应是一个整体和动态过程。 3.EPEC感染小鼠后，小鼠体内以Th2细胞介导的体液免疫为主，Th1细胞介导的免疫反应在炎症反应过程中占非主导地位。 4.EPEC胃肠感染小鼠动物模型血浆中Th1、Th2、Th17类细胞因子升高及比例改变，提示EPEC肠道感染可能与慢性免疫性、变态反应性疾病的发生相关，有待更全面及深入的探索。
【关键词】：动物模型 腹泻 细菌感染 淋巴细胞因子
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R725.7
【目录】：

• 中英文缩略词对照5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 1.引言11-16
• 2.材料和方法16-20
• 2.1 材料16
• 2.1.1 实验动物16
• 2.1.2 主要实验试剂16
• 2.1.3 主要实验仪器16
• 2.2 方法16-19
• 2.2.1 感染性腹泻小鼠模型制备16-17
• 2.2.2 感染性腹泻小鼠外周血T淋巴细胞因子检测17-19
• 2.3 统计学处理19-20
• 3.结果20-29
• 3.1 感染性腹泻小鼠模型的建立20-21
• 3.2 血浆中 Th1、Th2、Th17 淋巴细胞因子水平：21
• 3.3 小鼠外周血总体 Th1、Th2 水平及 Th1/Th2 比例变化21-29
• 4.讨论29-36
• 4.1 动物模型制备及腹泻发病机理29-30
• 4.2 肠道免疫反应与 Th1、Th2、Th17 细胞及其代表因子30-36
• 5. 结论36-37
• 6.参考文献37-41
• 7.附录41-42
• 8.致谢42-43
• 综述43-52
• 参考文献49-52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：734372