川崎病线粒体病变及其机制的初步实验研究

发布时间：2017-09-04 23:45

  本文关键词：川崎病线粒体病变及其机制的初步实验研究

  更多相关文章： 川崎病 鼠模型 白色念珠菌细胞壁水溶物 川崎病 线粒体 NFAT1 mRNA NFAT2 mRNA

【摘要】：第一部分:白色念珠菌细胞壁水溶物诱导幼鼠川崎病模型的构建目的:通过腹腔重复注射白色念珠菌细胞壁水溶物诱导幼鼠产生免疫性血管炎,验证其与川崎病血管病变的相似性,为进一步进行川崎病实验研究提供稳定的动物模型。方法:60只4-6周龄的C57BL/6雄性幼鼠随机分为实验组和对照组各30只。实验组和对照组分别每只每次腹腔注射0.1ml白色念珠菌细胞壁水溶物(candida albicans water-soulble polyasccharide fraction CAWS)和0.1ml生理盐水,连续5天,于末次注射后第3d、17d、24d每组取10只小鼠分批采血、处死,留取心脏标本行组织病理学检查及对冠状动脉、主动脉、腹主动脉行透射电镜观察;采用夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)法,检测末次注射后第3d、17d、24d小鼠血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)水平。结果:1.组织病理学改变:实验组小鼠免疫性血管炎发生率为100%,对照组小鼠为0%。(1)HE染色:实验组幼鼠末次注射后第3天(急性期):实验组所有幼鼠主动脉根部、部分冠状动脉出现以淋巴细胞和单核细胞为主伴有少量中性粒细胞浸润,内皮细胞变性,内皮不连续,不同程度的心肌炎、心内膜炎、心外膜炎;第24天(恢复期):冠状动脉扩张;并有淋巴细胞、巨噬细胞浸润和成纤维细胞增生。(2)透射电镜结果;实验组幼鼠末次注射后第3天(急性期):实验组幼鼠血管内皮细胞广泛空泡变性、坏死、脱落,基底膜疏松,线粒体严重肿胀,空泡样变,基质松散,内部结构消失;内质网扩大。2.免疫学指标检测:实验组幼鼠末次注射后第3天(急性期),实验组血浆TNF-α、IL-6含量与对照组比较显着升高,差异有统计学意义(P0.01);第24天(恢复期):实验组血浆TNF-α、IL-6含量与急性期比较明显下降,差异有统计学意义(P0.01)。结论:白色念珠菌细胞壁水溶物能够诱导C57BL/6幼鼠产生免疫性血管炎,类似于人体川崎病免疫性血管炎改变,且模型建立较为便利、可重复性强,可作为川崎病研究的稳定动物模型。第二部分:川崎病线粒体病变与NFAT表达的初步实验研究目的:本研究拟在幼鼠川崎病模型上,观察血管内皮细胞线粒体在炎症不同时期的病理改变,并同步观察活化T细胞核因子(Nuclear factor of activated T Cell,NFAT)表达水平的变化,初步探讨线粒体病理改变与NFAT间的相关性。方法:36只4-6周龄的C57BL/6雄性小鼠随机分为实验组和对照组各18只。实验组和对照组分别每只每次腹腔注射0.1ml白色念珠菌细胞壁水溶物(CAWS)和0.1ml生理盐水,连续5天,于末次注射后第3d、17d、24d每组取6只小鼠分批采血、处死,留取心脏标本,对冠状动脉、主动脉、腹主动脉行透射电镜观察;采用Real-time PCR法检测CAWS注射后第3d、17d、24d小鼠外周血单个核细胞中NFAT1 m RNA、NFAT2m RNA表达水平;结果:1.透射电镜结果;实验组幼鼠冠状动脉、主动脉、腹主动脉血管内皮细胞线粒体在急性期(3d)出现严重肿胀,空泡样变,基质松散,内部结构消失;亚急性期(17d):线粒体肿胀较前减轻,空泡样变减轻,基质松散,内部结构不清;恢复期(24d):线粒体肿胀进一步减轻,其内可见嵴,部分线粒体结构正常。2.急性期(3d)NFAT1 m RNA、NFAT2m RNA表达水平与对照组比较显着升高,差异有统计学意义(P0.01);恢复期(24d)NFAT1 m RNA、NFAT2m RNA表达水平与急性期比较显着下降,差异有统计学意义(P0.01);恢复期(24d)NFAT1 m RNA、NFAT2m RNA表达水平与对照组比较升高不明显,差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.川崎病模型血管内皮细胞线粒体在急性期(3d)病变最为严重,恢复期(24d)较急性期病变减轻,部分线粒体病变恢复正常;2.NFAT1 m RNA、NFAT2 m RNA表达水平在川崎病模型急性期(3d)明显升高,恢复期(24d)较急性期表达水平明显下降;3.推测在川崎病中,NFAT与血管内皮细胞线粒体损伤可能具有相关性,其作用机制有待进一步实验研究。
【关键词】：川崎病 鼠模型 白色念珠菌细胞壁水溶物 川崎病 线粒体 NFAT1 mRNA NFAT2 mRNA
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R725.4
【目录】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 研究背景11-17
• 参考文献13-17
• 第一部分：白色念珠菌细胞壁水溶物诱导幼鼠川崎病模型的构建17-30
• 前言17
• 研究对象与方法17-22
• 结果22-25
• 讨论25-27
• 结论27
• 参考文献27-30
• 第二部分：川崎病线粒体病变与NFAT表达的初步实验研究30-46
• 前言30
• 研究对象与方法30-35
• 结果35-38
• 讨论38-42
• 结论42
• 参考文献42-46
• 综述46-54
• 参考文献50-54
• 英汉双解缩略词54-55
• 致谢55-56

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 张勤,陈梅;川崎病13例误诊分析[J];新医学;2000年12期

2 秦玉明,周爱卿,贲晓明,沈捷;川崎病患儿血清胰岛素样生长因子1动态变化的研究[J];中华儿科杂志;2000年05期

3 陈华云,闵玲,曾晓燕;川崎病1例报告[J];交通医学;2000年02期

4 王虹,于宪一,朴英爱;川崎病合并多脏器受累一例[J];小儿急救医学;2000年03期

5 廖若莎,陈汉华,杨华萃;川崎病的治疗进展[J];现代中西医结合杂志;2000年13期

6 颉立文;川崎病18例临床分析[J];中国航天工业医药;2000年02期

7 彭小明,汪秋珍;静脉注射丙种球蛋白治疗川崎病42例疗效分析[J];临床荟萃;2001年04期

8 周立娜,梅柏如;川崎病17例误诊原因分析[J];南京医科大学学报;2001年01期

9 冯琳,张宝玺;川崎病误诊1例[J];中国当代儿科杂志;2001年01期

10 张文英,石国光;静脉注射丙种球蛋白治疗川崎病的疗效观察[J];广州医药;2001年02期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 佐日汗;蔡招华;刘亚黎;;年长儿川崎病的临床特点研究[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2010年

2 胡剑威;冯金山;王轶;;川崎病十例临床分析[A];中华医学会全国风湿病学年会论文汇编[C];2003年

3 张俊;桂永浩;杨毅;;川崎病患儿外周血单个核细胞单核细胞趋化蛋白-1的变化及其意义[A];2006（第三届）江浙沪儿科学术会议暨浙江省儿科学术年会论文汇编[C];2006年

4 陆文文;张园海;褚茂平;吴蓉洲;陈其;项如莲;;川崎病患儿血管性血友病因子的变化[A];2006（第三届）江浙沪儿科学术会议暨浙江省儿科学术年会论文汇编[C];2006年

5 孙玉婵;;132例川崎病诊治体会回顾性分析[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

6 邓义芳;;心电图检查对川崎病诊断的临床意义[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

7 张俊;桂永浩;杨毅;;川崎病患儿外周血单个核细胞单核细胞趋化蛋白-1的变化及其意义[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

8 陈谨萍;李军;李垣君;李海翩;;川崎病197例临床分析[A];中华医学会第14次全国皮肤性病学术年会论文汇编[C];2008年

9 李彦晓;贾天明;徐灵敏;袁艳;;93例不完全川崎病和完全川崎病患儿的对比研究[A];中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（下册）[C];2012年

10 李晓辉;李瑞燕;徐酉华;周敏;张励;李晋蜀;;川崎病病原研究资料的系统评价[A];中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（下册）[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 长沙市中心医院主治医师 杨琴;川崎病误诊为淋巴结炎[N];大众卫生报;2013年

2 江西省赣南医学院附属医院儿科教授 刘跃梅;发热超一周 警惕川崎病[N];大众卫生报;2003年

3 本报记者 赵绍华 特约记者 侯晓菊;川崎病：孩子心脏第一杀手[N];健康时报;2004年

4 通讯员 张群　实习生 柏玲　记者 倪秀萍;省人医半月接到两例“川崎病”[N];南京日报;2005年

5 保健时报特约记者 张献怀;治川崎病首推阿司匹林[N];保健时报;2007年

6 张献怀;别把川崎病当感冒[N];大众卫生报;2007年

7 余素明　张献怀;别把川崎病当感冒[N];健康报;2007年

8 张献怀;川崎病、感冒不要混淆[N];健康时报;2007年

9 张献怀;警惕：不要把川崎病当成感冒[N];科技日报;2007年

10 张献怀;川崎病当感冒治 后果很严重[N];中国医药报;2007年

中国博士学位论文全文数据库 前7条

1 奚立;肿瘤坏死因子α和川崎病冠状动脉损害的相关性研究[D];复旦大学;2006年

2 刘晓琴;川崎病恢复晚期血管病变相关因素及预测指标的研究[D];复旦大学;2007年

3 刘芮汐;抵抗素在川崎病患儿冠状动脉损伤中的作用及其机制研究[D];重庆医科大学;2013年

4 彭华;1，25（OH）_2D_3及其受体在川崎病发病中的作用及分子学机制研究[D];华中科技大学;2006年

5 胡景伟;糖皮质激素治疗川崎病的循证医学研究与57例KD患者临床分析[D];中国协和医科大学;2010年

6 张俊;川崎病外周血单个核细胞iNOS及相关趋化因子表达的研究[D];复旦大学;2006年

7 覃丽君;LCWE诱导小鼠冠状动脉炎的实验研究—川崎病动物模型的建立[D];华中科技大学;2006年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 何永;149例川崎病回顾性分析及AngⅡ、8-ISO-PGF2a、ox-LDL在川崎病中的表达和意义[D];川北医学院;2015年

2 赵俊山;川崎病调节性细胞亚群异常机制的初步研究[D];遵义医学院;2016年

3 牛旭旭;血浆可溶型不规则趋化因子与川崎病的相关性研究[D];山西医科大学;2016年

4 余艳萍;丙种球蛋白无反应型川崎病的危险因素研究[D];新疆医科大学;2016年

5 秦传付;川崎病线粒体病变及其机制的初步实验研究[D];苏州大学;2016年

6 毛敏;伴冠状动脉病变的川崎病儿童临床特点分析[D];山东大学;2016年

7 周陈荣;2012-2015年盐城市区住院的川崎病临床特征分析研究[D];苏州大学;2016年

8 吴佳慧;全基因外显子测序技术探寻川崎病易感基因的研究[D];苏州大学;2016年

9 赵菁;2011年-2015年盐城市川崎病住院病例临床特征分析[D];苏州大学;2016年

10 邓万丽;免疫球蛋白联合糖皮质激素治疗川崎病的meta分析[D];重庆医科大学;2016年

，

本文编号：794570