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EV71感染患儿细胞免疫功能和外周血单个核细胞Toll样受体的变化及临床意义

发布时间:2017-09-08 06:13

  本文关键词:EV71感染患儿细胞免疫功能和外周血单个核细胞Toll样受体的变化及临床意义


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【摘要】:目的 检测肠道病毒71型(Enterovirus71, EV71)感染患儿细胞免疫功能的变化及外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC) Toll样受体(Toll-likereceptors, TLRs)3、4、7mRNA的表达。探讨细胞免疫功能及Toll样受体信号通路在EV71致病机制中的作用,为EV71致病机制的研究提供理论依据。 方法 第一部分收集确诊为EV71感染的患儿55例,分为轻症组、重症组、危重症组,其中轻症组患儿20例,重症组患儿25例,危重症组患儿10例。对EV71感染患儿临床资料进行分析并应用流式细胞术检测其外周血B细胞、T细胞亚群、NK细胞数量。 第二部分选择同期门诊体检正常的儿童18例作为正常对照组。应用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)方法检测EV71感染患儿及正常对照组儿童PBMC TLR3、TLR4、TLR7mRNA的表达,通过TLR3基因=TLR3基因表达/β-actin表达、TLR4基因=TLR4基因表达/β-actin表达和TLR7基因=TLR7基因表达/β-actin表达计算检测基因的表达水平。应用ELISA方法检测EV71感染患儿及正常对照组儿童外周血血浆细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α的水平。 结果 1.临床资料分析:55例EV71感染患儿中轻症组患儿20例,男11例,女9例,平均年龄(月)29.2±17.8;重症组患儿25例,男9例,女16例,平均年龄(月)30.7±16;危重症组患儿10例,男6例,女4例,平均年龄(月)26.1±18.7。三组性别、年龄比较无统计学差异(χ2=2.393,p=0.331;F=0.149,p0.05)。25例重症组患儿中合并急性驰缓性麻痹4例。轻症组及重症组患儿均痊愈出院,10例危重症患儿因脑干脑炎、神经源性肺水肿、呼吸衰竭需机械通气6例,死亡3例,放弃治疗1例,痊愈出院6例。入院前发热天数三组之间比较无差异(F=2.39, p0.05)。患儿病程中最高体温三组间比较有统计学意义,重症组、危重症组患儿最高体温明显高于轻症组(p0.05)。患儿入院时测血糖、白细胞数量、中性粒细胞数量、血小板数量危重症患儿比重症患儿、轻症患儿明显增高,有统计学意义(p0.05)。 2.外周血T细胞亚群、NK细胞、B细胞数量变化:EV71感染患儿CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量在重症组、危重症组均出现明显下降。其中危重症患儿CD3+、CD4+T淋巴细胞数量、NK细胞数量与轻症组、重症组相比明显下降,差异有统计学意义(p0.05)。B淋巴细胞绝对计数在各组间无明显差异。 3. Toll样受体表达情况:EV71感染患儿(包括轻症组、重症组、危重症组)PBMCTLR4、TLR7mRNA的表达较正常对照组显著增高,而三组间比较发现重症组患儿TLR4、TLR7mRNA表达较轻症组、危重症组患儿明显增高。EV71感染轻症组患儿TLR3mRNA表达明显高于正常对照组、重症组、危重症组(p0.05),而危重症组患儿与正常对照组及重症组患儿相比明显下降(p0.05)。 4.细胞因子水平变化:对EV71感染患儿进行细胞因子检测发现危重症组患儿外周血中IL-6的水平明显增高,差异具有统计学意义(p0.05)。抗炎症细胞因子IL-10的水平在各组间比较均有统计学意义(p0.05),随着病情加重,IL-10的水平不断升高。促炎症细胞因子TNF-α在危重症患儿中出现明显下降,与轻症患儿、重症患儿相比具有统计学意义(p0.05)。IL-10/TNF-α随着病情严重不断增高(p0.05)。 结论 1.EV71感染危重症组患儿CD3+、CD4+T淋巴细胞数量、NK细胞数量明显下降。B淋巴细胞数量在各组间无明显差异。 2.EV71感染患儿存在明显的免疫功能异常,,TLR3mRNA的表达在危重组患儿中出现明显下降,而重症组患儿TLR4mRNA、TLR7mRNA的表达出现明显增高。提示TLRs异常活化可能参与EV71的致病机制,是导致病情变化的因素之一。 3. EV71感染患儿外周血血浆IL-6、IL-10的水平随病情严重明显增高,危重症患儿TNF-α的水平明显下降,提示细胞因子的改变可能是导致EV71感染不同临床表现的因素之一。
【关键词】:肠道病毒71型 细胞免疫 Toll样受体 细胞因子
【学位授予单位】:第四军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R725.1
【目录】:
  • 缩略语表4-7
  • 中文摘要7-10
  • 英文摘要10-13
  • 前言13-15
  • 文献回顾15-27
  • 第一部分 EV71 感染患儿病原学诊断及细胞免疫功能检测27-36
  • 1 材料27-28
  • 2 方法28-30
  • 3 结果30-33
  • 4 讨论33-36
  • 第二部分 EV71 感染患儿外周血单个核细胞 Toll 样受体的表达及细胞因子的检测36-52
  • 1 材料36-38
  • 2 方法38-43
  • 3 结果43-49
  • 4 讨论49-52
  • 小结52-53
  • 参考文献53-61
  • 个人简历和研究成果61-62
  • 致谢62

【参考文献】

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1 赵晓莉;潘凯丽;钱新宏;李迎侠;杜莉;王英娟;罗建峰;张W

本文编号:812347


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