孕前及孕期母鼠高脂喂养对仔鼠生长的影响

发布时间：2017-09-21 07:13

  本文关键词：孕前及孕期母鼠高脂喂养对仔鼠生长的影响

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【摘要】：目的 1.通过给予母鼠高脂喂养,观察母鼠早期(孕前期及孕期)暴露于高脂环境对仔鼠生长的影响。 2.观察高脂环境下新生仔鼠肝脏的脂肪沉积和IGF-I的分泌。 3.进一步明确IGF-I受体后信号通路AKT1/PI3K、MAKP的变化。 方法 40只3周龄SD雌性大鼠分为两组,高脂组(High fat,HF组)和对照组(Control,C组)。20只高脂组雌鼠喂养35%高脂饲料,20只对照雌鼠组及24只雄鼠普通维持饲料喂养。喂养8周后,HF组和C组各取8只观察母鼠肝脏病理,其余按雌雄比例1：1合笼交配,孕期3周。仔鼠出生后处死,分别进行以下检测：(1)新生仔鼠出生24小时内测量体重及身长；(2)新生仔鼠断头取血,ALT、AST、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)高密度脂蛋白(HDL)低密度脂蛋白(LDL)、血糖(GLU)采用全自动生化分析仪检测。IGF-1采用酶联免疫法检测；(3)母鼠肝脏及新生仔鼠肝脏组织切片苏木素-伊红染色观察肝脏病理形态；(4)免疫组织化EnVision法染色,显示左下肢胫骨、股骨胰岛素底物(IRS1)其磷酸化(Phospho-IRS1)的表达；(5)Western blot检测新生仔鼠肝细胞中IGF-1的蛋白表达量及新生鼠左下肢长骨的PI3K/Phospho-PI3K AKT1/Phospho-AKT1、 MAKP/Phospho-MAKP蛋白表达量。 结果 高脂组产95只新生仔鼠,对照组产128只新生仔鼠,HF组出生体重较C组低[(6.11±1.17)g对比(6.75±0.81)g,P0.05],体长较C组短[(66.71±3.94)mm对比(76.9±3.76)mm,P0.05]； HF组新生仔鼠血清IGF-I较C组下降20.1%[(43.35±17.02)pg/ml对比(54.29±12.34)pg/m1,P0.05]；HF组新生仔鼠AST高于C组[(345.86±135.62)对比(225.89±47.64),P0.05],ALT、TG、CHO、HDL、LDL、GLU组间未见差异(P0.05)；肝脏组织病理学显示,HF组母鼠及仔鼠肝脏都有明显的脂质沉积,肝细胞浆内有较多小而密的脂质沉积,肝胞浆呈透明的空泡状；免疫组化结果显示, HF组的IRS以及Phospho--IRS在胫骨软骨细胞呈阳性表达,积分光密度及平均光密度结果提示组间无明显差异；HF组肝脏IGF-I蛋白表达量高于对照组[(1.45±0.33)对比(0.65±0.22),P0.05]。HF组长骨软骨细胞MAPK表达高于C组[(1.13±0.12)对比(0.88±0.13),P0.05],而PI3K[(1.19±0.44)对比(0.83±0.26,P0.05)]、AKT1/Phospho-AKT1[(0.97±0.14对比1.18±0.44,PO.05)]与C组无差异,Phospho-PI3K、Phospho-MAPK受技术因素影响,未检测到相应蛋白条带。 结论1.早期暴露于高脂环境使仔鼠出生时身长短、体重低,宫内发育障碍。 2.高脂环境下,新生仔鼠肝脏脂质沉积明显,肝功能受损。血清IGF-I含量下降,但肝细胞IGF-I的蛋白表达量并未降低。 3.IGF-I的受体后信号通路PI3K、AKT1并未受损。且总的MAPK表达量显示其信号通路增强,IGF-I作用于软骨细胞的效能并未降低。早期暴露于高脂环境引起新生仔鼠生长障碍的机制仍需进一度探索。
【关键词】：机制 母鼠 生长障碍 早期高脂喂养 仔鼠
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R723.14;R714.256
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文缩略词对照表9-11
• 综述一：早期暴露于高脂环境生长发育影响的实验研究11-20
• 1. 早期高脂饮食对体重的影响11-13
• 2. 早期高脂饮食对体长的影响13-14
• 3. 早期高脂饮食对性发育的影响14-15
• 4. 结语15-17
• 参考文献17-20
• 综述二：宫内发育迟缓的研究进展20-34
• 1. 母体营养状况对妊娠的影响20-21
• 2. 环境对妊娠的影响21-23
• 2.1 饮食21-22
• 2.2 饮酒和吸烟22-23
• 2.3 空气和食品污染23
• 2.4 社会因素23
• 3. 胎儿宫内生长迟缓的遗传易感性23-25
• 参考文献25-34
• 综述三：中医药对宫内发育迟缓的认识34-38
• 参考文献36-38
• 实验一：孕前和孕期母鼠高脂喂养对仔鼠肝脏及生长的影响38-50
• 前言38
• 材料与方法38-42
• 1. 材料38-39
• 1.1 实验药品与试剂38
• 1.2 主要仪器38-39
• 1.3 实验动物39
• 2. 方法39-42
• 2.1 动物造模及分组39
• 2.2 体重及身长测量39-40
• 2.3 血清学检测40
• 2.4 病理组织学及免疫组织化学实验40-41
• 2.5 Western blot提取蛋白41-42
• 2.6 统计学分析42
• 结果42-46
• 1. 雌鼠体重改变42-43
• 2. 各组新生仔鼠出生体重及体长43
• 3. 各组新生仔鼠血清IGF-I水平43
• 4. 雌鼠血清肝功能及血脂43-44
• 5. 各组新生仔鼠血清肝功能及血脂44
• 6. 肝脏组织病理形态44-45
• 7. Western Blot检测结果45-46
• 讨论46-48
• 参考文献48-50
• 实验二：孕前及孕期母鼠高脂喂养对新生仔鼠骨骼的影响50-61
• 前言50
• 材料与方法50-54
• 1. 材料50-52
• 1.1 实验药品与试剂50-51
• 1.2 主要仪器51
• 1.3 实验动物51-52
• 2. 方法52-54
• 2.1 动物造模及分组52
• 2.2 免疫组织化学法检测52-53
• 2.3 Western blot提取蛋白53-54
• 2.4 统计学分析54
• 结果54-57
• 1. 两组间仔鼠软骨细胞的IRS-1、Phospho-IRS1表达比较54-55
• 2. 两组间仔鼠软骨细胞的Phospho-IRS1表达比较55-56
• 3. 两组间PI3K、AKT1/Phospho-AKT1、MAPK的表达比较56-57
• 讨论57-59
• 参考文献59-61
• 致谢61-62
• 个人简历62

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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本文编号：893084