益生菌对轮状病毒性腹泻小鼠肠道屏障的影响及机制的探讨

发布时间：2017-09-27 09:40

  本文关键词：益生菌对轮状病毒性腹泻小鼠肠道屏障的影响及机制的探讨

  更多相关文章： 益生菌 轮状病毒 乳鼠 肠道粘膜屏障 sIgA

【摘要】：目的：通过轮状病毒(rotavirus，RV)感染新生小鼠，观察益生菌对RV感染小鼠肠道粘膜的作用，探讨益生菌对肠道粘膜屏障的影响及机制。 方法：用MA104细胞培养轮状病毒株，并进行蚀斑实验检测RV毒力。将80只昆明乳鼠随机分为对照组(20只)、模型组(30只)、益生菌组(30只)。益生菌组及模型组乳鼠禁食6小时后给予0.2ml(2×108PFU)的KU株轮状病毒。病毒吸附24h后，益生菌组给予酪酸梭菌二联活菌制剂108CFU/kg(0.1ml/只)灌服，直至实验结束，对照组和模型组分别每天给予0.1ml生理盐水灌胃。每天观察乳鼠，记录乳鼠的腹泻只数及体重；分别于灌服益生菌后第1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d处死相应组乳鼠3~4只。取小鼠小肠组织，用光镜和电镜观察肠粘膜的病理变化；通过免疫组化方法(SABC法)检测小肠粘膜中紧密连接蛋白ZO-1(zonula occludens-1)、Occludin的分布和表达；取颈部动脉血液作TNF-α检测；取小肠液体作sIgA检测。提取小肠组织核蛋白，用ELISA法检测核转录因子NF-κB的含量。采用SPSS17.0软件进行统计学分析。 结果：1.观察期间，乳鼠腹泻率及体重变化显示，与正常对照组相比，模型组和益生菌组均出现腹泻，，其中模型组在第3d腹泻乳鼠率达到高峰，体重明显下降(P0.05)；同时间点益生菌组与模型组比较，乳鼠腹泻率下降，体重增长。 2.肠粘膜病理改变的光镜和电镜观察结果显示，正常对照组肠粘膜绒毛形态结构完整，模型组肠粘膜上皮细胞空泡样变、绒毛结构紊乱；益生菌组肠粘膜病理改变较模型组明显减轻。 3.免疫组织化学结果显示，与正常对照组相比，模型组和益生菌组ZO-1, Occludin表达明显降低(P0.05)，第3d其值降到最低；益生菌组与模型组同时间点相比较，益生菌组的ZO-1、Occludin表达量显著增加(P0.05)。 4..肠道内sIgA结果显示，与正常对照组相比，模型组和益生菌组sIgA有明显减低(P0.05)，模型组在第3d其值降到最低，以后逐渐恢复。同时间点益生菌组与模型组比较，sIgA显著增加(P0.05)。 5.对照组血清TNF-α、小肠组织NF-κB值一直处于较低水平，模型组与益生菌组血清TNF-α、NF-κB值均显著升高(P0.05)，给药后第2天出现明显升高，第3天达到高峰，随后缓慢降低；而同时间点的益生菌组TNF-α、NF-κB较模型组显著降低(P0.05)。 结论：益生菌能够改善轮状病毒腹泻乳鼠的肠黏膜的组织病理学变化，增加上皮细胞间紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的表达分布；增加肠道sIgA的产生，减少炎症因子TNF-α, NF-κB的产生，从而有利于保护肠道粘膜屏障，促进粘膜屏障的恢复。
【关键词】：益生菌 轮状病毒 乳鼠 肠道粘膜屏障 sIgA
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R725.7
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-10
• 材料与方法10-20
• 结果20-27
• 讨论27-32
• 小结32-33
• 参考文献33-43
• 综述43-52
• 参考文献49-52
• 缩略词对照表52-53
• 附录53-54
• 致谢54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 杨蒙蒙;罗佳波;陈文;;止泻退热片治疗轮状病毒感染性腹泻的实验研究[J];南方医科大学学报;2008年11期

2 邓朝晖;许春娣;陈舜年;;新生小鼠轮状病毒腹泻模型建立及病理学致病机制研究[J];临床儿科杂志;2008年10期

3 蔡宝珍,黄志华;微生态调节剂干预母乳性黄疸临床观察和机制探讨[J];新生儿科杂志;2002年04期

本文编号：928976