TG2抑制剂对大鼠肺动脉高压肺血管重构的影响及其机制研究

发布时间：2017-09-30 14:31

  本文关键词：TG2抑制剂对大鼠肺动脉高压肺血管重构的影响及其机制研究

  更多相关文章： 肺动脉高压 转谷酰胺酶2型 肺血管重构 五羟色胺 血清素化

【摘要】：目的:采用左肺切除加野百合碱(monocrotaline,MCT)注射建立大鼠肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)模型,探讨谷氨酰胺转氨酶2型(Transglutaminase 2,TG2)在PAH形成中与肺血管重构的关系,进一步探讨TG2抑制剂胱胺二盐酸(cystamine dihydrochloride)预防大鼠PAH肺血管重构的作用及其机制,为临床治疗PAH寻找新的思路及干预靶点。方法:1.将健康雄性SD大鼠30只随机分为3组,即空白对照组(10只):不给予任何处理;模型组(10只):左肺切除术后第7d于项背部注射MCT(60mg/kg)建立PAH模型;干预组(10只):左肺切除加MCT注射同模型组,于术后第5d腹腔注射胱胺二盐酸(112mg/kg),每天1次,持续给药至术后35d。2.建模完成后检测各组大鼠的平均肺动脉压力(mean pulmonary artery pressure,m PAP)及右心肥厚指数,将大鼠肺组织做肺弹力纤维染色、HE染色,观察肺组织的病理改变,计算肺小动脉中膜厚度百分比(WT%)、肺小动脉管壁面积与血管总面积比值(WA%)、肺小动脉新生内膜增殖度等指标。3.采用荧光定量PCR检测3组大鼠肺组织TG2、5-HTT及ROCK2 m RNA表达水平的变化。4.采用蛋白质免疫印记(Western blot)检测各组大鼠肺组织TG2、5-HTT、Rho A、ROCK2蛋白表达量变化。结果:1.与对照组比较,于35d模型组大鼠成功的诱导了PAH模型:m PAP明显升高,出现了严重的右心室肥大,肺小动脉中膜明显增厚,并有新生内膜出现。与对照组比较,模型组m PAP、右心肥厚指数百分比(RV/(LV+S)%、肺小动脉中膜厚度百分比(WT%)、肺小动脉管壁面积与血管总面积比值(WA%)、新生内膜增殖度百分比分别为[(55.60±5.75)mm Hg、58.10±4.27%、46.03±7.14%、72.28±3.59%、78.77±6.50%,均明显高于对照组(22.02±1.98)mm Hg、27.81±1.81%、21.66±4.23%、31.95±4.04%、0]。差异有统计学意义(P均0.01)。2.预防性使用胱胺二盐酸后,干预组m PAP、右心肥厚指数、肺小动脉中膜厚度百分比(WT%)、肺小动脉管壁面积与血管总面积比值(WA%),新生内膜增殖度百分比分别为[(36.19±2.67)mm Hg、38.87±2.64%、25.61±6.62%、40.77±8.70%,22.18±4.52]。与模型组比较,均有明显下降,差异有统计学意义(P均0.01)。3.RT-PCR结果显示模型组大鼠TG2、5-HTT及ROCK2 m RNA表达水平(3.06±0.53、2.35±0.40、7.80±1.82)明显高于对照组(0.30±0.35、0.49±0.29、0.83±0.91),差异有统计学意义(P均0.01);给予胱胺二盐酸干预后,干预组TG2、5-HTT和ROCK2m RNA表达水平均有降低(1.28±1.35、1.15±0.93、1.61±1.17),与模型组大鼠比较,差异有统计学意义(P均0.01)。4.Wsetern blot检测肺组织TG2、5-HTT、Rho A、ROCK2表达量,结果显示与对照组(1.35±0.12、1.54±0.12、0.57±0.05、0.92±0.11)相比较,模型组肺组织TG2、5-HTT、Rho A、ROCK2表达量显著增加(2.18±0.16、2.17±0.09、1.12±0.07、1.64±0.08),差异有统计学意义(P均0.01)。而干预组TG2、5-HTT、Rho A、ROCK2表达较模型组则有不同程度的降低(1.68±0.41、1.64±0.11、0.68±0.06、1.02±0.19),差异有统计学意义(P均0.01)。结论:1.左肺切除+野百合碱成功诱导大鼠肺动脉高压的形成,并出现了梗阻性肺动脉高压典型肺血管重构的病理特征。2.TG2抑制剂胱胺二盐酸能一定程度预防PAH的形成。3.胱胺二盐酸减轻大鼠PAH的形成可能与抑制TG2活性、5-HTT表达有关,并且可能与抑制Rho A/ROCK信号通路激活有关。4.Rho A/ROCK信号通路可能在5-HT致PAH的发病机制中起作用。
【关键词】：肺动脉高压 转谷酰胺酶2型 肺血管重构 五羟色胺 血清素化
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R725.4
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 前言11-16
• 材料与方法16-34
• 结果34-38
• 附图表38-46
• 讨论46-56
• 结论56-57
• 参考文献57-66
• 英汉缩略词对照表66-67
• 致谢67-68
• 五羟色胺及其血清素化在肺动脉高压发病机制中的研究进展（综述）68-85
• 参考文献78-85

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 申霖;高芬;;低氧性肺动脉高压肺血管重构中的细胞因子调控[J];社区医学杂志;2011年02期

2 荆志成;;肺血管重构[J];中华医学信息导报;2006年02期

3 余国膺;;缺氧引起肺血管重构的细胞及分子机制[J];中国慢性病预防与控制;2007年03期

4 杨玲玲;张钰哲;吴建新;;肺动脉高压动物模型及参与肺血管重构生长因子的研究进展[J];医学综述;2010年02期

5 刘瀚e，

本文编号：948753