超低微浓度SPIO标记大鼠BMSCs及体内外3.0TMR示踪研究

发布时间：2020-04-03 13:15

【摘要】：目的：探索简单、高效、安全、无细胞外铁产生的超低微浓度菲立磁-硫酸鱼精蛋白复合物标记大鼠骨髓间充质干细胞的方法；将标记干细胞移植入大鼠脊髓损伤模型，分别使用3.0T FSE T2WI、3DFIESTA、ESWAN序列于移植后14天检测移植标记干细胞在活体内的MR信号及图像信噪比，探索出一种最佳的3.0T MR活体示踪序列。方法：（1）贴壁法培养大鼠骨髓间充质干细胞。待3代细胞汇合至90%时，更换无血清培养液，根据菲立磁和硫酸鱼精蛋白浓度的不同分为四组：一组[（7.50:1.00）μg/ml]；二组[（10.00:1.20）μg/ml]；三组[（15.00:1.80）μl/ml]；四组为对照组。加入培养液混匀，置于5%CO2孵育箱中孵育15分钟，补加血清后继续孵育至次日。标记结束后普鲁士蓝染色检测细胞标记率、透射电子显微镜观察细胞内外铁分布、台盼兰染色检测细胞活力、并行3.0T MR检测标记细胞MR信号。（2）选取标记效果最佳的菲立磁和硫酸鱼精蛋白浓度[（10.00:1.20）μg/ml]体外标记3代骨髓间充质干细胞，制备大鼠横断脊髓损伤模型，随机法分为两组，一组移植未标记干细胞组二组移植标记干细胞组，每组6只大鼠。于移植后14天行3.0T MR FSET2WI、3DFIESTA、ESWAN检测，并对移植干细胞在3种MR序列的磁共振信号变化率、图像信噪比进行单因素方差分析。并处死一只大鼠行HE和普鲁士蓝染色与磁共振信号分布进行比对。结果：（1）原代细胞培养5-7天便可见星形或长梭形贴壁细胞汇合至80-90%，连续传代培养8-12天至三代细胞，便可见形态均一的长梭形细胞。（2）菲立磁与鱼精蛋白[（10.00:1.20）μg/ml]可高效标记大鼠骨髓间充质干细胞，普鲁士蓝染色几乎所有细胞胞质内均可见蓝染颗粒，细胞外未见蓝染颗粒，透射电子显微镜观察见胞浆内大量黑色针刺状高密度电子致密物，四组细胞间细胞活力无统计学差异，体外磁共振可以检测到104个标记细胞。（3）移植后第14天标记干细胞在三种序列图像上的标记BMSCs信号降低依次分别为：（43.40±3.20）%、（77.80±3.59）%、（79.60±3.58）%，总体间具有统计学差异，P＜0.05，FSET2WI与3DFIESTA、ESWAN序列间均具有统计学差异，P＜0.05，3DFIESTA、 ESWAN序列间无统计学差异， P＞0.05；图像信噪比依次为：20.95±1.91、45.70±9.40、44.50±8.29，总体间具有统计学差异，P＜0.05FSET2WI与3DFIESTA、ESWAN序列间均具有统计学差异，P＜0.05，3DFIESTA、ESWAN序列间无统计学差异，P＞0.05。对照组脊髓内未见明显低信号影。脊髓普鲁士蓝染色显示损伤区附近大量蓝染颗粒。对照组脊髓普鲁士蓝染色未见明显蓝染颗粒。结论：（1）使用超低微浓度菲立磁和鱼精蛋白（10.00：1.20μg/ml）可高效标记大鼠骨髓间充质干细胞；（2）体外磁共振可检测到104个标记细胞；（3）3.0T MRFSET2WI、3DFIESTA、ESWAN序列均可以检测到SPIO标记BMSCs在大鼠脊髓内的MR信号，其中以3DFIESTA、ESWAN序列效果最佳。
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R445.2

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 李禄全,余加林,刘官信,官晓清;复方丹参注射液诱导鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化的研究[J];中华儿科杂志;2005年01期

2 张怡,赵连三,唐红;小鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养[J];生物医学工程学杂志;2004年05期

3 胡军,刘小林,朱家恺,邓宇斌,向剑平,王建云,邹一丰;猕猴骨髓基质干细胞体外培养及其生物学特性的研究[J];中华显微外科杂志;2004年02期

4 许春姣,翦新春,成洪泉,郭峰;黄芪对兔骨髓基质细胞增殖和向成骨细胞分化的影响[J];中南大学学报(医学版);2004年04期

5 滕晓华,邹雨汐,徐如祥,黄涛,姜晓丹;神经移植的种子细胞:大鼠骨髓基质细胞部分生物学特性[J];中国临床康复;2005年05期

6 钟池,钟春玖,罗玉敏,汪洋,秦震,沈馨亚;骨髓基质细胞静脉移植治疗大鼠短暂性局灶性脑缺血[J];中华神经医学杂志;2004年02期

7 李长宇,景猛,刘新权,刘恩重,王芳;体外诱导成人骨髓基质细胞分化为神经元样细胞[J];中国微侵袭神经外科杂志;2004年11期

8 鞠秀丽,张红,沈柏均;骨髓干细胞可塑性的研究进展[J];国外医学.儿科学分册;2005年01期

9 孔清泉,项舟,杨志明;骨髓基质干细胞作软骨组织工程种子细胞研究[J];中国修复重建外科杂志;2002年04期

10 陈剑荣,徐如祥,姜晓丹,徐强,蔡颖谦,邹雨汐,丁涟沭;兔骨髓基质细胞诱导分化成神经元样细胞的研究[J];第一军医大学学报;2004年04期

相关会议论文 前10条

1 徐道华;;小檗碱对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的影响及作用机制[A];中华医学会第六次全国骨质疏松和骨矿盐疾病学术会议暨中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会成立十周年论文汇编[C];2011年

2 王胜裕;刘士远;;SPIO增强MRI对兔乆窝淋巴结显影最佳注射[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年

3 于明曦;杨馥源;陈文利;周全;高鹏;;SPIO标记人内皮细胞的生物学特性及MR成像的实验研究[A];第七届全国光生物学学术会议论文摘要集[C];2010年

4 于德新;宋吉慧;马祥兴;王青;;靶向AFP的SPIO在肝细胞癌特异性成像中的价值研究[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年

5 沈钧康;蒋震;周剑影;赵培峰;张彩元;陆雪官;田野;;MRI菲立磁增强扫描对急性初期肝放射性损伤的初步实验观察[A];全国医学影像技术学术会议（CMIT-2004）论文汇编[C];2004年

6 刘晓颖;韩思源;;不同浓度神经生长因子诱导BMSCs为神经元样细胞[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年

7 余细勇;;BMSCs作为心肌组织工程种子细胞的分子药理学研究[A];中国药理学会第九次全国会员代表大会暨全国药理学术会议论文集[C];2007年

8 张瑞平;李健丁;刘强;;蛛网膜下腔移植SPIO标记的MSCs在兔脊髓损伤模型[A];中华医学会第十八次全国放射学学术会议论文汇编[C];2011年

9 刘学政;侯阳;左中夫;;pEGFP/Ang-1转染大鼠BMSCs对高糖环境中视网膜血管内皮细胞的保护作用[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年

10 邢宏利;边云飞;肖传实;;流体切应力对5-Aza诱导BMSCs成心肌样细胞影响的初步研究[A];第十三次全国心血管病学术会议论文集[C];2011年

相关博士学位论文 前10条

1 张勇;SPIO标记大鼠BMSCs移植治疗缺血性脑梗死的MR成像研究[D];郑州大学;2010年

2 张瑞平;SPIO纳米颗粒标记BMSCs移植治疗兔脊髓损伤的MR活体示踪[D];山西医科大学;2011年

3 范彩霞;新型肿瘤靶向的叶酸—羧甲基壳聚糖—超顺磁氧化铁纳米粒的合成及评价[D];南方医科大学;2010年

4 魏梦绮;SPIO标记自体内皮祖细胞经冠状动脉移植治疗性心的活体MR成像实验研究[D];第四军医大学;2010年

5 欧阳洋;偶联奥曲肽的SPIO的制备及SSTR阳性、阴性肿瘤细胞对其摄取差异性的研究[D];中南大学;2010年

6 李彪;普伐他汀对BMSCs复合FS移植治疗兔早期激素性股骨头坏死的干预研究[D];昆明医学院;2011年

7 王浩浩;新型SPION的合成及其对MSCs的体外标记和MR活体示踪研究[D];浙江大学;2011年

8 王吉昌;低氧预处理的BMSCs移植对超长宽比例随意型皮瓣成活率的影响[D];山东大学;2012年

9 赵志正;复方苦参注射液干预BMSCs与乳腺癌细胞交互作用机理的体外实验研究[D];中国中医科学院;2012年

10 王闯建;复合BMSCs包芯结构骨支架材料修复兔桡骨骨缺损的实验研究[D];第四军医大学;2012年

相关硕士学位论文 前10条

1 陈乐;超低微浓度SPIO标记大鼠BMSCs及体内外3.0TMR示踪研究[D];新疆医科大学;2012年

2 曹晶;长循环SPIO脂质体的合成及与SPIO在MRI淋巴成像的对比研究[D];南方医科大学;2010年

3 林炳权;长循环SPIO-PBCA-PEG纳米微粒的合成及其在大鼠肝脏肿瘤MR成像中的研究[D];南方医科大学;2010年

4 冯勇;磁靶向移植SPIO标记的hbMSCs修复关节软骨缺损可行性的初步研究[D];第三军医大学;2011年

5 左后东;iRGD肽对SPIO标记膜腺癌细胞的影响[D];川北医学院;2012年

6 孙海涛;大鼠脑梗死模型骨髓基质细胞经尾静脉植入后MR初步研究[D];苏州大学;2008年

7 邱伟;SPIO体外标记兔骨髓间充质干细胞对其生物学特性的影响以及MRI成像特征[D];昆明医学院;2011年

8 谢星;骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗挤压伤性急性肾损伤（衰竭）的实验研究[D];福建医科大学;2011年

9 彭德新;大鼠骨髓间充质干细胞培养、鉴定、SPIO标记及MRI活体示踪的实验研究[D];福建医科大学;2011年

10 范晶晶;SPIO标记的ADSCs生物活性及MR成像研究[D];浙江大学;2012年

，

本文编号：2613417