～（188）Re-octreotide，～（99）Tc～m-octreotide标记和体外受体活性的实验研究

发布时间：2020-06-23 13:55

【摘要】： Octreotide等生长抑素类似物可与神经内分泌肿瘤、肺癌、乳腺癌和胰腺癌等肿瘤细胞膜表达的高密度的生长抑素受体结合，从而抑制肿瘤细胞生长。用~(188)Re、~(99)Tc~m标记octreotide可能是实现对上述肿瘤进行放射性核素显像及治疗的良好途径。本文进行了~(188)Re-octreotide，~(99)Tc~m-octreotide标记和体外受体活性的实验研究。 (一)~(188)Re-octreotide，~(99)Tc~m-octreotide标记的实验研究目的探索具有较高放化纯度和良好稳定性的~(188)Re、~(99)Tc~m直接标记octreotide的方法，为研究肿瘤生长抑素受体显像及治疗奠定基础。方法(1)~(99)Tc~m直接标记octreotide采用分步还原法。先用抗坏血酸还原octreotide，然后用连二亚硫酸钠(Na_2S_2O_4)还原~(99)Tc~mO_4~-进行直接标记；并改变标记条件：①分别在温度22、60、100℃下进行反应；②抗坏血酸溶液的pH值分别为3.0、4.5、5.5、6.5；③分别用葡萄糖酸钠或醋酸钠作为缓冲液。 (2)~(188)Re直接标记octreotide采用预锡化法。用SnCl_2同时还原octreotide和~(99)Tc~mO_4~-进行直接法标记。结果(1)~(99)Tc~m直接标记octreotide：~(99)Tc~m-octreotide放化纯度为53％-60％，经Sephadex G10纯化后放化纯度大于95％；改变标记条件：①放化纯度随温度上升而下降，22℃时放化纯度最高，为(57.8±2.3)％，100℃时为(18.5±5.7)％。②pH为4.5时放化纯度最高，为(57.8±2.3)％。③以葡萄糖酸钠作为缓冲液兼中介配体，反应中胶体含量大于50％；以醋酸钠作为缓冲液，胶体含量小于1％。 (2)~(188)Re直接标记octreotide，放化纯度92％～95％，胶体量＜8％。结论 (1)~(99)Tc~m直接标记octreotide：0.025ml抗坏血酸溶液(40mg／ml)和octreotide 5 μ g(1mg／ml)，室温放置30分钟。另一离心管加入醋酸钠缓冲液(0.2mol／L pH 5.0)溶解的连二亚硫酸钠溶液0.02ml(30mg／ml)和~(99)Tc~mO_4~-淋洗液0.1ml，室温放置1分钟。两管混合，15分钟标记完毕。，88Re一octreotide，99Tcm一oetreotide标记和体外受体活性的实验研究中文摘要 (2)’‘SRe直接标记octreotide:在离心管内加入0.lml葡萄糖酸钠溶液(o.3mol几)、o.03ml 6 mol几HCI溶解的SnC12;o.o4ml pH为5.0 的乙酸缓冲液，o.olml octreotide(lmg/ml)，混匀室温放置1小时，加入’88Reo4一淋洗液0 .2而，反应3小时。 (s)研究证明预锡化法直接标记法标记’88Re一octreotide，简便快速，能够得到较高的放化纯度，无需进一步纯化，为进一步制备药盒奠定了良好的基础。分步还原法直接标记法标记99Tcm一octreotide法简便快速，但放化纯度不高，需进一步纯化。 (二)‘88Re一octreotide，99Tcm一oetreotide体夕l、受体活性的实验研究目的探讨’“SRe一oetreotide，99Tcm一oetreotide体外受体活性，以研究不同的直接标记方法对octreotide活性的影响及为研究肿瘤生长抑素受体显像及治疗奠定基础。方法在冰浴中取得SD大鼠脑皮质，制成脑皮质细胞悬液。以脑皮质细胞为组织受体，’”SRe一oetreotide，”，Tcm一octreotide为配基，在 H卫PES缓冲液中进行饱和试验，Scatchard作图，测定标记肤的平衡解离常数Kd值和最大结合容量Bmax。结果:(1)’gTcm一octreotide对大鼠脑皮质细胞的的平衡解离常数Kd=11.25士l.26nmol几，最大结合容量Bmax=35.O6士1，87 finol/p g;’‘SRe一octreotide的Kd一1 5.25士2.63nmol几，Bmax一34.70士1.01 rmoF 协g; (2)99Tcm一oetreotide与’88Re一octreotide的Kd值差别有统计意义 (t=4 .82，P0 .05)。结论99Tcm一octreotide、‘88Re一octreotide保持一定的对sD大鼠脑皮质细胞亲和力，有希望作为具有临床实用价值的生长抑素受体显像剂和/或治疗剂。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R817

【参考文献】