目的探讨超声造影(Contrast-enhanced ultrasounography, CEUS)技术及定量分析方法评估单侧输尿管梗阻大鼠模型肾血流灌注改变的应用价值,并与病理对照分析,为临床无创定量评价梗阻性肾病的血流灌注提供理论依据。 材料和方法实验对象为天津医科大学动物中心育种的健康SD大鼠10只,所有大鼠行麻醉下手术结扎左侧输尿管建立单侧输尿管梗阻模型,每只大鼠分别于建模前和建模后7天进行CEUS检查。 CEUS检查于七氟烷吸入式麻醉状态下进行,使用彩色超声诊断仪(IU22型,荷兰飞利浦公司),L9-3线阵探头,探头使用频率3～9MHz,将仪器调制到谐波状态,帧频15～20fps,机械指数设置到0.06,图像深度约4.0cm,时间增益补偿(time gain compentation,TGC)曲线控制滑板全部至于中间位置,聚焦点设置在肾脏感兴趣区(region of interest, ROI)中部,沿左肾长轴超声探查。于鼠尾静脉穿刺插管团注注射用六氟化硫微泡(Sonovue, Bracco公司,瑞士)混悬液0.2m1,随即推注生理盐水1ml冲管。注射造影剂同时启动图像采集以实时观察左肾血流灌注造影动态过程,连续采集6分钟。15分钟后如前所述顺序再次注射造影剂行大鼠右侧肾脏CEUS检查。UUO术后7天CEUS检查结束后立即处死大鼠取双肾标本,利用1%福尔马林固定后,行石蜡包埋切片和常规HE染色。 CEUS结束后,使用QLAB软件(版本号8.1,荷兰飞利浦公司)进行肾血流灌注定量分析。将ROI分别设置于与声束垂直的肾皮质和肾髓质,描绘肾脏血流灌注时间-强度曲线(TIC),再由TIC获取相关参数,包括曲线上升支斜率(slope rate of ascending curve, A);峰值强度(peak intensity,PI);达峰时间(time to peak,TTP);曲线下面积(area under curve,AUC)。 使用SPSS16.0统计软件处理所得数据,各测量值用均数士标准差(x±s)表示。统计方法采用两独立样本资料的t检验,P0.05认为差异有统计学意义。 结果 1.CEUS结果：10只大鼠除1只大鼠死于麻醉意外,其余9例完成UUO模型术前和术后检查。9只大鼠UUO术前与术后梗阻侧及健侧肾脏超声造影剂显影顺序相同,首先肾动脉显影,继而肾皮质显影,最后肾髓质显影；廓清顺序则与增强顺序相反。UUO造模术后7天梗阻侧肾皮质较术前灌注速度明显减慢,增强程度减低、造影剂廓清时间延长；肾髓质较术前灌注速度减慢,造影剂廓清时间延长,但增强程度变化不大；健侧肾皮质较术前血流灌注速度、增强程度变化不大,但造影剂廓清时间延长；健侧髓质较术前血流灌注速度、强度及造影剂廓清时间变化不大。 2.超声定量分析结果：UUO术后梗阻侧肾皮质血流灌注曲线较术前上升及下降均缓慢,TTP显著延长(术前21.27±4.08s,术后27.42±6.17s,)(P0.05),A(术前1.81+0.45dB/s,术后0.88+0.79dB/s,)(P0.05)及PI(术前16.50±1.36dB,术后13.60±2.64dB)(P0.05)较术前均明显减低,AUC(术前1309.40±306.93dB.s,术后1508.43±481.56dB.s)(P0.05)较术前明显增高；梗阻侧肾髓质血流灌注曲线较术前上升及下降均缓慢,TTP(术前25.59±3.92s,术后28.48±4.67s)(P0.05),TTP较术前明显增高,但A、PI和AUC较术前无明显变化(P0.05)；健侧肾皮质血流灌注曲线与术前30s之内相似,30s后曲线下降缓慢,AUC(术前1209.94±298.41dB.s,术后1311.50±406.14dB.s)(P0.05)较术前明显增高,A、PI和TTP较术前无明显变化(P0.05)；健侧肾髓质血流灌注曲线较术前无明显变化,A、PI、TTP和AUC较术前无明显变化(P0.05)。 3.病理检查结果UUO术后7天CEUS检查结束后立即处死大鼠取双肾标本,置于1%福尔马林溶液固定后,行石蜡包埋切片和常规HE染色。所有9只梗阻侧肾脏均较健侧肾脏体积明显增大,梗阻侧肾呈缺血状颜色改变,肾盂肾盏扩张,肾乳头变平乃至消失,肾实质变薄,皮髓质分界欠清晰；镜下,梗阻侧肾脏近曲小管及远曲小管均出现不同程度的扩张,肾间质均出现单核巨噬细胞及淋巴细胞的浸润,肾间质水肿增宽,其中2例肾小管萎缩(22.2%,)提示早中期肾纤维化形成。健侧肾脏大体及镜下检查较正常状态改变不大。 结论CEUS及定量分析方法能反映UUO大鼠术后血流灌注状态的改变,为临床无创定量评价梗阻性肾病的血流灌注提供理论依据。
【学位单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2013
【中图分类】：R445.1;R692
【参考文献】
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