甲状腺细针穿刺细胞学联合BRAF基因检测的诊断价值

发布时间：2020-09-12 20:11

　　目的评价甲状腺细针穿刺细胞学(FNAB)联合BRAF V600E基因检测对甲状腺结节良恶性鉴别的诊断价值。方法总结经手术病理证实的64个甲状腺结节术前超声引导下细针穿刺细胞学检查和BRAF V600E基因检测的资料,以手术后组织病理学结果作为甲状腺结节性质的诊断金标准,分析FNAB、BRAF V600E基因检测以及两者联合诊断的价值。结果 62例患者64个结节(2例双侧)接受手术处理,其中共有44个结节检测到BRAF V600E突变,43个结节术后病理为甲状腺乳头状癌,1个术后病理为结节性甲状腺肿。在44个检测到BRAF V600E突变结节中,FNAB诊断恶性28个,良性6个,无法确定性质10个。在20个未检测到BRAF V600E突变结节中,FNAB诊断恶性5个,良性3,无法确定性质12个,术后病理14个甲状腺乳头状癌,4个结节性甲状腺肿,1个亚急性甲状腺炎,1个甲状腺腺瘤。共57个甲状腺乳头状癌中,检查到BRAF V600E基因突变有43个,突变率为75.4%。与手术病理金标准比较,FNAB判断甲状腺结节良恶性的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率分别是78.9%、85.7%、97.8%、33.3%、79.7%;BRAF V600E基因检测判断甲状腺结节良恶性的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率分别是75.4%、85.7%、97.7%、30.0%、76.6%;FNAB联合BRAF V600E基因检测判断甲状腺结节良恶性的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确率分别是94.7%、71.4%、96.4%、62.5%、92.2%。采用Mc Nemar配对资料χ2检验比较FNAB、FNAB联合BRAF基因检测两种诊断方法的差别,P0.001,两者差异有显著统计学意义。结论对FNAB无法明确性质的甲状腺结节,辅助联合BRAF V600E基因检测,可以提高甲状腺结节良恶性诊断的准确性。
【部分图文】：

介入放射学杂志2017年7月第26卷第7期JInterventRadiol2017，Vol．26，No．7表1132个甲状腺结节FNAB及BRAF基因检测结果（个）FNABBRAF基因合计未突变突变不能诊断516良性病变41849非典型病变22426滤泡性肿瘤202可疑恶性7714恶性肿瘤72835合计8448132①穿刺前定位；②针尖穿刺至病灶内图1穿刺方法①BRAFV600E测序为野生型，未发生突变；②BRAFV600E测序为突变型，检测到突变图2BRAFY600E测序结果ForReportingThyroidCytopathology，TBSRTC）［2］：Ⅰ级为无法明确诊断或细胞成分不足；Ⅱ级为良性病变；Ⅲ级为意义不明确的细胞异型性或滤泡性病变；Ⅳ级为滤泡性肿瘤或可疑滤泡性肿瘤；Ⅴ级为可疑甲状腺癌；Ⅵ级为甲状腺癌。BRAFV600E基因检测方法：DNA提取和DNA扩增分别采用组织提取试剂盒和巢式PCR。具体如下：使用QIAampDNAMiniKit试剂盒（QIAGEN公司，德国）从细胞液基瓶里提取基因组DNA，操作参考试剂盒说明书进行。对提取好的DNA进行PCR扩增，引物由实验室自行设计，如下：TCTTCATAAT-GCTTGCTCTGATAGG、TCTAGTAACTCAGCAGCA-TCTCA、M13F-TCATAATGCTTGCTCTGATAGGA、M13R-GGCCAAAAATTTAATCAGTGGA。PCR反应体系为25μl：模板DNA2μl，Q5TMMasterMix（生产商：NEB）12.5μl，H2O5.5μl，引物混合物（巢式A轮和B轮正反向引物均为1∶1混合，浓度为5pmol/μl）5μl。PCR反应条件：巢式A轮：98°C预变性30s，然后98°C10s，58°C30s，72°C1min，30个循环，最后72°C延伸5min；巢式B轮：加入2.0μl巢式A产物，98°C预变性30s，然后98°C10s，62°C30s，72°C1min，35个循环，最后72°C延伸5min。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后纯化，将纯化的PCR产物进行测序。最后采用Sequencer软件进行初步分析?

【参考文献】