靶向P-选择素载基因和穿膜肽超声造影剂的制备及实验研究
发布时间：2021-10-27 10:05
目的制备靶向P-选择素的载基因和穿膜肽超声造影剂，并进行特性研究。方法以带羧基的磷脂为成膜材料，采用机械振动法制备包载基因和穿膜肽的超声造影剂，再通过碳二亚胺共价连接法与P-选择素抗体连接制备靶向P-选择素的载基因和穿膜肽超声造影剂。检测该靶向超声造影剂的一般物理特性；琼脂糖凝胶电泳检测载基因和穿膜肽超声造影剂对DNA的结合力和保护作用；采用激光共聚焦显微镜观察基因和穿膜肽在超声造影剂中的分布情况；荧光分光光度法检测超声造影剂中基因和穿膜肽的包封率；通过免疫荧光法验证造影剂与抗体的连接情况。结果制备的靶向P-选择素载基因和穿膜肽超声造影剂的平均粒径约为（2.15±0.36）μm。光镜下观察其形态规则，呈圆球形，大小分布均匀，无明显粘连聚集现象，外观与非靶向组超声造影剂比较无明显差异。琼脂糖凝胶电泳显示载基因和穿膜肽超声造影剂与DNA有较强的结合力，并能保护其不被核酸酶水解。激光共聚焦显微镜下观察，基因和穿膜肽均分布在超声造影剂的外壳上。超声造影剂中基因和穿膜肽的包封率分别为28%和25%。通过免疫荧光法在倒置荧光显微镜下观察到靶向超声造影剂外壳呈现红色荧光。结论成功制备了靶向P-选择素...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
c载基因和穿膜肽超声造影剂激光共聚图
图1 -1 a靶 向载 基因 及穿 膜肽 超 声 造影 剂的 粒径 分布 图Fi g . 1 -1 a D ia me te r di s t r ib u ti o n o f t he t a r ge te dU C A c a r r y in g g e ne a nd C PP s 图1 -1 b非 靶向 载基 因及 穿膜 肽 超 声造 影剂 的粒 径分 布图 Fi g . 1 -1 b D ia me te r di s tr ib u t io n o f th e no n - ta r g e te d U C A c a r r yi n g g e ne a nd C PP s图1 -2 a琼 脂糖 凝 胶 电泳 分 析 载基 因 和 穿膜 肽图1 -2 b琼 脂糖 凝 胶 电泳 分 析 载基 因 和 穿膜 肽
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Ultrasound-triggered Microbubble Destruction in Combination with Cationic Lipid Microbubbles Enhances Gene Delivery[J]. 张丽,刘莹莹,项光亚,吕清,黄桂,杨亚莉,张艳容,宋越,周欢,谢明星. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2011(01)
[2]超声微泡靶向破坏技术应用于基因传输的研究进展[J]. 陈智毅. 中国超声医学杂志. 2011 (01)
[3]携Herceptin靶向高分子造影剂的制备及体外寻靶能力研究[J]. 骆杰,王志刚,张群霞,钟世根,张辉,郑元义. 中华超声影像学杂志. 2010 (08)
[4]抗内皮细胞黏附分子-1靶向微泡介导hAng-1基因转染治疗兔心肌缺血的实验研究[J]. 周青,邓倾,陈茜,王潇,陈金玲,郭瑞强. 临床超声医学杂志. 2010(07)
[5]超声分子影像学研究进展[J]. 王志刚. 中国医学影像技术. 2009(06)
[6]液态氟碳纳米粒——一种多功能影像学造影剂[J]. 李奥,王志刚. 临床超声医学杂志. 2008(12)
[7]液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂用于增强正常大鼠CT显像实验研究[J]. 杨扬,王志刚,郑元义,郭大静,赵建农,李奥. 中国医学影像技术. 2008(09)
[8]阿魏酸对H2O2诱导脐静脉内皮细胞表达P-选择素的影响[J]. 赵益明,王晓岚,缪竞诚,何杨,沈文红,阮长耿. 中国病理生理杂志. 2004(03)
[9]Hochest染料-荧光分光光度法测定基因治疗非病毒载体中DNA的含量[J]. 孙逊,王印,乔小蓉,张志荣. 华西药学杂志. 2003(06)
[10]携P-选择素单抗靶向超声微泡评价小鼠下肢缺血-再灌注损伤[J]. 杨帆,杨莉,宾建平,陈少敏,纪丽景,燕翼,李军华. 中国超声医学杂志. 2009 (01)
本文编号：3461381
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
c载基因和穿膜肽超声造影剂激光共聚图
图1 -1 a靶 向载 基因 及穿 膜肽 超 声 造影 剂的 粒径 分布 图Fi g . 1 -1 a D ia me te r di s t r ib u ti o n o f t he t a r ge te dU C A c a r r y in g g e ne a nd C PP s 图1 -1 b非 靶向 载基 因及 穿膜 肽 超 声造 影剂 的粒 径分 布图 Fi g . 1 -1 b D ia me te r di s tr ib u t io n o f th e no n - ta r g e te d U C A c a r r yi n g g e ne a nd C PP s图1 -2 a琼 脂糖 凝 胶 电泳 分 析 载基 因 和 穿膜 肽图1 -2 b琼 脂糖 凝 胶 电泳 分 析 载基 因 和 穿膜 肽
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【参考文献】：
期刊论文
[1]Ultrasound-triggered Microbubble Destruction in Combination with Cationic Lipid Microbubbles Enhances Gene Delivery[J]. 张丽,刘莹莹,项光亚,吕清,黄桂,杨亚莉,张艳容,宋越,周欢,谢明星. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2011(01)
[2]超声微泡靶向破坏技术应用于基因传输的研究进展[J]. 陈智毅. 中国超声医学杂志. 2011 (01)
[3]携Herceptin靶向高分子造影剂的制备及体外寻靶能力研究[J]. 骆杰,王志刚,张群霞,钟世根,张辉,郑元义. 中华超声影像学杂志. 2010 (08)
[4]抗内皮细胞黏附分子-1靶向微泡介导hAng-1基因转染治疗兔心肌缺血的实验研究[J]. 周青,邓倾,陈茜,王潇,陈金玲,郭瑞强. 临床超声医学杂志. 2010(07)
[5]超声分子影像学研究进展[J]. 王志刚. 中国医学影像技术. 2009(06)
[6]液态氟碳纳米粒——一种多功能影像学造影剂[J]. 李奥,王志刚. 临床超声医学杂志. 2008(12)
[7]液态氟碳纳米脂质微球超声对比剂用于增强正常大鼠CT显像实验研究[J]. 杨扬,王志刚,郑元义,郭大静,赵建农,李奥. 中国医学影像技术. 2008(09)
[8]阿魏酸对H2O2诱导脐静脉内皮细胞表达P-选择素的影响[J]. 赵益明,王晓岚,缪竞诚,何杨,沈文红,阮长耿. 中国病理生理杂志. 2004(03)
[9]Hochest染料-荧光分光光度法测定基因治疗非病毒载体中DNA的含量[J]. 孙逊,王印,乔小蓉,张志荣. 华西药学杂志. 2003(06)
[10]携P-选择素单抗靶向超声微泡评价小鼠下肢缺血-再灌注损伤[J]. 杨帆,杨莉,宾建平,陈少敏,纪丽景,燕翼,李军华. 中国超声医学杂志. 2009 (01)
本文编号：3461381
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