131 I-rFliC的制备及乳腺癌荷瘤鼠体内生物学分布特征

发布时间：2023-04-26 23:57

　　研究背景及目的 近年来乳腺癌发病率不断上升,严重威胁女性生命健康。早期诊断及治疗是提高乳腺癌生存率的关键。但是临床上目前尚缺乏诊断乳腺癌的敏感特异的方法。放射性核素显像可在分子水平实时无创性监测疾病发生发展,可在疾病早期提供功能代谢方面改变的信息。因此寻找新型分子靶点进行放射性核素分子显像研究有可能为乳腺癌的分子诊断和治疗提供新的手段。 新近研究表明,To1]样受体家族(TLRs)在肿瘤细胞表达,其中Toll样受体5(TLR5)在胃肠道肿瘤、前列腺癌、卵巢癌和乳腺癌等高表达,与肿瘤发生发展密切相关。新近报道,TLR5的特异激动剂-细菌鞭毛蛋白(Flagellin)可以抑制乳腺癌细胞的增殖和生长,因此TLR5有可能成为监测和治疗乳腺癌的分子靶点。本论文在证实人乳腺癌细胞系MCF-7表达TLR5的基础上,成功制备基因重组鞭毛蛋白(rFliC),并用放射性核素131I标记rFliC,研究了标记率、放化纯、稳定性及MCF-7细胞对该标记物的摄取与流出特征。建立荷乳腺癌小鼠模型,探讨I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠体内的生物学分布特点及肿瘤靶向性,旨在为乳腺癌的早期诊断探讨新的靶向制剂。研究方...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
符号说明
前言
实验材料及实验仪器
    — 实验材料
        1. 传代培养MCF-7细胞的实验材料
        2. rFliC提取、纯化及鉴定的实验材料
        3. 免疫荧光的实验材料
        4. RT-PCR的实验材料
        5. SDS-PAGE及Western Blot的实验材料
        6. CCK-8法的相关实验材料
        7. ¹³¹I-rFliC的细胞摄取及流出的相关实验材料
        8. 建立荷瘤小鼠模型的实验材料
        9. ¹³¹I-rFliC在荷瘤小鼠体内生物学分布及磷屏显像实验材料
        10. 实验仪器
    二 实验仪器
实验方法
    1. rFliC的诱导表达、纯化及鉴定
    2. 细胞培养、传代、冻存及复苏
    3. 免疫荧光技术测TLR5蛋白表达
    4. RT-PCR测TLR5mRNA表达
    5. Western Blot测TLR5蛋白表达
    6. CCK-8法测细胞增殖
    7. ¹³¹I-rFliC的制备、放化纯度分析及稳定性测定
    8. ¹³¹I-rFliC的细胞摄取及流出实验
    9. 建立荷乳腺癌小鼠模型
    10. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠体内分布实验
    11. 磷屏放射自显影
    12. 统计学处理
实验结果
    一. 鞭毛蛋白的提取、纯化及鉴定
    二. 乳腺癌细胞系MCF-7及MDA-MB-231 TLR5 mRNA及蛋白表达状况
    三. MCF-7细胞TLR5蛋白的免疫荧光鉴定
    四. MCF-7细胞TLR5 mRNA表达状况
    五. MCF-7细胞TLR5蛋白表达状况
    六. CCK-8法检测rFliC对细胞增殖的作用
    七. ¹³¹I-rFliC标记率、放化纯度及稳定性
    八. MCF-7细胞对¹³¹I-rFliC摄取及流出状况
    九. 成功建立荷乳腺癌小鼠模型
    十. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠体内的生物学分布情况
    十一. ¹³¹I-rFliC在正常小鼠及荷瘤小鼠体内的磷屏放射自显影结果
讨论
全文小结
附图表
参考文献
致谢
攻读研究生期间发表的学术论文
学位论文评阅及答辩情况表



本文编号：3802445