HOXD10在胆管癌细胞放疗增敏中的作用

发布时间：2017-07-06 23:19

  本文关键词：HOXD10在胆管癌细胞放疗增敏中的作用

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【摘要】：目的 :探讨同源异型盒D10(homeobox D10,HOXD10)基因在人胆管癌细胞放疗增敏中的作用及其可能的作用机制。方法:用不同剂量的放射线照射胆管癌RBE和HCCC9810细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测细胞中HOXD10 mRNA的表达。应用克隆形成实验、"多靶单击模型"和FCM法检测HOXD10稳定过表达的胆管癌LvHOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810细胞的放射增敏效应及细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测放射治疗对HOXD10过表达的胆管癌LvHOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810细胞中凋亡相关蛋白表达的影响。结果:2、4和8 Gy放射治疗后48和72 h,胆管癌RBE和HCCC9810细胞中HOXD10 mRNA的表达水平均显著高于放疗后24 h组(P值均0.05)。在2、4和8 Gy放射治疗后,Lv-HOXD10-RBE和LvHOXD10-HCCC9810细胞的克隆形成率均分别显著低于对应的仅表达绿色荧光蛋白的阴性对照Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRL-HCCC9810细胞(P值均0.05);Lv-HOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810细胞的平均致死剂量(mean lethal dose,D0)、准阈剂量(quasithreshold dose,Dq)和2 Gy单次照射后细胞的存活分数(survival fraction with 2 Gy,SF2)值均分别低于Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRL-HCCC9810细胞(P值均0.05)。4 Gy放射治疗后24 h,Lv-HOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810细胞凋亡率高于Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRL-HCCC9810细胞(P值均0.05);Lv-HOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810细胞中p53、p21和Bax蛋白的表达水平均高于Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRLHCCC9810细胞,而双微体2(murine double minute 2,Mdm2)蛋白的表达水平均低于Lv-CTRL-RBE和Lv-CTRL-HCCC9810细胞(P值均0.05)。结论:HOXD10可增加人胆管癌RBE和HCCC9810细胞对放射的敏感性,这一作用可能与凋亡相关蛋白的表达上调有关。
【作者单位】： 第四军医大学第二附属医院放射治疗科;第四军医大学肿瘤研究所;河南科技大学第一附属医院病理科;西安交通大学第一附属医院肿瘤内科;
【关键词】： 胆管肿瘤 放射疗法 辐射耐受性 集落形成单位测定 基因 HOXD
【分类号】：R735.8;R730.55
【正文快照】： 方法:用不同剂量的放射线照射胆管癌RBE和HCCC9810细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测细胞中HOXD10 m RNA的表达。应用克隆形成实验、“多靶单击模型”和FCM法检测HOXD10稳定过表达的胆管癌Lv-HOXD10-RBE和Lv-HOXD10-HCCC9810细胞的放射增敏效应及细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法

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