SAA对子宫内膜间质细胞VEGF表达影响的研究

发布时间：2017-03-20 00:04

  本文关键词：SAA对子宫内膜间质细胞VEGF表达影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:排卵障碍型子宫异常出血(Ovulatory disorders uterine bleeding,AUB-O)是一种常见妇科疾病,由下丘脑-垂体-卵巢轴神经内分泌失调所致的子宫异常出血,是在激素诱发下,子宫局部微环境因素发生改变的结果。目前对于排卵障碍型子宫异常出血的病理机制尚未完全清楚。我们前期研究运用SELDI差异蛋白组筛选技术,发现排卵障碍型子宫异常出血患者血清淀粉样蛋白A(Serum Amyloid A,SAA)水平升高了十余倍,且呈持续高水平状态,而血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在排卵障碍型子宫异常出血病人血清中显著下降,但其病理生理学意义未明,推测高浓度SAA与VEGF相关,进而可引起子宫内膜修复中血管生成障碍,从而参与排卵障碍型子宫异常出血的发生与发展。本研究从体外在细胞水平研究SAA对人子宫内膜间质细胞VEGF表达的影响,探讨其在排卵障碍型子宫异常出血发病机制中的作用,为排卵障碍型子宫异常出血的诊治提供一个新的靶点和新的血清监测标志物。方法:首先在体外分离和培养人子宫内膜间质细胞。培养成功后分组,随机分为0 mg/L、5mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L,SAA作用组(24h)以及20mg/LSAA作用0、6、12、36、72h组,每组设3个孔,即重复3次,通过实时荧光定量(RT-PCR)、q RT-PCR测定各组细胞VEGF m RNA转录水平;Western blot方法检测h ESCs细胞VEGF蛋白的表达以及ELISA法定量检测各组细胞培养上清中VEGF蛋白的分泌。并用SPSS 18.0软件进行实验数据分析及作图。结果:在体外成功分离和培养了原代子宫内膜间质细胞。低浓度血清淀粉样蛋白A(SAA,10mg/L)能升高子宫内膜间质细胞(h ESCs)VEGFmRNA、蛋白及分泌水平,但随着SAA浓度(20mg/L)的升高,与对照组比较,VEGFmRNA水平、蛋白水平、分泌水平均显著下降,以40mg/L效果最显著。20mg/L的SAA作用h ESCs,可见在短时间内(4h内)VEGFmRNA水平、蛋白水平、分泌水平显著上升,但随着时间的延长,其表达水平逐渐下降,以36h和72h的表达水平显著低于对照组。结论:SAA通过影响子宫内膜间质细胞VEGF的表达从而参与排卵障碍型子宫异常出血的发病过程。
【关键词】：排卵障碍型子宫异常出血 血管内皮生长因子 血清淀粉样蛋白A
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R711.74
【目录】：

• 摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 主要缩略词9-10
• 前言10-15
• 1 材料与方法15-25
• 2 结果25-38
• 3 讨论38-41
• 4 结论41-42
• 参考文献42-48
• 文献综述48-57
• 参考文献53-57
• 致谢57

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本文编号：256797