Transwell细胞龛室环境下绵羊肌源性干细胞与阴道平滑肌细胞体外共培养的研究
【图文】：
翁?阎鸾ソ咏?VSMC。见图1。2．2Westernblot法检测绵羊MDSC与VSMC共培养诱导分化后MDSC中细胞标记物表达情况共培养6d时，干细胞标记物Desmin在共培养组MDSC中仍有表达，但表达量随着时间延长而下降，与MD-SC单独培养组比较，表达量显著下降(P＜0．05)。随着MDSC干细胞标记物表达下降的同时，平滑肌细胞抗体a-SMA表达量逐渐上升;但共培养6d时，a-SMA表达量仍低于VSMC单独培养组(P＜0．05)。表明通过与VSMC共培养，MDSC一部分可逐渐被诱导分化为平滑肌细胞，同时仍有少部分MDSC保持着干细胞标记物的表达。见图2。图1Transwell细胞龛室体外模拟MDSC与VSMC共培养(×10)A、B:分别为对照组MDSC1、4d;C、D:共培养组MDSC1、4d;E:VSMC单独培养4d图2Westernblot法检测Desmin和a-SMA表达对照组MDSC:MDSC单独培养组培养6d;对照组VSMC:VSMC单独培养组培养6d3讨论共培养是目前细胞生物学领域常用的一项技术［4－5］。既往研究［6，3］利用HoechsG3342染料对MDSC细胞核进行标记，再与阴茎海绵体平滑肌细胞共培养2d，检测MDSC表达平滑肌细胞标记物a-SMA表达情况。但此法存在一些局限性:(1)Ho-echsG3342染料对MDSC细胞核染色时间有限，仅能了解共培养2d的情况，无法进行更长时间的观察;(2)MDSC与平滑肌细胞发生细胞融合(即MDSC的细胞核进入平滑肌细胞中)，也可出现核染色阳性。此时，MDSC并未分化为平滑肌细胞，但由于细胞核在平滑肌细胞中，因此该细胞也表现出核染色阳性且可检测到a-SMA表达，导致假阳性;(3)该法难以分离共培养后的MDSC，故无法确切了解MDSC诱导分化为平滑肌细胞的情况。因此，a-SMA是否均为MDSC诱导分化后新表达出的标记物仍待商榷。本研究通过Transwell细胞龛室首次建立了绵羊MDSC与VSMC共培养体外模型，模
?上赴?昙俏顳esmin在共培养组MDSC中仍有表达，但表达量随着时间延长而下降，与MD-SC单独培养组比较，表达量显著下降(P＜0．05)。随着MDSC干细胞标记物表达下降的同时，平滑肌细胞抗体a-SMA表达量逐渐上升;但共培养6d时，a-SMA表达量仍低于VSMC单独培养组(P＜0．05)。表明通过与VSMC共培养，MDSC一部分可逐渐被诱导分化为平滑肌细胞，同时仍有少部分MDSC保持着干细胞标记物的表达。见图2。图1Transwell细胞龛室体外模拟MDSC与VSMC共培养(×10)A、B:分别为对照组MDSC1、4d;C、D:共培养组MDSC1、4d;E:VSMC单独培养4d图2Westernblot法检测Desmin和a-SMA表达对照组MDSC:MDSC单独培养组培养6d;对照组VSMC:VSMC单独培养组培养6d3讨论共培养是目前细胞生物学领域常用的一项技术［4－5］。既往研究［6，3］利用HoechsG3342染料对MDSC细胞核进行标记，再与阴茎海绵体平滑肌细胞共培养2d，检测MDSC表达平滑肌细胞标记物a-SMA表达情况。但此法存在一些局限性:(1)Ho-echsG3342染料对MDSC细胞核染色时间有限，仅能了解共培养2d的情况，无法进行更长时间的观察;(2)MDSC与平滑肌细胞发生细胞融合(即MDSC的细胞核进入平滑肌细胞中)，也可出现核染色阳性。此时，MDSC并未分化为平滑肌细胞，但由于细胞核在平滑肌细胞中，因此该细胞也表现出核染色阳性且可检测到a-SMA表达，导致假阳性;(3)该法难以分离共培养后的MDSC，故无法确切了解MDSC诱导分化为平滑肌细胞的情况。因此，a-SMA是否均为MDSC诱导分化后新表达出的标记物仍待商榷。本研究通过Transwell细胞龛室首次建立了绵羊MDSC与VSMC共培养体外模型，模拟MDSC在VSMC环境下的扩增和分化情况。Transwell细胞龛室通过多孔膜，下层培养液中的成分可影响到上室内的细胞，从而可研?
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 张凌志,邸菁,王运杰,赵昕,张朝东;Transwell小室筛选高侵袭性C6细胞MMP-2和TIMP-2的表达[J];肿瘤防治杂志;2005年10期
2 张金明;何涛;黄红军;;肌源性干细胞分离培养及诱导分化为平滑肌细胞的研究[J];中华实验外科杂志;2006年08期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李伟;郑蒙蒙;邱峰龙;朱才业;韦光辉;王丹;李碧春;;山羊骨骼肌卫星细胞系分离、培养及其成肌诱导分化研究[J];扬州大学学报(农业与生命科学版);2013年01期
2 张文;李秉枢;李爱斌;曹景云;奚文裕;;体外扩增大鼠肌源性干细胞的安全性研究[J];武汉大学学报(医学版);2014年01期
3 张德龙;王伟;张力;李广;于光明;金秋;;Wnt/β-catenin信号途径促进肌源性干细胞向神经细胞分化[J];解放军医学院学报;2014年04期
4 伦晓勤;李博;;压力性尿失禁的干细胞治疗[J];泌尿外科杂志(电子版);2014年02期
5 程元星;段晓明;曾治中;黄璐;贺修胜;;转hGM-CSF基因HepG2细胞疫苗侵袭性和生长活性初步检测[J];现代生物医学进展;2011年09期
6 武晓云;王世立;牟忠祥;;肌间隙移植明胶海绵获取成体干细胞[J];中国生物工程杂志;2011年06期
7 武晓云;王世立;;肌源干细胞可塑性研究进展[J];中国生物工程杂志;2011年07期
8 武晓云;王世立;;一种新的造血干细胞获取方法的建立[J];中国生物制品学杂志;2011年11期
9 魏屹晗;顾汉卿;;组织工程技术在泌尿系统肌性管腔中的应用[J];透析与人工器官;2007年03期
10 葛翼华;王志刚;蔡海清;徐蕴岚;李玉婵;;组织工程软骨种子细胞的研究进展[J];现代生物医学进展;2013年12期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 郑宏刚;趋化因子CXCL12-CXCR4生物轴对大肠癌肝脏定向转移的影响及其分子机制研究[D];天津医科大学;2006年
2 曲华伟;RNAi抑制人胆囊癌VEGF基因表达及其对胆囊癌细胞生长与侵袭影响的实验研究[D];中南大学;2010年
3 江巧红;多孔纯钛种植体表面BMP-2基因薄层的组装、性能和生物学评价[D];浙江大学;2012年
4 蒋嘉睿;ELMO1表达调控肝细胞癌侵袭转移的作用机制研究[D];中南大学;2012年
5 高宏飞;Myod1和Myog真核共表达载体构建及转染真皮成纤维细胞的实验研究[D];山西医科大学;2013年
6 丁可;基因修饰成肌细胞结合可注射温敏凝胶支架构建组织工程骨的实验研究[D];第三军医大学;2013年
7 高凯;DLC2表达调控结直肠癌发生、侵袭转移及预后的作用机制研究[D];中南大学;2013年
8 李小康;抗感染金属植入物的设计制备及其抗感染效果研究[D];第四军医大学;2013年
9 曾祥挺;EZH2在促进胃癌侵袭和进展中的作用和机制研究[D];兰州大学;2013年
10 陈欢;基于bFGF/ERK信号通路探讨电针对骨骼肌损伤修复的影响[D];北京中医药大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 武晓云;多孔组织工程材料捕获细胞的应用基础研究[D];济南大学;2011年
2 朱君;富含血小板血浆联合细胞膜片技术构建可注射组织工程软骨[D];西北大学;2012年
3 孟林燕;肌源性干细胞移植对糖尿病大鼠胰岛的保护作用及其机制研究[D];辽宁医学院;2012年
4 徐飞岳;基于海藻酸凝胶微球的动态培养体系的建立及其应用于软骨组织工程的研究[D];华东理工大学;2013年
5 左彬;SD大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）体外培养方法改良[D];郑州大学;2013年
6 黄官礼;新生大鼠骨骼肌肌源性干细胞的分离、纯化、培养和鉴定[D];河北医科大学;2013年
7 李伟;山羊骨骼肌卫星细胞的分离及成肌调节因子的克隆、表达与功能初探[D];扬州大学;2013年
8 殷甜甜;胶原支架诱导肌源性干细胞分化为胰岛样细胞及其机制[D];辽宁医学院;2013年
9 邓新喜;大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞多向分化潜能的鉴定[D];苏州大学;2014年
10 师丽华;有机膜表面的纳米加工及其抑菌性研究[D];河南师范大学;2014年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前8条
1 王应利;惠延年;郭斌;张晓光;侯旭;马吉献;;共培养系统中视网膜微血管周细胞经KDR/Flk-1途径对内皮细胞增生的影响(英文)[J];国际眼科杂志;2006年02期
2 郭斌;王应利;惠延年;王雨生;马吉献;;Müller细胞对大鼠视网膜微血管内皮细胞增生和迁移的影响[J];国际眼科杂志;2006年02期
3 马洪梅;张晓梅;付小玻;李伟军;乌兰;王巍;;Transwell小室共培养条件下RPE促进M?ller细胞的增殖和迁移(英文)[J];国际眼科杂志;2008年02期
4 张鹏,王雨生,张星,惠延年,胡丹,马吉献;缺氧对人视网膜色素上皮细胞增生和VEGF表达的影响[J];眼科新进展;2004年01期
5 邓爱军;姜德咏;;缺氧时视网膜血管内皮细胞HIF-1 α及其mRNA的表达[J];眼科研究;2006年04期
6 穆华;张晓梅;;缺氧和高糖对视网膜胶质细胞色素上皮衍生因子表达的影响[J];眼科研究;2008年01期
7 王越晖,王溪原,王心蕊,倪劲松,辛颖,石博,吴家祥;wortmannin对高糖视网膜Müller细胞条件培养基诱导的内皮细胞增殖和迁移的影响[J];中华病理学杂志;2005年04期
8 胡诞宁;眼科细胞培养的特殊技术[J];中华眼科杂志;2003年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周军;杨惠林;岑建农;李振江;陈文明;陈子兴;;同种异体大鼠骨髓间充质干细胞共培养及多向分化潜能鉴定[J];苏州大学学报(医学版);2007年02期
2 陈建梅;李兵仓;王建民;崔晓萍;陈菁;;雪旺细胞与脊髓前角运动神经元共培养对其功能的影响[J];第三军医大学学报;2007年23期
3 詹兴旺;姜艳;王文良;;细胞共培养在组织工程研究中的应用及价值[J];中国组织工程研究与临床康复;2011年20期
4 刘炫;廖斌;;共培养诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的研究进展[J];西南军医;2013年02期
5 宋明宝;于学军;朱光旭;赵刚;于世勇;董红梅;康华利;黄岚;;双层共培养模型中缝隙连接在内皮细胞调节平滑肌细胞增殖能力中的作用[J];第三军医大学学报;2009年04期
6 李娟;王克华;张丽红;董云玲;王磊光;;人类早期胚胎与体细胞共培养的研究进展[J];国际生殖健康/计划生育杂志;2009年02期
7 吴昊;马颖;单爽;谭明乾;马小军;;可视化微囊化细胞共培养分离体系的建立[J];中国细胞生物学学报;2013年05期
8 李拉;陈文庆;朱敬先;胡晓青;张辛;周春燕;敖英芳;;直接接触共培养技术在体外探索细胞间相互作用的应用研究[J];中国运动医学杂志;2013年04期
9 李娟;张艳萍;张丽红;盖凌;邱毅;魏斌;王洪岩;吴爱华;王磊光;;冷冻胚胎经序贯共培养用于建立人胚胎干细胞系[J];中国计划生育学杂志;2013年05期
10 刘承权,沈淑人,戴茂征;着床研究模型:离体胚泡与子宫内膜“共培养”[J];生殖与避孕;1989年04期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李香琴;骨髓间充质干细胞体外扩增及其与神经类细胞共培养的研究[D];大连理工大学;2012年
2 王海燕;1Gs恒磁场对共培养内皮细胞增殖活性和膜离子通道的影响[D];第四军医大学;2004年
3 陈文坚;三维共培养兔髓核细胞诱导骨髓间充质干细胞分化的研究[D];华中科技大学;2009年
4 凌翔;5-氮胞苷处理大鼠骨髓间充质干细胞与乳鼠心肌细胞共培养时的分化研究[D];中南大学;2006年
5 李光辉;外周血CD34+细胞与骨髓间充质干细胞共培养修复兔颅骨缺损的实验研究[D];第四军医大学;2013年
6 禹晓东;嗅鞘细胞的培养及其生物学特性的实验研究[D];第四军医大学;2010年
7 宣强;有/无共培养条件下前列腺上皮、间质细胞差异表达基因筛选及表达研究[D];广西医科大学;2008年
8 范秀波;脐带血干细胞体外培养条件优化与共培养研究[D];大连理工大学;2008年
9 周英晋;共培养诱导骨髓间充质干细胞向leydig细胞分化的研究[D];第二军医大学;2011年
10 何勇;催产素诱导下3D共培养促进ESC定向分化为CM的研究[D];第四军医大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄兵;放线菌共培养效应及活性产物诱导的研究[D];北京化工大学;2010年
2 陈珊珊;OECs、SCs对NSCs、BMSCs、HSCs存活、增殖、分化及神经营养因子表达的影响[D];昆明医学院;2011年
3 孙倩;产氢产乙酸互营共培养体的选育及其应用基础研究[D];哈尔滨工业大学;2009年
4 王芳兵;肾上腺髓质素基因转染的骨髓间充质干细胞缺氧共培养对新生大鼠心肌细胞凋亡的影响[D];福建医科大学;2012年
5 陈太邦;树突状细胞与神经干/祖体细胞共培养促进神经干/祖细胞分化的体外研究[D];第三军医大学;2013年
6 刘春晓;人骨髓间充质干细胞与脐静脉内皮细胞共培养构建组织工程骨颗粒的实验研究[D];北京协和医学院;2011年
7 赵晨成;人骨髄间充质干细胞与髄核细胞共培养后的类髓核分化效应及其对髓核细胞表型的调节作用[D];山西医科大学;2012年
8 戴俊;动态压应力与共培养微环境对脂肪间充质干细胞增殖及向髓核样细胞分化的影响[D];华中科技大学;2012年
9 周平;鼠胚与人早孕蜕膜单层细胞的共培养[D];安徽医科大学;2003年
10 李林;利用双菌共培养模式发酵廉价生物质生产丁醇的研究[D];华南理工大学;2013年
本文编号：2891784
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/fuchankeerkelunwen/2891784.html
