RIF患者血清中的Kisspeptin浓度及子宫内膜上KISS1、KISS1R基因的表达

发布时间：2017-04-12 14:18

  本文关键词：RIF患者血清中的Kisspeptin浓度及子宫内膜上KISS1、KISS1R基因的表达，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景反复移植失败(Recurrent implantation failure,RIF)是一种医源性的疾病,是ICSI或IVF治疗后胚胎移植反复不着床的结果。现今多数学者采用的RIF定义是:移植≥3次优质胚胎或多次移植胚胎数量共计≥10枚依然未能获得临床妊娠。生命表分析经过多周期的IVF后的累积妊娠率后发现,辅助助孕对于经过多周期辅助生殖治疗的不育夫妇未必是灵丹妙药。目前RIF的病因还不能确定,一般认为RIF可能与内膜容受性的降低、胚胎的遗传或发育异常、移植技术的优劣、免疫因素等有关。GPR54则是一种G蛋白偶联受体,由KISS1R编码具有7个跨膜结构域,是1997年由Lee[1]等人在大鼠体内发现,2001年发现了人GPR54的同源受体,命名为h OT7T175和AXOR12,并发现Kisspeptin为GPR54的内源性配体。下丘脑中产生的kisspeptins能够强烈刺激Gn RH分泌,并因此成为神经内分泌生殖轴的主要调节物[2]。KISS1为kisspeptins的编码基因,灭活KISS1基因和其受体基因KISS1R,可因阻断人和鼠体内的Kisspeptin信号通路导致不孕。表明小鼠及人体内Kisspeptin及其受体与生殖功能密切相关。Janneau[3]等人和Bilban[4]等人分别利用RT-PCR和基因微阵列的方法表明KISS1不但在胎盘中大量表达,而且在妊娠早期侵袭性胎盘的表达量远高于妊娠晚期非侵袭性胎盘。上述两研究均表明KISS1在孕早期调节滋养细胞侵袭特性中担当重要角色,因此胎盘来源的kisspeptin/KISS1R信号系统在胎盘形成中起到重要的调节作用。除此之外,Calder[5]等研究表明移植失败的Kiss1-/-的母鼠子宫内膜不能蜕膜化,而外源性补充适量的反映子宫内膜容受性的可靠标志物白血病抑制因子(LIF)则可以改善这种状况从而达到成功妊娠。这表明Kisspeptin不仅是胎盘形成滋养层的调节因子还是胚胎着床的调节因子。以往人体内KISS1基因及其受体基因KISS1R的研究多集中在中枢神经系统,本研究通过检测反复移植失败患者与正常妊娠患者子宫内膜上KISS1基因在增生期及分泌期的表达,及两组患者增生期及分泌期血清中Kisspeptin蛋白浓度,发现对照组患者血清中Kisspeptin浓度及子宫内膜上KISS1基因的表达在增生期均高于分泌期,同时研究了KISS1基因及其受体基因KISS1R在RIF组患者子宫内膜上的表达差异,了解RIF患者反复移植失败是否与KISS1信号通路异常有关。目的检测反复移植失败患者(RIF)及可成功妊娠且获活产患者增生期(D11-13天)及分泌期(D20-25天)子宫内膜中KISS1及KISS1R m RNA的表达,检测两组患者增生期及分泌期血清中Kisspeptin蛋白含量,比较增生期及分泌期两组患者血清中Kisspeptin含量及子宫内膜上KISS1、KISS1R m RNA的表达的差异,了解RIF患者反复移植失败是否与KISS1信号通路异常有关。方法1.收集前1周期成功妊娠患者及反复移植失败患者(RIF)月经增生期(D11-13天)及分泌期(D20-25天)血清及子宫内膜各3例,测定其血清中E2、P浓度,比较两者在两组中是否存在差异,并将子宫内膜行病理检查,进一步明确其月经分期。2.用酶联免疫吸附法(ELISA)测定成功妊娠患者及反复移植失败患者(RIF)月经增生期(D11-13天)及分泌期(D20-25天)血清中Kisspeptin的浓度。分别比较两组在两个月经阶段Kisspeptin的浓度差异。3.用RT-PCR测定妊娠患者及反复移植失败患者(RIF)月经增生期(D11-13天)及分泌期(D02-25天)的子宫内膜中KISS1和KISS1R的m RNA的表达。比较两组患者两个月经阶段中KISS1和KISS1R的m RNA的表达差异,比较同一月经阶段中两组患者KISS1和KISS1R的m RNA的表达差异。结果1.经比较两组患者一般情况及血清中E2、P浓度差异不存在统计学意义,病理检查显示两组患者增生期(D11-13天)及分泌期(D20-25天)子宫内膜分别处于增生期及分泌期改变。2.血清中,两组患者增生期(D11-13天)的Kisspeptin浓度均高于分泌期(D20-25天),且对照组子宫内膜增生期(D11-13天)KISS1m RNA的表达高于分泌期(D20-25天),表明在血清中Kisspeptin浓度及子宫内膜上KISS1表达均存在与月经相关的周期性变化。3.RT-PCR结果显示:(1)月经两阶段比较,对照组中,增生期(D11-13天)与分泌期(D20-25天)KISS1R的m RNA的表达无差异,但增生期(D11-13天)KISS1的m RNA的表达高于分泌期(D20-25天);RIF组中,增生期(D11-13天)与分泌期(D20-25天)KISS1的m RNA的表达无差异,但分泌期(D20-25天)KISS1R的m RNA的表达明显低于增生期(D11-13天);(2)两组比较,在增生期(D11-13天),两组KISS1R的m RNA的表达无差异,但对照组KISS1的m RNA的表达显著高于RIF组;在分泌期(D20-25天),两组KISS1的m RNA的表达不存在差异,但RIF组KISS1R的m RNA的表达显著降低。结论1.正常妊娠组血清中Kisspeptin浓度及子宫内膜上KISS1表达可能随月经周期发生变化。2.与增生组相比,分泌期RIF组患者子宫内膜KISS1R m RNA的表达显著下降。3.与对照组相比,分泌期RIF组患者子宫内膜KISS1R m RNA的表达显著下降。
【关键词】：反复移植失败 子宫内膜 血清 KISS1R Kisspeptin
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.8
【目录】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-13
• 中英文缩略词13-14
• 前言14-16
• 材料和方法16-21
• 统计学分析21-22
• 结果22-27
• 讨论27-31
• 结论31-32
• 参考文献32-34
• 综述 KISSPEPTIN、NKB及其受体蛋白GPR54、NKB3R在生殖系统中的研究进展34-53
• 参考文献47-53
• 个人简历及在读期间发表论文53-54
• 致谢54

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1 于观贞;王杰军;陈颖;倪灿荣;钱建新;;KISS1和S100A4在胃癌中的表达变化以及与转移的关系[J];肿瘤;2006年08期

2 ;[J];;年期

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1 杨贺佳;RIF患者血清中的Kisspeptin浓度及子宫内膜上KISS1、KISS1R基因的表达[D];郑州大学;2016年

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本文编号：301458