腺病毒介导的IL-28B对U14宫颈癌皮下移植瘤小鼠调节性T细胞的影响及抗肿瘤作用的研究

发布时间：2017-04-16 04:09

  本文关键词：腺病毒介导的IL-28B对U14宫颈癌皮下移植瘤小鼠调节性T细胞的影响及抗肿瘤作用的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：构建小鼠(Babl/C和c57bl/6j )U14宫颈癌皮下移植瘤模型,研究腺病毒介导的IL-28B (Ad-mIL-28B)对U14宫颈癌皮下移植瘤小鼠脾脏中调节性T细胞(Tregs)的影响及其抗肿瘤的作用。方法：体外培养人胚肾293(HEK293)细胞；使用HEK293细胞扩增腺病毒(Ad-mIL-28B和Ad-EGFP)；采用微量全细胞病变法(CPE)进行病毒(Ad-mIL-28B 和 Ad-EGFP)滴度的测定；体外培养小鼠U14宫颈癌细胞,建立Babl/C 和 c57bl/6j小鼠U14宫颈癌腹水模型和皮下移植瘤模型；观察并测定Ad-mIL-28B处理后小鼠(Babl/C口c57bl/6j) U14宫颈癌皮下移植瘤瘤体的生长、瘤重,并计算抑瘤率、脾脏、肺脏和肝脏指数；流式细胞术检测Ad-mIL-28B处理后,U14宫颈癌皮下移植瘤小鼠(Babl/C口c57b1/6j)脾脏中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的变化；HE染色法检测小鼠(Babl/C 和 c57bl/6j) U14宫颈癌皮下移植瘤瘤体、肺脏及肝脏组织的病理变化。结果：1.采用CPE法测定病毒滴度后,病毒(Ad-mIL-28B 和 Ad-EGFP)滴度均为：108PFU/100μL。2成功建立了小鼠(Babl/C 和 c57b1/6j) U14宫颈癌腹水模型和皮下移植瘤模型。3.Ad-mIL-28B组、Ad-EGFP组及PBS组小鼠脾脏中的CD4+CD25+Foxp3+Tregs在淋巴细胞中所占的比例分别为4.76%±0.97%、5.38%±1.55%和6.92%±1.18%,与PBS组相比,Ad-mIL-28B组脾脏中的CD4+CD25+Foxp3+Tregs在淋巴细胞中所占的比例减少(p=0.034).4. Ad-mIL-28B组、Ad-EGFP组和PBS组Babl/C小鼠移植瘤的体积分别为107.6mm3±30.8mm3、 181.8mm3±14.2mm3 和 240.2mm3±21.3mm3,与PBS组相比,Ad-mIL-28B组能够明显的减小移植瘤的体积(p=0.008)。5.Ad-mIL-28B组、Ad-EGFP组和PBS组c57bl/6j小鼠移植瘤的体积分别为9.9mm3±2.7mm3、44.4mm3±7.6mm3和48.2mm3±8.1mm3,与 PBS组相比,Ad-mIL-28B组能够明显的减小移植瘤的体积(p=0.001)。6.Ad-mIL-28B组、Ad-EGFP组及PBS组小鼠移植瘤瘤重分别为78.4g±23.3g、200.1g±90.3g口303.2g±123.2g,与PBS组相比,Ad-mIL-28B组小鼠移植瘤瘤重明显减轻(p=0.049)。7.Ad-mIL-28B组、Ad-EGFP组和PBS组Babl/C小鼠的抑瘤率分别为：66.45%±8.88%、24.76%±6.68%和0%,与PBS组相比,Ad-mIL-28B能明显的抑制移植瘤的生长(p=0.000)。8.Ad-mIL-28B组脾脏和肺脏指数的变化与对照组相比,有统计学意义(p0.05),而肝脏指数的变化无明显的统计学意义。9.HE染色结果表明,Ad-mIL-28B组肿瘤组织中的异型性的肿瘤细胞的数量与对照组相比明显减少,肺脏和肝脏组织未见明显的瘤细胞转移。结论： Ad-mIL-28B能够降低U14宫颈癌皮下移植瘤小鼠(Babl/C和c57b1/6j)脾脏中的CD4+CD25+Foxp3+Tregs,并且能抑制小鼠(Babl/C和c57bl/6j)U14宫颈癌皮下移植瘤的生长,Ad-mIL-28B可能是通过降低CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表达从而抑制小鼠(Babl/C和c57bl/6j)U14宫颈癌皮下移植瘤的生长。
【关键词】：IL-28B 腺病毒 宫颈癌 U14细胞 Tregs
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.33
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 第一章 前言9-16
• 1.1 立论依据9-10
• 1.2 研究进展10-15
• 1.3 研究内容及目标15-16
• 第二章 材料与方法16-22
• 2.1 实验材料16-18
• 2.1.1 实验对象16
• 2.1.2 实验试剂16
• 2.1.3 实验仪器16-17
• 2.1.4 实验溶液17-18
• 2.2 实验方法18-22
• 2.2.1 细胞培养18
• 2.2.2 腺病毒的扩增18
• 2.2.3 腺病毒滴度的测定18-19
• 2.2.4 建立小鼠U14宫颈癌腹水模型19
• 2.2.5 建立小鼠U14宫颈癌皮下移植瘤模型19-20
• 2.2.6 移植瘤瘤体积、瘤重和抑瘤率的测定20
• 2.2.7 脾脏、肺脏和肝脏指数的测定20
• 2.2.8 流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4~+CD25~+FoxP3~+Tregs的变化20-21
• 2.2.9 石蜡组织切片的制作及HE染色21
• 2.2.10 统计学方法21-22
• 第三章 结果22-30
• 3.1 扩增了腺病毒并测定了其滴度22
• 3.2 Ad-IL-28B处理后小鼠脾脏中的CD4~+CD25~+Foxp~(3+)Tregs减少22-24
• 3.3 Ad-mIL-28B抑制小鼠U14宫颈癌皮下移植瘤的生长24-28
• 3.4 Ad-mIL-28B对于脾脏、肺脏和肝脏指数的影响28
• 3.5 肿瘤组织、肺脏及肝脏的HE染色28-30
• 第四章 讨论30-32
• 第五章 结论32-33
• 参考文献33-39
• 文献综述39-46
• 参考文献43-46
• 致谢46-47
• 在学期间的研究成果47-48
• 附录 缩略语中英文对照表48-49

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李志伟,王占民,吴晓鹏,刘军,马道新,刘春生;胞嘧啶脱氨酶基因、单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗裸鼠肝门部胆管癌皮下移植瘤的研究[J];中华实验外科杂志;2004年10期

2 孙培龙,汪永录,林万隆,郭伟剑,胡静波,刘须才,马晓明,陈汉;奥曲肽对小白鼠肝癌皮下移植瘤的抑制作用及机制研究[J];中华肝胆外科杂志;2002年05期

3 王红卫;卓忠雄;赵树文;赵延新;皋月娟;李京京;;大鼠Walker-256皮下移植瘤模型的建立及其超声评价[J];临床超声医学杂志;2007年02期

4 曹雯;林晨辉;;健脾为基础中药方对人胃癌MKN-45裸小鼠皮下移植瘤生长及瘤组织内P-Stat3蛋白表达的影响[J];中外医疗;2013年18期

5 ;基础理论[J];中国癌症防治杂志;1985年05期

6 田广;刘晶晶;房学东;宫路路;;CD147-shRNA重组质粒对裸鼠肝癌细胞SMMC-7721皮下移植瘤的抑制作用[J];中国实验诊断学;2013年10期

7 许建华;邓皖利;孙珏;张勇;李朝衡;范忠泽;;肠胃清对人大肠癌细胞HCT8/V皮下移植瘤长春新碱耐药的逆转作用[J];上海中医药大学学报;2009年02期

8 杨一涛;唐罗生;曾祥云;董晓光;李学喜;袁思奇;刘艳芳;;褪黑素对裸鼠HXO-RB_(44)细胞皮下移植瘤的抑制作用[J];眼科新进展;2009年11期

9 张永红;唐罗生;;双自杀基因CDTK载体系统对裸小鼠Y79细胞皮下移植瘤的杀伤作用[J];国际眼科杂志;2010年10期

10 金泉克;许建华;肖海娟;陆海;余文燕;王国娟;孙珏;范忠泽;;肠胃清煎剂对裸鼠大肠癌皮下移植瘤奥沙利铂治疗的增效作用[J];环球中医药;2012年03期

中国硕士学位论文全文数据库 前8条

1 陈小芸;腺病毒介导的IL-28B对U14宫颈癌皮下移植瘤小鼠调节性T细胞的影响及抗肿瘤作用的研究[D];兰州大学;2015年

2 高胜利;白介素18治疗裸鼠肝癌皮下移植瘤的初步研究[D];苏州大学;2008年

3 夏如民;纳秒级陡脉冲对卵巢癌细胞凋亡的外源性通路影响和治疗皮下移植瘤安全性研究[D];重庆医科大学;2012年

4 邹金;电穿孔介导Kallistatin基因在体内的表达对NCI-H446皮下移植瘤的预防和治疗效果[D];华侨大学;2012年

5 刘昱良;三七皂甙制剂抑制小鼠胰腺癌皮下移植瘤的实验研究[D];昆明医科大学;2013年

6 向安东;三七皂甙制剂抑制小鼠胆管癌皮下移植瘤的实验研究[D];昆明医科大学;2014年

7 韩志俊;Balb/c小鼠皮肤腺癌皮下移植瘤模型的建立及JS-K体内抗肿瘤活性的研究[D];遵义医学院;2011年

8 金爱花;漏芦对小鼠H_（22）肝癌皮下移植瘤的抑制作用及机制研究[D];延边大学;2011年

  本文关键词：腺病毒介导的IL-28B对U14宫颈癌皮下移植瘤小鼠调节性T细胞的影响及抗肿瘤作用的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：309962