促排卵周期未成熟卵母细胞体外成熟的发育潜能研究及其线粒体膜电位检测

发布时间：2017-05-07 13:08

  本文关键词：促排卵周期未成熟卵母细胞体外成熟的发育潜能研究及其线粒体膜电位检测，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分 促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养中的应用目的通过对不孕症患者促排卵治疗周期获得的未成熟卵母细胞的体外成熟培养研究,评价FSH/HCG在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养过程中的应用价值。方法收集控制性超促排卵周期行ICSI过程中得到的MI期和GV期卵母细胞,分别随机分为加FSH/HCG培养组和不加FSH/HCG培养组,培养24小时～28小时后成熟卵母细胞进行ICSI授精,并观察胚胎发育情况,记录成熟率、受精率,卵裂率和优胚率。结果对于MI期卵母细胞,是否使用FSH/HCG不影响其24小时成熟率、受精率、分裂率和优胚率(p0.05)。对于GV期卵母细胞,培养液中加入FSH/HCG显著提高优质胚胎率(31.3%VS4.2%,p0.05),但两组的成熟率,受精率和卵裂率没有显著差异(P0.05)。结论控制性超促排卵中获得的未成熟卵母细胞进一步体外培养可以自然成熟,在GV期卵母细胞培养过程中加入FSH/HCG能够改善体外培养结果。第二部分线粒体膜电位检测在评价体外成熟卵母细胞发育潜能中的应用目的通过激光共聚焦荧光显微镜观察不同获取时期、不同培养时间的体外成熟卵母细胞的线粒体膜电位情况,评估线粒体膜电位检测对体外成熟卵母细胞发育潜能的应用价值。方法收集常规促排卵周期行ICSI过程剩余的未成熟卵母细胞(MI和GV),随机分为两组,分别于24小时后和48小时后通过激光共聚焦荧光显微镜观察成熟后经JC-1(5,5',6,6'-tetrachloro-1,1',3,3'-tetraethylbenzimidazolcarbocy anine iodide)染色的MII期卵母细胞的线粒体膜电位,其红色荧光主要呈三种状态分布即卵母细胞近皮质的周边分布、胞质内的点状分布、极少观测到。结果24小时成熟卵母细胞与48小时成熟卵母细胞,虽然随着时间的延长,周边分布的比利大大降低,但与其他分布结果相比没有显著性差异(P0.05)。对于GV期卵母细胞,D1天与D2天成熟的卵母细胞的线粒体膜电位的荧光分布没有显著性差异(P0.05)。对于MI期卵母细胞,D2天相对于D1天成熟的卵母细胞,线粒体膜电位周边分布更少,但与D1天成熟卵母细胞相比没有显著性差异(P0.05)。结论 线粒体膜电位的检测仅可以部分的反应体外成熟的卵母细胞的活性和发育潜能,我们观察到,延迟成熟的卵母细胞较早成熟的卵母细胞的线粒体膜电位更低,反映了卵母细胞代谢能力的下降,可以在一定程度上预示着其发育潜能的降低。
【关键词】：未成熟卵母细胞 FSH LH 体外成熟 ICSI 未成熟卵母细胞 体外成熟 ICSI 激光共聚焦显微镜 JC-1
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714.8
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 符号说明10-11
• 研究一 促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养中的应用11-20
• 1.1 前言11
• 1.2 资料方法11-16
• 1.3 结果16-17
• 1.4 讨论17-19
• 1.5 结论19-20
• 研究二 线粒体膜电位检测在评价体外成熟卵母细胞发育潜能中的应用20-30
• 2.1 前言20-22
• 2.2 资料方法22-26
• 2.3 结果26-27
• 2.4 讨论27-29
• 2.5 结论29-30
• 附表(图)30-35
• 参考文献35-38
• 致谢38-39
• 攻读学位期间发表的学术论文目录39-40
• 学位论文评阅及答辩情况表40

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本文编号：349903