维生素E对GDM孕鼠氧化应激内环境及其胎盘脂肪酸转运功能的影响研究

发布时间：2017-05-11 13:10

  本文关键词：维生素E对GDM孕鼠氧化应激内环境及其胎盘脂肪酸转运功能的影响研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:本研究旨在了解孕鼠在GDM内环境下胎盘脂肪酸转运功能以及胎鼠生长发育的变化,探讨维生素E干预对GDM孕鼠胎盘脂肪酸转运功能的机制和影响,以及对胎鼠生长发育的影响。方法:试验前动物自由进食标准饲料,维持12hr光照和12hr黑暗的昼夜节律。实验室温度:20~25℃,湿度:50±5%。在上述环境适应1 w后,按2:1雌雄合笼,次日早晨7:00检查阴栓,查到阴栓定为交配成功,并定为GD0。动物禁食12hr,按80 mg/kg在GD6、GD7、GD8连续3天腹腔内注射STZ溶液,空白对照组(Control)小鼠注射等剂量的生理盐水。尾静脉采血测血糖,48hr内血糖≥11.1mmol/L即为成功模型;选取GDM模型小鼠,随机均分成2组:糖尿病对照组(GDM)和维生素E补充剂组(Vit E)。同时随机选取空白对照组(Control)小鼠12只。于建模成功后GD10~GD18期间,按以下方案给药隔天给药,对照组:生理盐水,5 mg/kg d i.g.。GDM小鼠模型对照组:生理盐水,5 mg/kg d i.g.。抗氧化剂补充组:维生素E,5 mg/kg d i.g.。在GD18天处死小鼠,收集孕鼠胎盘以及血清。结果:(1)孕鼠不同组别在不同时期的体重用单因素重复测量资料的方差分析结果显示:校正后时间效应的F值=243.188,P值0.001,不同时间段的孕鼠差异有统计学意义,随着时间变化孕鼠体重呈增长趋势,校正后时间与组别交互效应的F值=4.290,P值=0.002,不同组别孕鼠有差异;不同组别在不同时期的血糖用单因素重复测量资料的方差分析结果显示:校正后时间效应的F值=3.425,P值=0.039,不同时间段的孕鼠血糖差异有统计学意义,校正后时间与组别交互效应的F值=2.815,P值=0.035,不同组别孕鼠血糖有差异。在GD18,GDM组小鼠的血清胰岛素水平低于Control组(P0.01),Vit E组胰岛素高于GDM组(P0.05)。(2)GDM组的胎鼠体重明显小于Control组(P0.001),Vit E干预后体重与GDM组差异无统计学意义(P0.05);GDM组的胎鼠体长明显小于Control组(P0.001),Vit E干预后胎鼠体长要大于GDM组(P0.05);GDM组的胎鼠胎盘重量明显小于Control组(P0.001),Vit E干预后胎鼠胎盘重量与GDM组差异无统计学意义(P0.05);三组胎盘直径差异无统计学意义(P0.05);GDM组的胎鼠血糖明显小于Control组(P0.001),Vit E干预后胎鼠血糖与GDM组差异无统计学意义(P0.05)。(3)与Control组比较,GDM组的母鼠血清中的SOD(P0.01)、GSH-px(P0.05)明显下降,而MDA水平明显上升(P0.01);Vit E干预后,与GDM组相比,Vit E组的母鼠血清中的SOD(P0.01)、GSH-px(P0.05)明显上升,而MDA水平明显下降(P0.01)。(4)与Control组比较,GDM组的母鼠血清中的IL-6、IL-8明显上升(P0.01),而TNF-α水平虽然比较高,但与Control组差异无统计学意义(P0.05);Vit E干预后,与GDM组相比,Vit E组的母鼠血清中的TNF-α、IL-6、IL-8明显下降(P0.05)。(5)在免疫印迹试验中,与Control组相比,GDM组PPARγ、FATP1、FATP4蛋白表达水平下调了(P0.05),GDM组FABP-pm蛋白表达水平上调了(P0.05);Vit E干预后,与GDM组相比,PPARγ、FATP1、FATP4水平明显上升(P0.05),FABPpm、CD36水平明显下降(P0.05);FATP2、FATP3蛋白的表达水平无明显变化。(6)在RT-PCR试验中,与Control组相比,GDM组PPARγ、FATP1、FATP4的m RNA的表达水平被下调(P0.01),GDM组FABP-pm m RNA的表达水平被上调了;Vit E干预后,与GDM组相比,PPARγ、FATP1水平明显上升,CD36水平明显下降;其他的蛋白m RNA表达水平无明显变化。(7)HE染色观察GDM组胎盘血管排列紊乱,血细胞减少;免疫组化结果显示:与Control组比较,GDM组PPARγ、FATP1、FATP4的平均光密度下降,FABP-pm、CD36的光密度上升;Vit E干预后,与GDM组相比,PPARγ、FATP1、FATP4的平均光密度上升,FABP-pm、CD36的光密度下降。结论:维生素E对STZ诱导的小鼠胰岛损伤可能会有保护作用。维生素E可能通过增加SOD活性,增加GSH-px的浓度,降低MDA水平,减少脂质过氧化,从而减少胰岛素损伤;通过抑制激活的单核细胞分泌TNF-α、IL-6/8等细胞损伤因子,上调了PPARγ的m RNA,激活PPARγ表达;通过缓解机体内皮功能受损得到改善、DNA、脂质和蛋白质大分子物质过氧化程度得到有效抑制,来增强脂肪酸转运蛋白的表达,提高LC-PUFA的转运能力。本研究结果为临床治疗GDM引起的一些不良症状提供了理论和指导意义。
【关键词】：妊娠糖尿病 宫内生长发育迟缓 脂肪酸转运蛋白 VitE 氧化应激 炎症因子
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714
【目录】：

• 英文缩略词5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-12
• 1 前言12-13
• 2 材料与方法13-22
• 3 结果22-38
• 3.1 维生素E对GDM孕鼠及胎鼠一般状况的影响22-28
• 3.2 维生素E对GDM孕鼠血清脂质过氧化e笥跋
  
  本文编号：357317
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