线粒体融合蛋白2通过线粒体凋亡途径诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡
发布时间：2022-02-13 15:24
第一部分线粒体融合蛋白2（Mfn2）体外诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡作用及机制目的研究Mfn2在体外实验中对人宫颈癌HeLa细胞的作用及影响,并探讨其相关的分子机制。方法设置不同浓度的Adv-Mfn2组,设Adv-control为对照组。采用CCK-8法检测Adv-Mfn2对HeLa细胞增殖的影响;应用流式细胞仪采用Annexin V-FITC/PI双染法检测Adv-Mfn2对HeLa细胞凋亡的影响,同时应用JC-1法检测Adv-Mfn2对HeLa细胞线粒体膜电位变化的影响。应用western blot方法分别检测Adv-Mfn2对HeLa细胞caspase-3和caspase-9活性的影响;检测对Bcl-2家族蛋白中Bax以及Bcl-2的蛋白表达水平的影响;检测p53蛋白表达水平的变化。结果Western blot方法结果显示应用Adv-Mfn2干预HeLa细胞。与空白对照组以及Adv-control相比,Mfn2蛋白表达水平增高。应用CCK-8检测结果提示Adv-Mfn2对HeLa细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈剂量依赖与时间依赖的关系。Annexin V-FITC/PI双染细胞凋...
【文章来源】：华中科技大学湖北省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
Mfn2对HeLa细胞增殖增影响
图 1Mfn2 对 HeLa 细胞增殖增影响Mfn2 对 HeLa 细胞作用 8 小时以及增殖有明显的抑制作用，而这种抑制＜0.01） Adv-Mfn2 干预 HeLa 细胞，应用 Western blot 法检测 Mfn2 表达情况
华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文如图 2 所示，应用 Adv-Mfn2 干预的 HeLa 细胞内 Mfn2 表达水平增高，分别与空白对照组以及 Adv-control 组相比具有统计学差异（**P ＜0.01 与空白对照组相比，##P ＜0.01 与 Adv-control 组相比）。结合 CCK-8 的结果提示过表达 Mfn2 可以抑制HeLa 细胞增殖，且呈剂量与时间依赖性的特点。2. 过表达 Mfn2 诱导 HeLa 细胞凋亡Annexin V 是一种磷脂结合蛋白质，由于其对磷脂酰丝氨酸有较高的亲和力，故可以使用 Annexin V 对细胞表面的磷脂酰丝氨酸进行检测。HeLa 细胞种入六孔板内同步化后分别加入 Adv-control 或 Adv-mfn2，应用浓度分别为 90 或 120pfu/ml 的Adv-Mfn2 孵育 48 小时以及 60 小时后将细胞收集应用流式细胞仪采用 AnnexinV-FITC/PI 法检测细胞凋亡率。
【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA倍体检测对宫颈癌病灶中癌细胞增殖、侵袭活性的评估价值研究[J]. 张云清,尹香利,韩慧慧. 海南医学院学报. 2018(07)
[2]宫颈癌组织中HSG、Ki67表达观察[J]. 李昌红,车玲玉,宋丹阳,白云. 山东医药. 2016(27)
[3]Eukaryotic elongation factor-1α 2 knockdown inhibits hepatocarcinogenesis by suppressing PI3K/Akt/NF-κB signaling[J]. Fu-Nan Qiu,Yi Huang,Dun-Yan Chen,Feng Li,Yan-An Wu,Wen-Bing Wu,Xiao-Li Huang. World Journal of Gastroenterology. 2016(16)
[4]Cloning and expression of a novel partial cDNA related to hypertension[J]. 陈光慧,王富强,张吉辉,向华,董刚,张晨晖,刘敬忠,周爱儒,汤健. Chinese Medical Journal. 1998(04)
[5]一个新的高血压病相关基因的克隆和表达[J]. 陈光慧,张晨晖,朱燕青,董纲,周爱儒,马大龙,汤键. 中华医学杂志. 1997(11)
本文编号：3623438
【文章来源】：华中科技大学湖北省211工程院校985工程院校教育部直属院校
【文章页数】：87 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
Mfn2对HeLa细胞增殖增影响
图 1Mfn2 对 HeLa 细胞增殖增影响Mfn2 对 HeLa 细胞作用 8 小时以及增殖有明显的抑制作用，而这种抑制＜0.01） Adv-Mfn2 干预 HeLa 细胞，应用 Western blot 法检测 Mfn2 表达情况
华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文如图 2 所示，应用 Adv-Mfn2 干预的 HeLa 细胞内 Mfn2 表达水平增高，分别与空白对照组以及 Adv-control 组相比具有统计学差异（**P ＜0.01 与空白对照组相比，##P ＜0.01 与 Adv-control 组相比）。结合 CCK-8 的结果提示过表达 Mfn2 可以抑制HeLa 细胞增殖，且呈剂量与时间依赖性的特点。2. 过表达 Mfn2 诱导 HeLa 细胞凋亡Annexin V 是一种磷脂结合蛋白质，由于其对磷脂酰丝氨酸有较高的亲和力，故可以使用 Annexin V 对细胞表面的磷脂酰丝氨酸进行检测。HeLa 细胞种入六孔板内同步化后分别加入 Adv-control 或 Adv-mfn2，应用浓度分别为 90 或 120pfu/ml 的Adv-Mfn2 孵育 48 小时以及 60 小时后将细胞收集应用流式细胞仪采用 AnnexinV-FITC/PI 法检测细胞凋亡率。
【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA倍体检测对宫颈癌病灶中癌细胞增殖、侵袭活性的评估价值研究[J]. 张云清,尹香利,韩慧慧. 海南医学院学报. 2018(07)
[2]宫颈癌组织中HSG、Ki67表达观察[J]. 李昌红,车玲玉,宋丹阳,白云. 山东医药. 2016(27)
[3]Eukaryotic elongation factor-1α 2 knockdown inhibits hepatocarcinogenesis by suppressing PI3K/Akt/NF-κB signaling[J]. Fu-Nan Qiu,Yi Huang,Dun-Yan Chen,Feng Li,Yan-An Wu,Wen-Bing Wu,Xiao-Li Huang. World Journal of Gastroenterology. 2016(16)
[4]Cloning and expression of a novel partial cDNA related to hypertension[J]. 陈光慧,王富强,张吉辉,向华,董刚,张晨晖,刘敬忠,周爱儒,汤健. Chinese Medical Journal. 1998(04)
[5]一个新的高血压病相关基因的克隆和表达[J]. 陈光慧,张晨晖,朱燕青,董纲,周爱儒,马大龙,汤键. 中华医学杂志. 1997(11)
本文编号：3623438
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