茯苓酸通过上调miR-133a影响子宫肌瘤细胞增殖凋亡及表皮生长因子的水平

发布时间：2022-07-13 18:22

　　目的:探讨茯苓酸（PA）对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡及表皮生长因子（EGF）水平的影响。方法:选取58例子宫肌瘤患者的子宫肌瘤组织进行细胞原代培养。将子宫肌瘤细胞分为NC组、PA 10μg/ml组、PA 20μg/ml组、PA 40μg/ml组、PA 80μg/ml组。采用甲基噻唑基四唑（MTT）检测各组细胞存活率,筛选PA适宜浓度进行后续实验。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测PA对EGF水平的影响;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PA对表皮生长因子受体（EGFR）蛋白表达的影响;采用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测PA对细胞中微小RNA-133a（miR-133a）表达水平的影响。miR-133a mimics及阴性对照miR-NC转染至子宫肌瘤细胞,观察miR-133a过表达对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡及EGF、EGFR表达水平的影响。Western blot检测细胞周期蛋白1（CyclinD1）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（C-caspase-3）蛋白表达。结果:与NC组比较,PA 10μg/ml组、PA 20μg/ml组、PA 40μg/ml... 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 材料与试剂
        1.1.2 研究对象
        1.1.3 纳入标准
    1.2 方法
        1.2.1 子宫肌瘤细胞原代培养
        1.2.2 实验处理与分组
        1.2.3 MTT检测细胞增殖
        1.2.4 流式细胞术检测细胞凋亡率
        1.2.5 qRT-PCR检测细胞中miR-133a的表达水平
        1.2.6 Western blot检测CyclinD1、EGFR、C-caspase-3蛋白表达
        1.2.7 ELISA法检测EGF水平
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 不同浓度PA对子宫肌瘤细胞增殖的影响
    2.2 PA对子宫肌瘤细胞凋亡和EGF的影响
    2.3 PA对miR-133a表达的影响
    2.4 高表达miR-133a对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡及EGF的影响
    2.5 低表达miR-133a可部分逆转PA对子宫肌瘤细胞增殖、凋亡及EGF的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3660540