ZNF772基因启动子区DNA甲基化及其表达与宫颈癌的相关性研究

发布时间：2022-07-27 20:38

　　目的研究ZNF772基因启动子区DNA甲基化的状态与其m RNA及蛋白在宫颈癌中的表达、作用和临床意义,并分析ZNF772启动子区DNA甲基化水平与其表达变化的相关性。方法选取2015年9月至2018年9月于我院妇科因宫颈癌及子宫良性疾病住院的女性患者共85例,临床病历完整,选择正常宫颈组织45例为对照组,术后病理报告为宫颈鳞状细胞癌（SCC）40例为SCC组,严格按照标本收集的纳入及排除标准,所有取材经我院病理科主任医师明确诊断。选取3例宫颈鳞癌组织和年龄相匹配的3例正常宫颈组织作对照（Control）,采用全基因组重亚硫酸盐测序（WGBS）联合转录组测序（RNA-seq）技术筛选DNA高甲基化和低表达的转录子;采用实时荧光定量PCR（RT-q PCR）和亚硫酸盐修饰后PCR（BSP）方法在40例SCC患者宫颈组织样本和45例正常宫颈组织检测ZNF772的m RNA的表达水平和DNA甲基化状态,免疫组织化学（SP）法检测其蛋白表达量;在不同病理类型宫颈组织中ZNF772基因DNA甲基化状态与m RNA的表达水平进行相关性分析;在SCC组中分析ZNF772启动子区DNA甲基化与宫颈癌临... 

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
英文缩略表
引言
第1章 实验研究
    1.1 材料
        1.1.1 宫颈组织标本收集
        1.1.2 实验主要试剂
        1.1.3 实验仪器和设备
        1.1.4 实验试剂的配置
    1.2 实验方法
        1.2.1 宫颈组织样本的DNA提取
        1.2.2 宫颈组织样本的总RNA提取
        1.2.3 宫颈组织全基因组重亚硫酸盐测序和转录组测序联合筛查分析
        1.2.4 亚硫酸盐修饰后PCR(BSP)
        1.2.5 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)
        1.2.6 免疫组织化学染色
    1.3 统计学处理
    1.4 结果
        1.4.1 各组患者一般情况分析
        1.4.2 宫颈组织中ZNF772基因启动子区DNA甲基化的WGBS检测.
        1.4.3 宫颈组织中RNA-seq检测及RT-qPCR验证
        1.4.4 BSP法检测宫颈组织中ZNF772基因的DNA甲基化程度
        1.4.5 ZNF772基因启动子区域生物信息学预测
        1.4.6 SP法检测宫颈组织中ZNF772的蛋白表达
        1.4.7 ZNF772基因的DNA甲基化与其mRNA表达的相关性
        1.4.8 ZNF772基因启动子甲基化与SCC临床病理参数的关系
    1.5 讨论
        1.5.1 宫颈组织ZNF772基因甲基化分析
        1.5.2 ZNF772基因表达下调的甲基化调控机制
        1.5.3 ZNF772基因甲基化对宫颈癌患者预后的意义
    1.6 小结
参考文献
结论
第2章 综述 ZNF基因甲基化在子宫颈癌中的研究进展
    2.1 锌指蛋白
        2.1.1 锌指蛋白的结构及功能
        2.1.2 在子宫颈癌中发挥作用锌指蛋白
    2.2 DNA甲基化
        2.2.1 DNA甲基化概述
        2.2.2 启动子区DNA甲基化在宫颈癌中的作用
    2.3 子宫颈癌中甲基化沉默的锌指蛋白
        2.3.1ZNF582
        2.3.2ZNF545
        2.3.3ZNF516
    2.4 总结与展望
    参考文献
致谢
在学期间研究成果


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3666136