基于高通量测序和假四倍体生物信息分析法的β-地中海贫血无创产前检测的研究

发布时间：2022-11-06 17:29

　　目的:地中海贫血是危害严重的遗传性溶血性疾病。重型β-地中海贫血需要终生依赖输血和祛铁治疗,治疗费用昂贵,死亡率极高,给病人、家庭和社会带来巨大的负担。对高危夫妇实施胎儿产前诊断是避免重型患儿出生的唯一有效途径。目前国内外对地中海贫血的产前诊断方法主要是有创的产前诊断技术,不可避免会存在对母体和胎儿的伤害。因此,安全有效的无创性产前诊断技术一直是地中海贫血等遗传性疾病产前诊断研究的方向和目标。本研究拟应用高通量目标区域捕获测序和假四倍体基因型生物信息分析方法,对高危孕妇血浆游离胎儿DNA实施β-地中海贫血基因突变检测,探讨创建安全、有效和准确的无创性产前检测体系,为β-地中海贫血产前诊断提供新的技术和实施方法。方法:课题选取的研究对象为双方均携带β-地中海贫血基因突变,可能生育重型β-地中海贫血患儿的夫妇。孕妇孕周为12周-26周、单活胎、拟进行胎儿产前诊断。对孕妇实施绒毛膜穿刺、羊膜腔穿刺或脐静脉穿刺,提取胎儿DNA,应用反向斑点杂交法和荧光PCR溶解曲线法进行胎儿DNA地中海贫血基因诊断。同时采集孕妇外周血,提取血浆游离DNA。设计针对中国人群常见的12种β-地中海贫血基因突变类型... 

【文章页数】：139 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
个人简历
中文摘要
英文摘要
中英文缩略语
一、前言
二、实验设计及技术路线
三、实验方法
    第一部分：标本的采集和保存
    第二部分：有创方法获取胎儿DNA进行β-地中海贫血基因分析
    第三部分：孕妇外周血游离DNA的提取及文库构建、孕妇配偶基因组DNA文库构建
    第四部分：基于目的基因捕获的高通量测序
    第五部分：假四倍体基因型生物信息分析
    第六部分：本研究无创产前检测方法效能评估
四、实验结果
    第一部分：临床资料、孕妇外周血游离DNA文库浓度结果
    第二部分：有创方法检测胎儿β-地中海贫血基因型结果
    第三部分：孕妇外周血游离DNA文库质量检测结果
    第四部分：基于目的基因捕获的高通量测序结果
    第五部分：假四倍体基因型生物信息分析结果
    第六部分：本研究无创产前检测方法效能评估结果
五、讨论
六、结论
七、本课题创新性
参考文献
综述
    参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]高龄孕妇唐氏综合征筛查和诊断的研究进展[J]. 张姣,张斌.  中国生育健康杂志. 2014 (01)
[2]孕妇外周血单个胎儿有核红细胞在β地中海贫血产前基因诊断中的应用[J]. 韦红英,龙桂芳,林伟雄,李树全.  中华儿科杂志. 2007(12)
[3]单因子利率模型的极大似然估计——对中国利率的实证分析[J]. 潘冠中,邵斌.  财经研究. 2004(10)

硕士论文
[1]孕妇外周血中胎儿有核红细胞的分离与鉴定[D]. 谢林.华南理工大学 2016



本文编号：3703919