CircRNA-79530与TWIST形成正反馈回路调控滋养细胞EMT的机制

发布时间：2022-11-08 21:23

　　目的探究CircRNA-79530与TWIST形成正反馈回路调控滋养细胞EMT的机制。方法筛选20例严重早发先兆子痫的患者和20例非严重早发先兆子痫的患者的胎盘样本。重组荧光素酶实验检测TWIST与CircRNA-79530靶标关系;RT-PCR检测TWIST和CircRNA-79530mRNA表达;Ed U染色法和CCK-8法测定细胞增殖;Annexin V-FITC检测细胞凋亡;蛋白印迹检测EMT蛋白表达;Transwell细胞迁移和侵袭实验检测细胞迁移侵袭能力;蛋白质免疫印迹法检测凋亡蛋白表达。结果重度先兆子痫组较非重度先兆子痫组TWIST、CircRNA-79530mRNA表达降低（P ＜0.05）。对照组较TWIST转染组细胞凋亡率升高,细胞活力降低,E-钙粘着蛋白、波形蛋白、β-连环蛋白、MMP9表达降低,细胞迁移和侵袭减少,caspase-3、Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低（P ＜0.05）。结论 TWIST直接与CircRNA-79530结合形成正反馈,促进滋养细胞的增殖、迁移侵袭。 

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 胎盘标本采集
        1.1.2 细胞培养和质粒构建
        1.1.3 实验分组
    1.2 实验方法
        1.2.1 双荧光素酶报告基因检测
        1.2.2 实时定量PCR(qRT-PCR)
        1.2.3 细胞增殖、活力测定
        1.2.4 细胞凋亡测定
        1.2.5 蛋白质免疫印迹
        1.2.6 Transwell细胞迁移和侵袭实验
    1.3统计学方法
2结果
    2.1 重组荧光素酶检测
    2.2 RT-PCR实时分析
    2.3细胞增殖检测
    2.4细胞凋亡及活力检测
    2.5 TWIST促进细胞EMT发生
    2.6 TWIST促进HTR8/SVneo细胞侵袭转移
    2.7 凋亡蛋白指标检测
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]长链非编码RNA-TCL6在胎盘植入组织中的表达水平及对滋养层细胞活性和迁移的影响[J]. 王瑞,吴淑贞,李杨,陈娟.  实用医学杂志. 2019(13)



本文编号：3704583