MiR-185-5p通过靶向调控VEGFA影响多囊卵巢综合征的血管生成

发布时间：2023-02-10 16:00

　　目的:多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种妇科常见的内分泌疾病,也是女性不孕症的主要原因之一,在育龄妇女中发病率约7%～9%。其临床表现异质性,不但严重影响患者的生殖功能,而且使雌激素依赖性肿瘤发病率增加,相关的代谢失调包括高雄激素血症、胰岛素抵抗、糖代谢异常、脂代谢异常,导致2型糖尿病和心血管疾病的发病率也增加。目前为止,仍不能准确地说明引发PCOS的具体因素,现阶段的研究发现,病因主要集中在以下几方面:遗传因素、环境因素、高雄激素分泌、肥胖、炎症、青春期发育亢进等。之前有研究表明血管生成在PCOS的发生、发展中起重要作用,卵巢血管增生与扩张、血流丰富是PCOS的显著特征,PCOS的发生与血管生成相关因子的调节障碍有关。有证据表明,血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)作为重要的血管生成因子参与PCOS的发生,有研究发现VEGF在PCOS中表达上调。Di Pietro等已证实VEGF水平可能影响PCOS大鼠卵泡发育和卵巢血管生成。VEGFA(vascular endotheli...

【文章页数】：81 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分:MiR-185-5p对 PCOS大鼠卵巢血管生成的影响
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要试剂和仪器
            2.1.1 实验动物
            2.1.2 主要试剂
            2.1.3 主要仪器
        2.2 实验方法
            2.2.1 慢病毒过表达载体构建
            2.2.2 动物建模
            2.2.3 胰岛素释放评估
            2.2.4 HE染色
            2.2.5 免疫组化染色
            2.2.6 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测VEGFA
            2.2.7 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测mi R-185-5p
            2.2.8 酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测VEGFA、ANGPT1、ANGPT2、PDGFB、PDGFD浓度
            2.2.9 统计学数据分析
    3 结果
        3.1 Mi R-185-5p改善了PCOS大鼠的胰岛素释放
        3.2 Mi R-185-5p减轻PCOS大鼠卵巢形态学损伤
        3.3 Mi R-185-5p抑制PCOS大鼠卵巢中的血管生成作用
    4 讨论
    5 结论
第二部分 :Mi R-185-5p通过靶向结合VEGFA影响人卵巢微血管内皮细胞(HOMECs)的血管生成
    6 前言
    7 材料和方法
        7.1 主要试剂和仪器
            7.1.1 细胞系
            7.1.2 主要试剂
            7.1.3 主要仪器
        7.2 实验方法
            7.2.1 双荧光素酶检测
            7.2.2 人卵巢微血管内皮细胞培养
            7.2.3 慢病毒感染人卵巢微血管内皮细胞
            7.2.4 蛋白质免疫印迹(Western blot)
            7.2.5 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测VEGFA
            7.2.6 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测mi R-185-5p
            7.2.7 MTT检测
            7.2.8 Transwell迁移实验
            7.2.9 成管实验
            7.2.10 统计学数据分析
    8 结果
        8.1 Mi R-185-5p直接与VEGFA相互作用
        8.2 Mi R-185-5p的过表达降低了HOMEC中的VEGFA表达
        8.3 Mi R-185 的过表达抑制HOMEC中 VEGF诱导的细胞增殖、迁移和成管
    9 讨论
    10 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3739475