miR-195-5p通过靶向STAT3调控免疫抑制基因PD-L1参与卵巢癌增殖和侵袭的机制研究

发布时间：2023-02-10 18:13

　　目的探究微小RNA(microRNA,miR)-195-5p通过靶向STAT3调控免疫抑制基因程序性死亡受体-配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)参与卵巢癌增殖和侵袭的机制。方法通过双荧光素酶报告基因检测方法验证miR-195-5p靶向STAT3。将卵巢癌细胞系SKOV-3分为4组:对照组、mimic组、mimic+STAT3组和STAT3组。通过质粒转染技术过表达miR-195-5p和STAT3。qPCR和Western blot检测RNA或蛋白的表达水平。分别通过CCK-8法、Transwell实验检测各组的细胞活力、侵袭能力。通过荷瘤裸鼠实验在体内验证过表达miR-195-5p对肿瘤生长、STAT3和PD-L1的影响。结果 miR-195-5p直接靶向STAT3。过表达miR-195-5p抑制STAT3 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05),过表达STAT3显著逆转miR-195-5p对STAT3的抑制作用(P<0.05)。Mimic组的细胞活力和细胞迁移能力显著低于对照组(P<0.05),STAT3组的细胞活力...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要材料和仪器
    1.2 miR-195-5p靶向STAT3位点预测和验证
    1.3 细胞培养、分组和转染
    1.4 qPCR检测miR-195-5p、STAT3和PD-L1mRNA
    1.5 Western blot检测STAT3和PD-L1蛋白
    1.6 CCK-8检测细胞生长
    1.7 Transwell检测细胞侵袭
    1.8 荷瘤裸鼠实验
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 miR-195-5p靶向STAT3
    2.2 各组miR-195-5p和STAT3表达水平比较
    2.3 各组细胞活力比较
    2.4 各组细胞侵袭能力比较
    2.5 各组PD-L1 mRNA和蛋白水平比较
    2.6 各组小鼠肿瘤体积和质量比较
    2.7 各组miR-195-5p、STAT3和PD-L1蛋白水平比较
3 讨论



本文编号：3739665