STK17A基因经TGF-β/SMAD信号通路调控宫颈癌细胞增殖凋亡及侵袭的机制研究

发布时间：2023-03-12 00:10

　　目的:探究丝氨酸/苏氨酸激酶17A (STK17A)基因介导转化生长因子β(TGF-β)/SMAD信号通路对宫颈癌细胞增殖、侵袭及凋亡的调控机制。方法:收集我院43例宫颈癌患者癌组织及癌旁组织。HE染色观察组织病理结构。免疫组化检测组织中STK17A阳性表达。筛选STK17A低表达宫颈癌细胞系并将细胞系分为阴性对照组(宫颈癌细胞转染含有无关序列的重组质粒)、基因沉默组(宫颈癌细胞转染含有STK17A shRNA的重组质粒)、基因过表达组(宫颈癌细胞转染含有STK17A片段的重组质粒)、通路抑制剂组(TGF-β/SMAD通路特异性抑制剂处理宫颈癌细胞)、联合组(TGF-β/SMAD通路抑制联合STK17A过表达处理细胞)。qRT-PCR和Western blot检测各组细胞STK17A、TGF-β1、SMAD3、E-cadherin、N-cadherin和TIMP3的表达。CCK-8检测各组细胞活力。细胞划痕和Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力。Annexin V-FITC/PI双染检测各组细胞凋亡情况。结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织排列紊乱,无极性(层次和结构)且STK...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 材料与试剂
        1.1.2 组织来源
    1.2 方法
        1.2.1 STK17A沉默及过表达重组质粒构建
        1.2.2 细胞分组及转染
        1.2.3 HE染色
        1.2.4 免疫组化检测
        1.2.5 qRT-PCR
        1.2.6 Western blot
        1.2.7 CCK-8测定细胞活力
        1.2.8 细胞划痕实验
        1.2.9 Transwell细胞侵袭实验
        1.2.10 Annexin V-FITC/PI双染检测宫颈癌细胞凋亡
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 宫颈癌和癌旁组织病理情况观察
    2.2 宫颈癌和癌旁组织中STK17A阳性表达情况
    2.3 STK17A蛋白在宫颈癌细胞系中的表达
    2.4 各组Hela细胞中STK17A、TGF-β1、SMAD3、E-cadherin、N-cadherin和TIMP3表达
    2.5 各组细胞活力检测结果
    2.6 各组细胞迁移和侵袭能力检测结果
    2.7 各组细胞凋亡情况检测结果
3 讨论



本文编号：3760533