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“β-hCG-ERK1/2-MMP-2”信号通路调控卵巢癌细胞侵袭转移的作用及机制研究

发布时间:2023-03-18 19:01
  背景/目的:侵袭、转移是卵巢癌死亡率高的主要原因之一,然而其潜在的分子机制尚不明确。国内外研究发现,β-h CG在多种恶性肿瘤中高表达,在肿瘤发生侵袭、转移等进程中发挥重要的促进作用,细胞外信号调节激酶(ERK1/2)及其下游基质金属蛋白酶(MMPs)等的协同作用是肿瘤细胞迁移和侵袭的关键环节。本课题旨在探索“β-h CG-ERK1/2-MMP-2”信号通路在卵巢癌侵袭、转移中的作用及相关分子机制。方法:培养卵巢癌细胞ES-2和SKOV3,应用过表达β-hCG的慢病毒载体(LV-β-hCG)和针对β-h CG的si RNA(si RNA-β-h CG),分别转染卵巢癌细胞,构建过表达、敲低β-h CG表达水平的卵巢癌细胞模型,同时设置阴性对照组LV-control和si RNA-NC,q RT-PCR和Western Blot技术分析各组细胞中β-h CG的表达水平,验证感染效率。在构建的细胞模型基础上,分别应用细胞划痕实验和Transwell迁移、侵袭实验观察β-h CG对卵巢癌细胞体外迁移、侵袭能力的影响。q RT-PCR、Western Blot技术检测分析过表达、敲低β-h C...

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
英文缩写词表
前言
第一章 构建过表达、敲低β-hCG的卵巢癌细胞模型
    1. 引言
    2. 实验材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
        2.3 数据分析
    3. 结果
        3.1 载体序列与GeneBank中的β-hCG序列相符
        3.2 成功构建稳定过表达β-hCG的卵巢癌细胞
        3.3 成功构建敲低β-hCG的卵巢癌细胞
    4. 讨论
第二章 β-hCG调控卵巢癌细胞体外迁移侵袭的作用
    1. 引言
    2. 实验材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 实验方法
        2.3 数据分析
    3. 结果
        3.1 细胞划痕实验证实β-hCG调控卵巢癌细胞体外迁移
        3.2 Transwell迁移、侵袭实验证实β-hCG调控卵巢癌细胞体外迁移侵袭
    4. 讨论
第三章“β-hCG-ERK1/2-MMP-2”调控卵巢癌细胞体外侵袭转移的作用及其机制
    第一节“β-hCG-ERK1/2-MMP-2”调控卵巢癌细胞体外侵袭转移的机制
        1. 引言
        2. 实验材料与方法
            2.1 实验材料
            2.2 实验方法
            2.3 数据分析
        3. 结果
            3.1 过表达β-hCG的卵巢癌细胞中,β-hCG、ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2的表达水平显著上调
            3.2 敲低β-hCG的卵巢癌细胞中,β-hCG、ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2 的表达水平显著下调
    第二节 ERK1/2“拯救”条件下,β-hCG调控卵巢癌细胞体外侵袭转移的作用及机制
        1. 引言
        2. 实验材料与方法
            2.1 实验材料
            2.2 实验方法
            2.3 数据分析
        3. 结果
            3.1 成功构建过表达β-hCG敲低ERK1/2 的卵巢癌细胞
            3.2 Transwell迁移、侵袭实验验证ERK1/2“拯救”条件下,逆转β-hCG促进卵巢癌的体外转移能力
            3.3 ERK1/2“拯救”条件下,过表达β-hCG卵巢癌细胞中ERK1/2、p-ERK1/2、MMP-2的表达水平显著下调
讨论
全文总结
参考文献
综述 “β-hCG-ERK1/2-MMPs” 信号通路在肿瘤中的研究进展
    参考文献
致谢信
作者简介
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表



本文编号:3763693

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