四个卵巢癌候选致病基因的细胞功能研究

发布时间：2023-04-02 18:31

　　研究背景和目的:卵巢癌(ovarian cancer,OC)是女性常见的五大癌症之一,并且是导致女性死亡的第一大生殖系统癌症。据统计,约有20%²5%卵巢癌的发生发展与遗传因素有关。晚期卵巢癌患者5年生存率仅为25%⁴0%。根据课题组前期的全外显子测序和sanger测序结果,本实验在TP53、PTEN、CREBBP和NOTCH2基因中筛选出了7个点突变,通过对致病候选基因TP53、PTEN、CREBBP和NOTCH2基因及其突变进行细胞功能性实验,探讨这4基因及其7个点突变对卵巢癌细胞蛋白表达、增殖、迁移及侵袭的影响。研究方法:选择无内源性TP53、CREBBP和NOTCH2蛋白表达的卵巢癌A2780细胞系进行该基因的细胞实验,选择无内源性PTEN蛋白表达的卵巢癌CAOV3细胞系进行该基因的细胞实验。每个基因组各分为野生型组、突变型组和空载体组。构建TP53、PTEN、CREBBP和NOTCH2基因的野生型质粒,利用点突变试剂盒构建筛选到的TP53 G199X、TP53 V157fs、PTEN H122D、PTEN Q22X、CREBBP L...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 研究工作的背景与意义
    1.2 卵巢癌基因组测序的国内外研究现状
        1.2.1 全外显子测序
        1.2.2 全基因组测序
        1.2.3 靶向性区域测序
        1.2.4 转录组测序
        1.2.5 其他测序技术
    1.3 卵巢癌相关基因的国内外研究现状
    1.4 本文的主要贡献与创新
    1.5 本论文的结构安排
第二章 实验材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验细胞和质粒
        2.1.2 实验试剂和耗材
        2.1.3 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 质粒的构建和抽提
        2.2.2 细胞的培养
        2.2.3 细胞的转染
        2.2.4 Western blot实验
        2.2.5 细胞增殖实验
        2.2.6 细胞迁移实验
        2.2.7 细胞侵袭实验
        2.2.8 双荧光素酶检测实验
    2.3 实验数据统计分析
    2.4 本章小结
第三章 实验结果
    3.1 突变对蛋白质表达的影响
    3.2 突变对细胞增殖活性的影响
    3.3 突变对细胞迁移能力的影响
    3.4 突变对细胞侵袭能力的影响
    3.5 NOTCH2 P2113S可以抑制CBF1 的转录活性
    3.6 本章小结
第四章 讨论
    4.1 TP53 基因
    4.2 PTEN基因
    4.3 CREBBP基因
    4.4 NOTCH2 基因
    4.5 本章小结
第五章 全文总结与展望
    5.1 全文总结
    5.2 后续工作展望
致谢
参考文献
攻读硕士学位期间取得的成果



本文编号：3779729