Wnt3a对子宫内膜癌细胞转移的影响及其分子机制

发布时间：2023-04-22 03:12

　　目的观察Wnt3a对子宫内膜癌细胞转移的影响,并探讨其是否通过Dishevelled-2(Dvl-2)激活PI3KAkt-GSK3β通路起作用。方法取子宫内膜癌细胞Ishikaw,MTT法确定Wnt3a作用于细胞的安全浓度<500 ng/mL;以0、50、100、200、400 ng/mL Wnt3a处理后,用细胞划痕实验测算细胞迁移距离; 400 ng/mL Wnt3a处理细胞0、12、24、48 h后,Western blotting法检测细胞中Dvl-2、PI3K、Akt和GSK3β的磷酸化水平;转染Dvl-2 siRNA质粒敲低Dvl-2表达后,观察Wnt3a对细胞迁移的影响;分别用LY294002(PI3K抑制剂)、CCT128930(Akt抑制剂)预处理细胞后,用Western blotting法检测Wnt3a诱导的Akt、GSK3β磷酸化水平变化;敲低Dvl-2表达后,用Western blotting法检测Wnt3a诱导的PI3K磷酸化水平变化;分别用LY294002、CCT128930、AR-A014418(GSK3β抑制剂)预处理细胞,或敲低Dvl-2表达、I...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要材料
    1.2．细胞培养
    1.3 Wnt3a影响细胞活性观察
    1.4 Wnt3a影响细胞迁移能力观察
    1.5 Wnt3a影响Dvl-2、PI3K-Akt-GSK3β通路活性观察
    1.6 Dvl-2在Wnt3a影响细胞迁移能力中的作用观察
    1.7 细胞中Wnt3a与Dvl-2、PI3K-Akt-GSK3β通路的调控关系分析
    1.8 PI3K-Akt-GSK3β通路在Wnt3a影响细胞迁移能力中的作用观察
    1.9 Dvl-2调控PI3K-Akt-GSK3β通路在Wnt3a影响细胞迁移能力中的作用观察
    1.1 0 统计学方法
2 结果
    2.1 Wnt3a对细胞迁移的影响
    2.2 Wnt3a对细胞中Dvl-2、PI3K-Akt-GSK3β通路活性影响
    2.3 Dvl-2在Wnt3a影响细胞迁移能力中的作用
    2.4 Wnt3a通过Dvl-2激活PI3K-Akt-GSK3β信号通路
    2.5 PI3K-Akt-GSK3β通路在Wnt3a影响细胞迁移能力中的作用
    2.6 Dvl-2调控PI3K-Akt-GSK3β通路在Wnt3a影响细胞迁移能力中的作用
3 讨论



本文编号：3796799