MT1过表达可通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路影响SKOV3细胞的增殖与凋亡

发布时间：2023-05-06 01:20

　　卵巢癌是一种常见的威胁女性健康的恶性肿瘤。然而卵巢癌的发生机制尚不清楚。该研究旨在探讨褪黑激素受体MT1在人卵巢癌SKOV3细胞中的作用及其主要机制。采用MT1-pcDNA3.1质粒(MT1组)与空载体pcDNA3.1(对照组)转染SKOV3细胞,未转染SKOV3细胞作为阴性对照组。转染48 h后,新鲜培养基培养24 h或48 h,观察细胞周期、增殖、凋亡情况,上清液检测褪黑激素表达。此外,在血清缺乏培养基培养细胞并转48 h后,更换新鲜培养基并加入4 μmol/L PF-04691502抑制剂孵化24 h。测定AKT蛋白水平、总mTOR蛋白水平和相应磷酸化蛋白水平。结果显示,与NC组相比,MT1组在细胞周期S期阻滞(P<0.05),伴随增殖减少和早期凋亡(P<0.05)。3组细胞上清液检测到褪黑激素分泌均随时间增加(P<0.05)。Western blot分析显示,MT1过表达抑制了PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活。该研究得出,SKOV3细胞有自行分泌褪黑激素的能力。MT1过表达可与内源性褪黑激素结合,抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活,最终发挥抗...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞与试剂
    1.2 MT1-pcDNA3.1过表达质粒的构建
    1.3 Real-time定量PCR(RT-PCR)
    1.4 凋亡检测
    1.5 细胞增殖检测
    1.6 细胞周期检测
    1.7 ELISA检测细胞上清液褪黑素水平
    1.8 Western blot
    1.9 统计分析
2 结果
    2.1 MT1-pcDNA3.1过表达质粒成功转染进入SKOV3细胞系
    2.2 MT1过表达促进细胞早期凋亡
    2.3 MT1过表达导致SKOV3细胞周期在S期发生阻滞并抑制细胞增殖
    2.4 MT1过表达抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路
    2.5 SKOV3细胞有分泌褪黑素的能力
3 讨论



本文编号：3808738