顺铂通过下调IL-17E/IL-17RB表达抑制宫颈癌细胞生长、迁移和侵袭
发布时间：2023-05-11 02:55
背景:白介素17E是白介素17家族的一员,主要由免疫细胞产生,但是发挥着自己独特的作用----强大的免疫调节作用。顺铂作为一种广谱抗癌药物,被广泛用于癌症包括宫颈癌的临床治疗中。白介素17家族在肿瘤进程中到底是发挥促癌作用还是抑癌作用和肿瘤的类型以及分期是息息相关的。但是白介素17E在宫颈癌中到底发挥作用与否以及具体作用,目前为止尚无文献报道。大量文献报道化疗药物顺铂联合细胞因子可以诱导细胞凋亡进而促进其死亡,因而阻止了癌症的转移,那么顺铂联合白介素17E到底发挥什么样的作用值得我们进一步探讨。目的:探讨白介素17E在宫颈癌细胞生物学行为(增殖、迁移、侵袭和凋亡)中可能发挥的作用,研究顺铂是否调控了白介素17E及其受体的表达,可能发挥的作用以及可能的信号通路。方法:运用流式细胞分析法和酶联免疫吸附实验检测白介素17E及其受体白介素17RB在四种宫颈癌细胞系中的表达,采用细胞增殖活力试剂盒CCK-8法分别检测对宫颈癌细胞活力增殖的影响,同时应用Annexin V-7AAD凋亡试剂盒检测对细胞凋亡的作用,采用划痕实验以及Transwell小室迁移,侵袭实验测定对肿瘤细胞迁移和侵袭功能的影响...
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
主要中英文缩写对照
第一章 绪论
1.1 研究背景
1.1.1 宫颈癌现状
1.1.2 IL-17E简介
1.1.3 IL-17E与肿瘤
1.1.4 顺铂与细胞因子
第二章 综述
2.1 肿瘤微环境简介
2.2 IL-17E与免疫细胞
2.2.1 IL-17E与Tregs
2.2.1.1 IL-17E/Th17细胞在肿瘤微环境中的调控机制
2.2.2 IL-17E与嗜酸性粒细胞(EOS)
2.2.3 IL-17E与巨噬细胞
2.2.4 IL-17E与中性粒细胞
2.3 IL-17E与细胞因子
2.4 IL-17E与肿瘤
2.4.1 IL-17E与乳腺癌
2.4.2 IL-17家族与宫颈癌
2.4.3 IL-17E与肺癌
2.5 展望
2.6 本课题研究的意义
2.7 本课题的研究内容
第三章 实验材料和方法
3.1 实验材料
3.1.1 主要实验细胞
3.1.2 主要试剂
3.1.3 主要实验仪器
3.1.4 主要试剂的配制
3.2 实验方法与步骤
3.2.1 细胞培养
3.2.2 细胞传代
3.2.3 细胞复苏
3.2.4 细胞冻存
3.2.5 细胞计数方法
3.2.6 流式细胞分析技术检测宫颈癌细胞系IL-17E/IL-17RB表达量
3.2.7 酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞系IL-17E的分泌水平
3.2.8 免疫组化检测宫颈癌组织IL-17E/IL-17RB的表达
3.2.9 CCK-8细胞增殖-毒性试验检测药物对宫颈细胞系HeLa/SiHa增殖的影响
3.2.10 Transwell小室测定不同药物对宫颈癌细胞系HeLa和SiHa侵袭能力的影响
3.2.11 Transwell测定不同药物对宫颈癌细胞系HeLa和SiHa迁移能力的影响
3.2.12 划痕实验间接检测药物对宫颈癌细胞系的增殖迁移作用
3.2.13 AnnexinV-7AAD凋亡试剂盒检测药物对宫颈癌细胞系HeLa和SiHa凋亡的作用
3.2.14 结果分析统计处理
第四章 结果
4.1 IL-17E/IL-17RB在组织原位以及细胞系中的表达
4.1.1 流式细胞分析检测IL-17E/IL-17RB在宫颈癌细胞系中的表达
4.1.2 酶联免疫吸附试验(ELISA)测定宫颈癌细胞系中分泌型IL-17E水平
4.1.3 免疫组化检测组织中IL-17E/IL-17RB的表达
4.2 IL-17E对宫颈癌细胞生物学行为的影响
4.2.1 IL-17E促进宫颈癌细胞增殖
4.2.2 IL-17E促进宫颈癌细胞迁移
4.2.3 IL-17E促进宫颈癌细胞侵袭
4.2.4 中和性IL-17E抗体促进宫颈癌细胞凋亡
4.3 顺铂对宫颈癌细胞生物学行为的影响
4.3.1 顺铂抑制宫颈癌细胞增殖
4.3.2 顺铂抑制宫颈癌细胞迁移、侵袭
4.3.3 顺铂促进宫颈癌细胞凋亡
4.4 顺铂下调了宫颈癌细胞中IL-17E/IL-17RB的表达
4.5 顺铂抑制IL-17E诱导的刺激效应
4.5.1 顺铂抑制IL-17E诱导的细胞增殖反应
4.5.2 顺铂抑制IL-17E诱导的细胞迁移能力
4.5.3 顺铂抑制IL-17E诱导的细胞侵袭作用
4.5.4 顺铂诱导IL-17E促进细胞凋亡
第五章 讨论
第六章 结论
第七章 展望
致谢
攻读硕士学位期间公开发表的论文
参考文献
本文编号：3814015
【文章页数】：53 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
主要中英文缩写对照
第一章 绪论
1.1 研究背景
1.1.1 宫颈癌现状
1.1.2 IL-17E简介
1.1.3 IL-17E与肿瘤
1.1.4 顺铂与细胞因子
第二章 综述
2.1 肿瘤微环境简介
2.2 IL-17E与免疫细胞
2.2.1 IL-17E与Tregs
2.2.1.1 IL-17E/Th17细胞在肿瘤微环境中的调控机制
2.2.2 IL-17E与嗜酸性粒细胞(EOS)
2.2.3 IL-17E与巨噬细胞
2.2.4 IL-17E与中性粒细胞
2.3 IL-17E与细胞因子
2.4 IL-17E与肿瘤
2.4.1 IL-17E与乳腺癌
2.4.2 IL-17家族与宫颈癌
2.4.3 IL-17E与肺癌
2.5 展望
2.6 本课题研究的意义
2.7 本课题的研究内容
第三章 实验材料和方法
3.1 实验材料
3.1.1 主要实验细胞
3.1.2 主要试剂
3.1.3 主要实验仪器
3.1.4 主要试剂的配制
3.2 实验方法与步骤
3.2.1 细胞培养
3.2.2 细胞传代
3.2.3 细胞复苏
3.2.4 细胞冻存
3.2.5 细胞计数方法
3.2.6 流式细胞分析技术检测宫颈癌细胞系IL-17E/IL-17RB表达量
3.2.7 酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞系IL-17E的分泌水平
3.2.8 免疫组化检测宫颈癌组织IL-17E/IL-17RB的表达
3.2.9 CCK-8细胞增殖-毒性试验检测药物对宫颈细胞系HeLa/SiHa增殖的影响
3.2.10 Transwell小室测定不同药物对宫颈癌细胞系HeLa和SiHa侵袭能力的影响
3.2.11 Transwell测定不同药物对宫颈癌细胞系HeLa和SiHa迁移能力的影响
3.2.12 划痕实验间接检测药物对宫颈癌细胞系的增殖迁移作用
3.2.13 AnnexinV-7AAD凋亡试剂盒检测药物对宫颈癌细胞系HeLa和SiHa凋亡的作用
3.2.14 结果分析统计处理
第四章 结果
4.1 IL-17E/IL-17RB在组织原位以及细胞系中的表达
4.1.1 流式细胞分析检测IL-17E/IL-17RB在宫颈癌细胞系中的表达
4.1.2 酶联免疫吸附试验(ELISA)测定宫颈癌细胞系中分泌型IL-17E水平
4.1.3 免疫组化检测组织中IL-17E/IL-17RB的表达
4.2 IL-17E对宫颈癌细胞生物学行为的影响
4.2.1 IL-17E促进宫颈癌细胞增殖
4.2.2 IL-17E促进宫颈癌细胞迁移
4.2.3 IL-17E促进宫颈癌细胞侵袭
4.2.4 中和性IL-17E抗体促进宫颈癌细胞凋亡
4.3 顺铂对宫颈癌细胞生物学行为的影响
4.3.1 顺铂抑制宫颈癌细胞增殖
4.3.2 顺铂抑制宫颈癌细胞迁移、侵袭
4.3.3 顺铂促进宫颈癌细胞凋亡
4.4 顺铂下调了宫颈癌细胞中IL-17E/IL-17RB的表达
4.5 顺铂抑制IL-17E诱导的刺激效应
4.5.1 顺铂抑制IL-17E诱导的细胞增殖反应
4.5.2 顺铂抑制IL-17E诱导的细胞迁移能力
4.5.3 顺铂抑制IL-17E诱导的细胞侵袭作用
4.5.4 顺铂诱导IL-17E促进细胞凋亡
第五章 讨论
第六章 结论
第七章 展望
致谢
攻读硕士学位期间公开发表的论文
参考文献
本文编号：3814015
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/fuchankeerkelunwen/3814015.html
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