CRIM1通过激活ERK1/2-VEGF信号通路促进子宫颈鳞状细胞癌微血管生成

发布时间：2023-06-05 20:44

　　目的探讨CRIM1表达与子宫颈鳞状细胞癌微血管生成的关系及其分子机制。方法采用免疫组化MaxVision法检测并结合光密度分析CRIM1蛋白的组织表达;采用CD34内皮标记及Weinner计数法检测子宫颈鳞状细胞癌组织中的微血管密度(microvascular density,MVD)。通过真核表达质粒pCMV3-CRIM1转染子宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞获得CRIM1基因过表达;采用Western blot法检测癌细胞中p-ERK和VEGF的表达,并利用ERK抑制处理癌细胞,观察ERK信号抑制对VEGF表达的影响;通过ELISA法检测细胞上清液中VEGF蛋白含量。分别利用CCK-8实验和Matrigel管腔形成实验检测人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC)的增殖和管腔形成能力。结果子宫颈鳞状细胞癌组织中CRIM1表达水平(200 039±163 274.86)显著高于慢性子宫颈炎组织(28 258.0±16 606.04,P<0.001),且CRIM1表达与子宫颈鳞状细胞癌MVD呈正相关(r=0.546,P...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 临床资料
    1.2 方法
        1.2.1 免疫组化
        1.2.2 MVD检测
        1.2.3 子宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞CRIM1基因瞬时转染
        1.2.4 Western blot法
        1.2.5 细胞上清液中VEGF含量ELISA检测
        1.2.6 CCK-8实验
        1.2.7 Matrigel胶管腔形成实验
        1.2.8 人重组蛋白作用SiHa
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 子宫颈鳞状细胞癌中CRIM1的表达
    2.2 子宫颈鳞状细胞癌中CRIM1的表达与MVD的关系
    2.3 CRIM1与SiHa细胞血管诱生能力的关系
        2.3.1 过表达CRIM1的SiHa细胞上清液促进内皮细胞增殖
        2.3.2 SiHa细胞中CRIM1过表达增强内皮细胞管腔形成能力
    2.4 CRIM1活化ERK信号上调VEGF表达促进SiHa细胞血管诱生能力
        2.4.1 CRIM1的高表达上调SiHa细胞中VEGF蛋白表达
        2.4.2 CRIM1上调VEGF表达依赖于ERK信号的活化
    2.5 外源性CRIM1对SiHa细胞中VEGF蛋白表达的影响
3 讨论



本文编号：3832019