SPP1蛋白在小鼠早期妊娠子宫中的表达研究

发布时间：2023-09-14 01:38

　　鞘氨醇-1-磷酸(S1P)是一种生物活性脂质,它的水平受到合成和降解的严格控制。在细胞内,S1P可以被鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶(SPP)去磷酸化。SPP1通过调节神经酰胺水平、参与神经酰胺从内质网到高尔基体的运输以及内质网应激诱导的自噬来调节细胞凋亡。在胚胎着床过程中,胚胎和子宫经历同步发展和交流,并涉及细胞凋亡过程。本研究通过建立小鼠早期妊娠模型、假孕模型、延迟着床及激活模型和人工蜕膜化模型,采用免疫组织化学技术检测SPP1蛋白在各模型子宫组织中的表达。并用Western blot技术检测SPP1蛋白在小鼠早期妊娠模型子宫中的表达量变化。免疫组化结果显示SPP1蛋白在小鼠早期妊娠1-4天主要表达在腔上皮和腺上皮中。在妊娠第5天,SPP1蛋白表达在着床位点周围的基质处。在妊娠的第6-8天,SPP1蛋白主要表达在蜕膜区。在小鼠假孕模型中,SPP1蛋白的表达模式与小鼠早期妊娠模型1-4天相似。在小鼠延迟着床模型中,SPP1蛋白主要表达在子宫的腔上皮和腺上皮中;通过雌激素处理诱导胚胎着床,SPP1蛋白主要表达在腔上皮和着床囊胚周围的基质处。在小鼠人工蜕膜化模型中,SPP1蛋白主要表达在蜕膜区,...

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1概述
        1.1.1 鞘氨醇-1-磷酸和鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶
        1.1.2 SPP1的发现
        1.1.3 SPP1的生化特征及作用特点
        1.1.4 SPP1的功能
        1.1.5 SPP1与疾病
    1.2 胚胎着床概述
        1.2.1 胚胎着床中激素的调节
        1.2.2 胚胎着床中细胞因子的调节
        1.2.3 胚胎着床中粘附分子的调节
        1.2.4 胚胎着床和细胞凋亡
    1.3 本实验研究的目的及意义
2 小鼠妊娠模型制备
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验仪器与器具
        2.1.3 实验试剂
        2.1.4 实验药品配置
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验前仪器处理
        2.2.2 小鼠妊娠模型的建立
    2.3 实验结果与分析
        2.3.1 成功建立小鼠早期妊娠模型
        2.3.2 成功建立小鼠假孕模型
        2.3.3 成功建立小鼠延迟着床及激活模型
        2.3.4 成功建立小鼠人工蜕膜化模型
    2.4 本章小结
3 免疫组织化学检测SPP1蛋白在小鼠子宫组织中的表达
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验动物
        3.1.2 实验仪器与器具
        3.1.3 实验试剂
        3.1.4 实验药品配置
    3.2 实验方法
        3.2.1 玻片的处理
        3.2.2 冰冻组织切片的制备
        3.2.3 免疫组织化学操作步骤
    3.3 实验结果与分析
        3.3.1 小鼠早期妊娠模型中SPP1蛋白的表达
        3.3.2 小鼠假孕模型中SPP1蛋白的表达
        3.3.3 小鼠延迟着床及激活模型中的SPP1蛋白表达
        3.3.4 小鼠人工蜕膜化模型中SPP1蛋白的表达
    3.4 本章小结
4 Western Blot检测小鼠早期妊娠模型中SPP1蛋白的表达量变化
    4.1 实验材料
        4.1.1 实验动物
        4.1.2 实验仪器与器具
        4.1.3 实验试剂
        4.1.4 实验药品配置
    4.2 实验方法
        4.2.1 蛋白样品的提取
        4.2.2 蛋白样品浓度测定
        4.2.3 SDS-PAGE电泳
        4.2.4 转膜
        4.2.5 抗原抗体杂交
        4.2.6 化学发光与成像
    4.3 实验结果与分析
        4.3.1 测定小鼠子宫组织蛋白浓度
        4.3.2 Western Blot检测SPP1蛋白表达量
    4.4 本章小结
5 讨论
结论
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3846300