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宫内发育迟缓大鼠胰腺中Sox9的表达及其对胰腺发育的影响

发布时间:2023-10-06 11:34
  目的:探讨宫内发育迟缓大鼠在胰腺发育期Sox9的表达,及其对于胰腺细胞形成和胰腺结构的影响。研究方法:通过选取体重230-280g健康雌性、处女Wistar大鼠80只,体重300-320g健康雄性大鼠,按照雌雄(4:1)大鼠合笼,将受孕鼠随机给予全程低蛋白饲料或正常饲料任意摄取喂养,将其子鼠分为IUGR组和对照组(CON)组,随机选取孕E15.5、E18.5、P1天IUGR和对照组大鼠,剖宫产或自然娩出胎鼠或新生鼠,记录体重小于正常组体重2个标准差确定为E15.5、E18.5、P1天IUGR子鼠造模成功;在解剖显微镜下分离E15.5、E18.5、P1天胚胎胰腺组织;采用HE染色、透射电镜检测胰腺形态及超微结构;采用RT-PCR检测Sox9、Pdx1mRNA水平;Western-blot、免疫组织化学染色检测Sox9蛋白表达水平和位置;免疫荧光双染检测Sox9和Pdx1共表达情况。结果:(1)随着胰腺的发育,腺泡、导管逐渐聚集成典型的内分泌、外分泌结构;超微结构显示,线粒体和酶原颗粒逐渐增大;在发育阶段Sox9主要聚集在胰腺的导管,且随着胰腺发育表达量逐渐降低(P<0.01),同时...

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要 Abstract 英文缩略语 1 前言 2 材料与方法
2.1 材料与试剂
    2.1.1 实验动物
    2.1.2 实验仪器
    2.1.3 主要药品及试剂
    2.1.4 实验试剂的配置
2.2 实验方法
    2.2.1 动物模型的建立
    2.2.2 标本的采集及处理
    2.2.3 石蜡标本制备
    2.2.4 苏木素-伊红染色
    2.2.5 组织超微结构观察
    2.2.6 免疫组织化学染色方法
    2.2.7 RNA提取和RT-PCR方法
    2.2.8 蛋白提取和Western-blot方法
    2.2.9 免疫荧光双染方法
2.3 统计学方法 3 结果
3.1 IUGR 组和 CON 组胎鼠与新生鼠体重的测量
3.2 胎鼠和新生鼠胰腺组织形态学观察
3.3 胎鼠和新生鼠胰腺内分泌超微结构观察
3.4 胎鼠和新生鼠胰腺组织中 Sox9 与 Pdx1 m RNA 表达情况
3.5 胎鼠和新生鼠胰腺组织中 Sox9 蛋白表达情况
3.6 胎鼠和新生鼠胰腺组织中 Sox9 蛋白分布情况
3.7 胎鼠和新生鼠胰腺组织中 Sox9 与 Pdx1 共表达情况 4 讨论 5 结论 本研究创新性自我评价 参考文献 综述
参考文献 攻读学位期间取得的研究成果 致谢 个人简介



本文编号:3851777

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