微小RNA-148a靶向调控S1PR1及对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

发布时间：2023-10-28 17:04

　　目的探讨微小RNA-148a(miR-148a)靶向调控鞘氨醇-1-磷酸受体1(S1PR1)及对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测32例上皮性卵巢癌组织和25例正常卵巢组织及卵巢上皮细胞IOSE80和卵巢上皮癌细胞(A2780、SKOV3、OVCAR3和HO-8910)的miR-148a水平,Kaplan-Meier plotter在线生存分析miR-148a水平与485例卵巢癌预后的关系;采用脂质体向SKOV3细胞进行转染,根据转染物分为过表达组(转染miR-148a模拟物)、阴性对照(NC)组(转染无关序列)和对照组(未转染),采用QPCR检测miR-148a、S1PR1及凋亡相关因子Bcl-2、Bax和caspase-3的水平,荧光素酶报告基因系统验证两者的靶向关系,活细胞计数(CCK)-8法、AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术和caspase-3比色分析法检测增殖活力、凋亡率和caspase-3活性。结果 QPCR结果显示与正常卵巢组织相比,卵巢癌组织的miR-148a水平降低(P<0.05);卵巢癌细胞的miR-148a水平均...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 组织、细胞和主要试剂
    1.2 细胞培养和转染
    1.3 总RNA提取和QPCR
    1.4 荧光素酶报告基因系统
    1.5 细胞增殖检测
    1.6 细胞凋亡检测
    1.7 caspase-3活性检测
    1.8 预后在线分析
    1.9 统计学分析
2 结 果
    2.1 卵巢癌组织和细胞的miR-148a水平
    2.2 转染mimics对SKOV3细胞miR-148a和S1PR1水平的影响
    2.3 miR-148a与S1PR1的靶向关系验证
    2.4 过表达miR-148a对SKOV3细胞增殖的影响
    2.5 过表达miR-148a对SKOV3细胞凋亡的影响
    2.6 过表达miR-148a对SKOV3细胞caspase-3活性的影响
    2.7 过表达miR-148a对SKOV3细胞凋亡相关因子的影响
3 讨 论



本文编号：3857409