EGF/FOXM1在卵巢癌转移中的作用及作用机制研究

发布时间：2023-11-23 21:15

　　研究目的:卵巢癌的发生伴随着各种基因通路的相互作用,研究这些基因的功能有助于癌症的基因靶向治疗。EGF、FOXM1基因均提示可能参与卵巢癌的发生与恶性进展,本课题通过临床标本及体外实验研究EGF/FOXM1在卵巢癌细胞增殖、转移中的作用及作用机制。方法:采用免疫组化SP法对临床上收集的卵巢癌组织标本和正常的卵巢组织标本检测FOXM1的表达情况;利用Western blot技术分析人卵巢癌细胞HO8910PM、OVCAR3、SKOV3等细胞中FOXM1的表达情况;不同浓度EGF作用于SKOV3细胞后用Western blot法检测FOXM1的表达情况;cck8法检测不同浓度EGF对SKOV3细胞的增值影响;Transwell小室法检测不同浓度EGF对SKOV3细胞的迁移、侵袭影响;设计合成三种靶向人FOXM1基因的si RNA表达序列,应用脂质体LipofectamineTM2000共转染至SKOV3细胞作用24h后提取总蛋白,应用Western blot技术分析转染后SKOV3细胞FOXM1蛋白表达量,选取敲除FOXM1效能最佳的si RNA序列;cck8法检测敲除FOXM1后添加EG...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 引言
第二章 材料与方法
    2.0 材料
    2.1 方法
    2.2 细胞传代、换液
    2.3 细胞复苏、细胞冻存
    2.4 细胞计数
    2.5 细胞形态观察
    2.6 瞬时转染实验
    2.7 细胞总蛋白的提取
    2.8 cck8 法检测多浓度 EGF 干预 skov3 细胞的增殖实验
    2.9 cck8 法检测 si RNA 瞬时转染 skov3 细胞的增殖抑制实验
    2.10 western blotting 检测
    2.11 细胞迁移实验
    2.12 细胞侵袭实验
    2.13 统计学方法
第三章 结果
    3.1 基因 FOXM1 的序列
    3.2 FOXM1 在卵巢癌与正常卵巢组织中表达情况
    3.3 western blotting 实验检测三种卵巢癌细胞株中 FOXM1 的表达量
    3.4 western blotting 实验检测多浓度（0,5，10,25,50,100ng/ml）EGF 对 SKOV3 细胞中 FOXM1 表达的影响
    3.5 cck8 法检测多浓度 EGF 对 SKOV3 细胞的影响
    3.6 迁移实验检测浓度为 10ng/ml 的 EGF 对 SKOV3 细胞运动的作用
    3.7 侵袭实验检测浓度为 10ng/ml 的 EGF 对 SKOV3 细胞运动的作用
    3.8 构建的几种 si RNA 的序列
    3.9 瞬时转染前后 SKOV3 细胞形态的变化
    3.10 Western blotting 分析瞬时转染后 skov3 细胞中 FOXM1 蛋白的表达
    3.11 cck8 法检测转染后 skov3 细胞增殖的情况
    3.12 cck8 法检测浓度为 10ng/ml 的 EGF 对转染后的 skov3 细胞增殖的影响
第四章 讨论
    4.1 本研究的实验方法
    4.2 FOXM1 与卵巢癌
    4.3 EGF 与卵巢癌
    4.4 EGF 与 FOXM1 在 SKOV3 细胞中的作用
    4.5 总结与展望
第五章 结论
第六章 创新与不足
参考文献
综述：转录因子FOXM1 的研究现状与卵巢癌的治疗前景
    参考文献
攻读学位期间公开发表论文
项目支持
英汉对照缩略词表
致谢



本文编号：3866227