WJ-MSCs定向分化为子宫内膜细胞的分子机制

发布时间：2024-02-05 19:46

　　目的体外诱导人脐带华通氏胶间充质干细胞(Wharton’s jelly-derived mesenchymal stem cells,WJ-MSCs)向子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)和腺上皮细胞(endometrial epithelial cells,EECs)定向分化,探讨在分化过程中p38MAPK、ERK1/2以及cAMP-PKA信号通路的作用。方法(1)取足月剖宫产新生儿脐带华通氏胶,采用植块法原代培养WJ-MSCs。取全子宫切除术后新鲜子宫内膜组织,采用酶消化法原代培养ESCs。(2)采用8-溴-环磷酸腺苷(8-Br-cAMP)、雌激素及生长因子TGF-β,EGF,PDGF-BB诱导P3代WJ-MSCs向子宫内膜间质细胞样细胞分化,诱导21天后观察细胞的形态学变化,流式细胞术鉴定细胞表面波形蛋白、角蛋白表达情况。(3)采用transwell共培养体系将WJ-MSCs与ESCs共培养,并加入雌激素及生长因子,诱导WJ-MSCs向子宫内膜腺上皮细胞样细胞分化,诱导21天后观察细胞的形态学变化,流式细胞术鉴定细胞表面波形蛋白、角蛋白...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1原代培养的人脐带华通氏胶间充质干细胞（×20）

第三章结果.1人脐带华通氏胶间充质干细胞原代培养及鉴定结果.1.1细胞形态观察植块法培养5天后，可见WJ-MSCs从组织块周围爬出，呈、纺锤形，体积较小（图1：A）；WJ-MSCs在培养10天左右合成片（图1：B）；培养14天左右融合至80%（图....

图2流式细胞术检测人脐带华通氏胶间充质干细胞表面标志物(A、B：细胞表面CD90、CD105表达阳性；C-G：细胞表面CD14、CD34、CD45、

南通大学硕士学位论文3.1.2流式细胞术鉴定P3代WJ-MSCs结果流式细胞术检测P3代WJ-MSCs表面标记蛋白的结果显示：CD90、CD105表达阳性率分别为：98.16%、96.57%（图2：A、B）；CD14、CD34、CD45、CD79a、HLA-....

图3原代培养的人子宫内膜间质细胞（×20）

学硕士学位论文人子宫内膜间质细胞原代培养及鉴定结果细胞形态观察消化法培养的ESCs为单个细胞，加入完全培养基后30min24h后完全贴壁。初贴壁的ESCs为三角形，分布较散乱，居中，细胞质薄而透明（图3）。3d后细胞开始加速生长ESCs呈梭形，并逐渐融合。

图4流式细胞术检测原代培养的人子宫内膜间质细胞表面标志物（A：细胞表面波形蛋白表达阳性；B：细胞表面角蛋白表达阴性）

南通大学硕士学位论文3.2.2流式细胞术鉴定P2代ESCs结果在P2代ESCs悬液中分别加入带荧光标记的波形蛋白（Vimentin角蛋白（cytokeratin）特异性抗体，流式细胞仪检测结果显示：ESC形蛋白阳性率为94.92%（图4:A），角蛋白阴性率为....

本文编号：3896104