Smad3在未足月胎膜早破中的表达及其影响羊膜上皮细胞增殖和凋亡的作用机制研究

发布时间：2024-04-23 04:42

　　目的:探讨Smad3在未足月胎膜早破(PPROM)胎膜中的表达情况,Smad3对羊膜上皮细胞的生物学行为的影响,及其在未足月胎膜早破发病机制中的作用。方法:收集12例PPROM孕妇(PPROM组)和15例正常足月孕妇(对照组)的胎膜组织,利用蛋白质印迹法比较胎膜组织中的Smad3和磷酸化Smad3(p-Smad3)蛋白表达水平;免疫组织化学方法检测p-Smad3在胎膜组织中的表达及定位;免疫荧光法检测p-Smad3在人羊膜上皮细胞系(WISH)中的表达及定位WISH细胞分为3组:空白对照组(不经任何处理)、阴性对照组及SIS3抑制剂组;Smad3磷酸化特异性抑制剂SIS3处理WISH细胞后,利用Edu方法和流式细胞技术分别检测其对细胞增殖和凋亡的影响;蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白表达的变化。结果:①p-Smad3/Smad3在PPROM组的蛋白相对表达量(1.248±0.140)明显低于对照组(1.579±0.199),差异有统计学意义(P<0.05)。②胎膜组织中p-Smad3主要表达于羊膜上皮细胞和绒毛膜滋养细胞,且在WISH细胞中p-Smad3主要表达于细胞核;③SIS3抑...

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【文章目录】：
1 资料与方法
    1.1 研究对象
    1.2 主要试剂
    1.3 实验方法
        1.3.1 标本采集与处理
        1.3.2 细胞培养
        1.3.3 细胞实验分组
        1.3.4 蛋白质印迹法
        1.3.5 免疫组织化学法
        1.3.6 免疫荧光法
        1.3.7 Edu检测细胞增殖
        1.3.8 流式细胞技术检测细胞凋亡
        1.3.9 统计学分析
2 结 果
    2.1 两组孕妇的临床资料比较
    2.2 p-Smad3和Smad3蛋白在胎膜组织中的表达及定位
    2.3 p-Smad3在WISH细胞中的表达及定位
    2.4 p-Smad3表达降低对WISH细胞增殖的影响
    2.5 p-Smad3表达降低对WISH细胞凋亡的影响
    2.6 SIS3处理后对WISH细胞凋亡相关蛋白表达水平的影响
3 讨 论
    3.1 Smad3在PPROM胎膜中的表达
    3.2 p-Smad3表达下调对WISH细胞增殖和凋亡的影响
    3.3 SIS3抑制Smad3磷酸化后诱导WISH细胞凋亡的分子机制



本文编号：3962634