慢病毒介导shRNA沉默hnRNPA2/B1基因对宫颈癌细胞化疗敏感性的影响及作用机制初探

发布时间：2024-07-06 05:50

　　目的:分析不均一核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous nuclear ribonucleoproteinA2/B1,hnRNPA2/B1)基因对宫颈癌细胞的平板克隆形成、转移、侵袭能力和增殖能力、细胞周期的影响;以及探讨其改变宫颈癌细胞化疗药物敏感性及作用机制。方法:设计含有hnRNPA2/B1 shRNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰序列4对、阴性对照1对。构建含靶向hnRNPA2/B1 shRNA的重组慢病毒质粒,并稳定转染Caski细胞、Hela细胞,qRT-PCR检测hnRNPA2/B1 mRNA表达水平,Western blot检测hnRNPA2/B1蛋白表达水平;分别用平板克隆形成实验、划痕实验、细胞侵袭实验检测细胞的生物功能;MTT比色法检测细胞的增殖能力、洛铂(Lobaplatin)作用于细胞的IC50、伊立替康(Irinotecan Hydrochloride)作用于细胞的IC50;流式细胞术分析hnRNPA2/B1基因沉默后细胞周期以及洛铂、伊立替康对细胞凋亡作用的改变;用qRT-PCR和Western blot检测相关基因bax...

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【部分图文】：

图1.pGMLV-SC1RNAi慢病毒载体图谱

贵州医科大学2016届科学学位硕士研究生学位论文CaSki细胞,中文名称人宫颈癌肠转移细胞，形态上皮细胞，购自中院细胞库。含有完整的HPV-16(每个细胞大约600个拷贝)和HPV-18相HeLa细胞，中文名称人宫颈癌细胞，形态上皮细胞，购自中国科学库。含有人乳....

图2慢病毒干扰载体的序列对比图谱

NC-ShNRA序列对比图2慢病毒干扰载体的序列对比图谱Fig.2mapofSequencelentiviralinterferedvectorShNRA-1序列对比ShNRA-2序列对比

图3慢病毒干扰载体的序列对比图谱

NC-ShNRA序列对比图2慢病毒干扰载体的序列对比图谱Fig.2mapofSequencelentiviralinterferedvectorShNRA-1序列对比ShNRA-2序列对比

图4慢病毒shRNA感染细胞荧光照片

图4慢病毒shRNA感染细胞荧光照片AhnRNPA2/B1-shRNA1一号孔，BhnRNPA2/B1-shRNA1六号孔，ChnRNPA2/B1-shR一号孔.DhnRNPA2/B1-shRNA2六号孔，EhnRNPA2/B1-shRNA3一号孔，FhnR....

本文编号：4002155