Ebp1基因沉默对宫颈癌细胞增殖和侵袭转移的影响

发布时间：2025-04-22 21:40

　　目的:ErbB3是表皮生长因子受体家族的成员之一,在多种癌症组织中表达,Ebp1为ErbB3受体主要的结合蛋白之一,由人PA2G4基因编码,已有多篇文献报道Ebp1在人乳腺癌、口腔鳞状细胞癌、前列腺癌、以及肝癌等癌症中具有重要的调节作用,但是其在宫颈癌中的作用却罕见报道。已有研究发现Ebp1在宫颈癌组织中高表达,而在癌旁组织中低表达,但Ebp1对宫颈癌细胞生物学功能的影响尚不明确。因此本研究通过基因干扰技术,初步探讨Ebp1对宫颈癌细胞增殖、侵袭转移、和细胞凋亡等生物学功能的影响。方法:本研究采用重组慢病毒感染宫颈癌HELA细胞使Ebp1蛋白低表达。实验分为2组:PA2G4-RNAi病毒组(KD组)和阴性对照病毒组(NC组)。两组细胞感染72 h后用细胞免疫荧光和蛋白免疫印迹法检测KD组和NC组细胞Ebp1蛋白的表达情况,Ebp1蛋白表达显著降低说明转染成功。转染成功后用CCK-8检测KD组和NC组细胞活性,平板克隆和软琼脂克隆形成实验检测KD组和NC组细胞的增殖能力和集落形成能力,流式细胞术检测KD组和NC组细胞的细胞周期和凋亡情况,TUNEL法检测KD组和NC组细胞凋亡情况,划痕实验...

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略语表
第一章 前言
    1.1 宫颈癌流行病学现状
    1.2 ErbB3受体的结构和功能
    1.3 Ebp1的表达和功能
第二章 实验材料
    2.1 实验细胞
    2.2 实验试剂
    2.3 实验仪器
第三章 实验方法
    3.1 细胞培养及传代
    3.2 慢病毒感染HELA细胞
    3.3 细胞免疫荧光检测Ebp1蛋白
    3.4 蛋白免疫印迹法检测Ebp1蛋白
    3.5 CCK-8检测细胞增殖
    3.6 平板克隆形成实验
    3.7 软琼脂集落(克隆)形成实验
    3.8 流式细胞术检测细胞周期
    3.9 流式细胞术检测细胞凋亡
    3.10 TUNEL法检测细胞凋亡
    3.11 划痕实验检测细胞迁移能力
    3.12 Transwell小室检测细胞侵袭能力
    3.13 统计学分析
第四章 实验结果
    4.1 重组慢病毒感染HELA细胞效果监测
    4.2 Ebp1基因沉默对HELA细胞增殖的影响
    4.3 Ebp1基因沉默对细胞克隆形成能力的影响
    4.4 Ebp1基因沉默对HELA细胞周期的影响
    4.5 Ebp1基因沉默对HELA细胞凋亡的影响
    4.6 Ebp1基因沉默对HELA细胞侵袭的影响
    4.7 Ebp1基因沉默对HELA细胞迁移的影响
第五章 讨论
结论
参考文献
致谢
附录:攻读硕士学位期间公开发表的论文



本文编号：4040751