培养箱中乙醇和三氯甲烷的浓度对小鼠体外受精和胚胎发育的影响

发布时间：2017-06-17 08:47

  本文关键词：培养箱中乙醇和三氯甲烷的浓度对小鼠体外受精和胚胎发育的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨培养箱中不同浓度乙醇和三氯甲烷对小鼠体外受精及胚胎发育的影响,观察和记录注入不同浓度的乙醇和三氯甲烷各组的受精卵数、卵裂数、囊胚数及囊胚孵出数,并计算小鼠的卵母细胞受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率,为提高人类IVF-ET成功率提供实验依据。方法选则年龄为8-12周的昆明雌性小白鼠及雄性小白鼠为研究对象、对雌性小鼠促排卵后进行体外受精及胚胎培养。培养过程中的培养箱里分别注入乙醇和三氯甲烷两种气体进行实验,乙醇气体组设置空白对照组和5mg/m~3、10mg/m~3、20mg/m~3、40mg/m~3四种浓度组进行实验,三氯甲烷气体组设置白对照组和10mg/m~3、20mg/m~3、40mg/m~3、80mg/m~3四组浓度组进行实验。每组采用随机原则分配雌鼠8只、雄鼠各4只。观察和记录注入不同浓度的乙醇和三氯甲烷各组的受精卵数、卵裂数、囊胚数及囊胚孵出数,应用医学统计学方法分析不同浓度乙醇和三氯甲烷对小鼠体外受精和胚胎发育的影响程度。另外,分别对每组实验的卵母细胞随机抽样,应用激光共聚焦技术观察其纺锤体性形态结构。结果1乙醇气体组中,乙醇浓度为0、5mg/m~3、10mg/m~3、20mg/m~3、40mg/m~3时小鼠卵母细胞体外受精的受精率分别是(91.2%、89.9%、89.0%、86.8%、73.2%)、卵裂率分别是(85.8%、85.9%、84.8%、84.1%、83.5%)、囊胚形成率分别是(85.0%、82.8%、81.3%、80.2%、59.4%)、囊胚孵出率分别是(79.6%、78.2%、76.0%、74.2%、40.4%);不同浓度比较后卵裂率没有统计学差异(P0.05);受精率、囊胚形成率、囊胚孵出率均有统计学差异,并且表现为一种线型趋势关系,即随着浓度的递增,均成下降趋势(线型相关性P0.05)。乙醇的浓度控制在20mg/m~3以下时,受精率、卵裂率、囊胚形成率和囊胚孵出率虽然逐渐下降,但均无统计学差异,说明培养箱中乙醇的浓度控制在20mg/m~3以下时对小鼠体外受精和胚胎发育影响不明显。乙醇气体浓度为40mg/m~3时卵母细胞出现纺锤体的变性、断裂。2三氯甲烷气体组中,三氯甲烷的浓度为0、10mg/m~3、20mg/m~3、40mg/m~3、80mg/m~3时小鼠卵母细胞的受精率分别是(89.0%、87.3%、86.4%、85.6%、71.6%)、卵裂率分别是(83.6%、83.3%、82.9%、81.8%、64.7%)、囊胚形成率分别是(82.0%、80.9%、79.3%、60.7%、53.3%)、囊胚孵出率分别是(67.0%、65.6%、64.1%、35.3%、25.0%);不同浓度比较后受精率、卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率均有统计学差异(P0.05),并且表现为一种线型趋势关系,即随着浓度的递增,均成下降趋势(线型相关性P0.05)。三氯甲烷的浓度控制在20mg/m~3以下时,受精率、卵裂率、囊胚形成率和囊胚孵出率虽然逐渐下降,但均无统计学差异,说明培养箱中三氯甲烷的浓度控制在20mg/m~3以下时对小鼠体外受精和胚胎发育影响不明显。三氯甲烷气体浓度为80mg/m~3时会出现纺锤体的变性、断裂。结论1小鼠卵母细胞体外受精的受精率、囊胚形成率和囊胚孵出率与培养箱中乙醇气体浓度具有线型相关性,即随着乙醇浓度的递增呈逐渐下降趋势。2小鼠卵母细胞体外受精的受精率、卵裂率、囊胚形成率和囊胚孵出率均与培养箱中三氯甲烷气体浓度具有线型相关性,即随着三氯甲烷浓度的递增呈逐渐下降趋势。3培养箱中的乙醇和三氯甲烷的浓度控制在20mg/m~3以下时对小鼠体外受精和胚胎发育影响不明显。
【关键词】：培养箱 乙醇 三氯甲烷 体外受精 胚胎
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R714.8
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 引言11-13
• 第1章 实验研究13-39
• 1.1 材料与方法13-19
• 1.1.1 实验材料13-15
• 1.1.2 实验技术路线图15
• 1.1.3 实验方法15-19
• 1.2 结果19-27
• 1.2.1 培养箱中的乙醇对小鼠体外受精的影响19-23
• 1.2.2 培养箱中三氯甲烷对小鼠体外受精的影响23-27
• 1.2.3 两种气体组共聚焦实验中纺锤体的变化27
• 1.3 讨论27-36
• 1.3.1 实验动物的选择28
• 1.3.2 控制性促排卵药物的选择和给药时间28-29
• 1.3.3 实验气体的选择29
• 1.3.4 实验中气体浓度的选择29-30
• 1.3.5 乙醇对小鼠体外受精和胚胎发育的影响30-31
• 1.3.6 三氯甲烷对小鼠体外受精和胚胎发育的影响31
• 1.3.7 受精卵纺锤体31-32
• 1.3.8 激光共聚焦技术32-34
• 1.3.9 辅助生殖实验室中VOCs控制指标34-35
• 1.3.10 辅助生殖实验室中VOC的处理35-36
• 1.3.11 实验中的注意事项36
• 1.4 结论36
• 参考文献36-39
• 第2章 文献综述 胚胎实验室挥发性有机物研究进展39-48
• 2.1 研究背景及意义39
• 2.2 研究进展39-44
• 2.2.1 VOC定义、来源39-40
• 2.2.2 VOC危害现状40-43
• 2.2.3 VOC处理43-44
• 2.3 总结与展望44-45
• 参考文献45-48
• 结论48-49
• 附录1培养液成分49-50
• 附录2气体单位换算与说明50-51
• 致谢51-52
• 导师简介52-54
• 作者简介54-55
• 学位论文数据集55

  本文关键词：培养箱中乙醇和三氯甲烷的浓度对小鼠体外受精和胚胎发育的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：457838