乳源活性肽（PGPIPN）通过HSP信号途径降低人卵巢癌细胞对顺铂的抗性的体外研究

发布时间：2017-06-18 16:14

  本文关键词：乳源活性肽（PGPIPN）通过HSP信号途径降低人卵巢癌细胞对顺铂的抗性的体外研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：1.探讨乳源活性肽降低人卵巢癌细胞对顺铂的抗性。2.探讨乳源活性肽通过HSP信号途径降低人卵巢癌细胞对顺铂抗性的可能分子机制方法：1.培养人原代卵巢癌细胞并对其进行纯度鉴定2.CCK8法比较单独使用顺铂,顺铂联合不同浓度PGPIPN对细胞COC1, COC1/DDP和人原代卵巢癌细胞生长的抑制情况,并且筛选出药物最佳作用时间3.用流式细胞仪检测不同药物浓度对COC1, COC1/DDP和人原代卵巢癌细胞凋亡和周期的影响4. RT-PCR检测相关基因HSP70, HSF1, ERCC1, MDR1的表达5. Western blot检测相关蛋白HSP70, HSF1, ERCC1, MDR1的表达结果：1.成功培养人原代卵巢癌细胞,通过免疫荧光法鉴定纯度达到80%以上。2.通过CCK8法可知,与正常对照组相比,单独使用顺铂,顺铂联合不同浓度的PGPIPN组的COC1, COC1/DDP细胞,人原代卵巢癌细胞的细胞抑制率均增加。COC1/DDP组,顺铂联合不同浓度PGPIPN比单独使用顺铂的细胞抑制率高,且随着PGPIPN浓度增加,抑制率也在增加,48h时IC50的DDP联合高浓度的PGPIPN使细胞抑制率达到76.8%。而对于COC1组,联合用药的细胞抑制率比单独使用顺铂的抑制率有所增加,但是不及COC1/DDP组细胞的抑制率变换大,48h最大抑制率也达到62.3%。人原代卵巢癌在48h时,IC50的DDP联合高浓度的PGPIPN使细胞抑制率达到87.6%。3.通过流式凋亡实验,对于COC1细胞,不同浓度PGPIPN联合顺铂的细胞凋亡率比单独使用顺铂凋亡率略高,最大凋亡率为45.4%：对于COC1/DDP细胞,不同浓度PGPIPN联合顺铂比单独使用顺铂凋亡率高,其凋亡增加幅度大于COC1组最大凋亡率为67.4%；人原代卵巢癌细胞的凋亡率最大可以达到61.4%。对于周期的影响用药后均阻止在G2/M期,且随联合用药浓度增大而更加明显。4.对于HSF1和HSP70基因在COC1, COC1/DDP细胞中,随着联合用药组中PGPIPN浓度的增加,表达均减弱。而对于ERCC1和MDR1基因,在COC1细胞中,ERCC1和MDR1的表达均较弱,且随着联合用药组中PGPIPN浓度的增加,表达减弱的并不明显,在COC1/DDP细胞中随着PGPIPN的升高,表达量明显降低。5.HSF1和HSP70蛋白在COC1, COC1/DDP细胞中,随着联合用药组中PGPIPN浓度的增加,表达均减弱。ERCC1和MDR1蛋白,在COCl细胞中表达均较弱,且随着联合用药组中PGPIPN浓度的增加表达减弱的并不明显,而在COC1/DDP细胞中随着PGPIPN的升高,表达量明显降低。结论：1.乳源活性肽可以降低人卵巢癌细胞对顺铂的抗性。2.其可能的分子机制是癌变过程中,HSF1的激活被抑制,HSP70的表达降低,从而降低细胞的耐药性,ERCC1和MDR1的表达也随之减弱。
【关键词】：PGPIPN 人卵巢癌细胞 细胞周期 细胞凋亡
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 英文缩略表5-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-12
• 1 前言12-13
• 2 材料与方法13-23
• 3 结果与分析23-40
• 4 讨论40-42
• 5 结论42-43
• 参考文献43-46
• 个人简历46-47
• 致谢47-48
• 综述48-55
• 参考文献53-55

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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9 周e，

本文编号：459975