Maspin基因在宫颈鳞癌SiHa细胞裸鼠移植瘤中的表达及其与肿瘤微淋巴形成的相关性研究
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【摘要】:目的:1.评估人类宫颈癌SiHa细胞中Maspin基因的过表达对其体外细胞增殖和细胞凋亡的影响。2.探讨裸鼠人的宫颈癌细胞移植瘤中Maspin基因的表达与微淋巴管形成之间的关系。方法:pcDNA3-maspin重组质粒稳定转染入人宫颈癌SiHa细胞中,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)鉴定Maspin mRNA,而Maspin蛋白通过Western Blot分析及免疫组织化学技术(IHC)检测。细胞增殖活性以MTT比色法检测,细胞凋亡率及细胞周期则通过流式细胞仪测定,以明确细胞生物学特性的变化。重组SiHa细胞接种至6周龄雌性裸鼠。裸鼠移植瘤组织中Maspin及podoplanin的表达通过免疫组织化学技术检测,数据统计通过秩和检验和方差分析。结果:逆转录聚合酶链式反应,Western Blot分析及免疫组织化学技术(IHO检测均证实SiHa细胞中Maspin基因的强表达(P0.05)。MTT比色法及流式细胞仪结果表明pcDNA-maspin转染的SiHa细胞(SiHa-m)组与SiHa组及SiHa空质粒组(SiHa-pc3)相比,细胞增殖活性收到抑制,细胞凋亡率增加(P0.05)。SiHa组及SiHa-pc3组相比无统计学差异(P0.05)。体内移植重组质粒pcDNA-maspin的裸鼠肿瘤生长收到明显的抑制。统计数据显示,在裸鼠抑制肿瘤细胞后1,3,4,5周,SiHa-m组裸鼠肿瘤的体积较SiHa组及SiHa-pc3组有明显的区别(p0.05)。在SiHa组及SiHa-pc3组肿瘤的体积未观察到明显的差异(p0.05)。结论:动物实验结果显示maspin基因能够显著抑制人宫颈癌SiHa细胞的细胞增殖能力,有效减小肿瘤生长体积,其有望成为人类子宫颈鳞状细胞癌新的基因治疗靶点。但仍需通过增加实验动物数量的进一步研究统计来探究maspin在抑制人类子宫颈癌细胞生长中的作用机制。
【关键词】:Maspin RT-PCR Western blot SiHa细胞 podoplanin 淋巴管生成
【学位授予单位】:滨州医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R737.33
【目录】:
- 前言3-4
- 中文摘要4-5
- 英文摘要5-6
- 缩略词表6-8
- 材料与方法8-13
- 实验结果13-17
- 讨论17-24
- 结论24-25
- 利益冲突25
- 致谢25-26
- 参考文献26-28
- 附综述28-35
- 参考文献33-35
- 致谢35-36
- 学位论文目录36-37
- 附录1 附图37-43
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