孕期母体铅暴露对仔鼠海马组织Calsyntenin-1表达的影响

发布时间：2017-07-05 02:09

  本文关键词：孕期母体铅暴露对仔鼠海马组织Calsyntenin-1表达的影响

  更多相关文章： 铅 海马 Clstn-1蛋白 免疫组织化学染色法 蛋白质印迹 小鼠

【摘要】：目的:探讨母体铅暴露对仔鼠海马内钙结合蛋白-1(Calsyntenin-1,Clstn-1)表达的影响。方法:采用自由饮水模式建立铅暴露动物模型,发现阴栓记为第0天,此刻开始染毒,将40只孕小鼠,随机分为对照组和低、中、高剂量染毒组,分别饮用去离子水和1g/L,5 g/L,10 g/L的乙酸铅水溶液。仔鼠21日龄,分别测其血液和海马组织中铅的含量,然后取其海马组织,分别通过免疫组化方法和western blot技术检测各组仔鼠海马组织中Clstn-1的蛋白表达情况。结果:21d仔鼠血铅、海马铅水平均明显高于对照组(P0.01);免疫组化染色结果显示,Clstn-1免疫组化阳性反应主要定位于胞浆,在仔鼠海马组织的CA1区域中,每个铅暴露组仔鼠Clstn-1免疫组化阳性反应物的面密度与对照组相比增加显著,但平均灰度值明显降低(P0.01);Western blot结果显示,与对照组相比,铅暴露组仔鼠Clstn-1蛋白的表达明显高于对照组,并随染毒剂量增加,表达量增高,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:母体铅暴露可能通过上调仔鼠海马内钙结合蛋白的表达进而造成海马损伤,引起神经毒性。
【关键词】：铅 海马 Clstn-1蛋白 免疫组织化学染色法 蛋白质印迹 小鼠
【学位授予单位】：河南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R714.2
【目录】：

• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 前言8-9
• 1 文献综述9-17
• 1.1 铅9-10
• 1.2 铅对神经系统的影响10-12
• 1.3 铅对海马的影响12
• 1.4 铅离子对钙离子的影响12-13
• 1.5 钙结合蛋白13-14
• 1.6 毒素铅其它影响14-16
• 1.7 总结16-17
• 第一部分 仔鼠血铅海马铅浓度测定17-22
• 1 材料与方法17
• 1.1 试剂及仪器17
• 2 动物模型及分组17-18
• 3 样品处理18
• 3.1 玻璃器皿处理18
• 3.2 血液处理18
• 3.3 海马组织消解18
• 4 火焰原子吸收法测量血铅海马铅含量18-20
• 4.1 调试参数18-19
• 4.2 标准曲线的绘制19-20
• 4.3 结果计算20
• 4.5 数据处理20
• 5 结果与分析20-22
• 5.1 仔鼠血液和海马组织中铅浓度的结果分析20-22
• 第二部分 免疫组化法研究母体孕期铅暴露对仔鼠海马组织Clstn-1 蛋白表达的影响22-25
• 1 材料与方法22
• 1.1 试剂及仪器22
• 2 动物模型及分组22-23
• 3 免疫组织化学法23
• 3.123
• 3.223
• 3.323
• 4 仔鼠海马组织中Clstn-1 蛋白免疫组化的结果分析23-25
• 第三部分 Western Blot测定海马Clstn-1 蛋白表达水平25-30
• 1 试剂及仪器25
• 1.1 试剂及仪器25
• 2 动物模型分组25-26
• 3 Western Blot测定海马Clstn-1 表达水平26-29
• 3.1 海马蛋白的提取26
• 3.2 利用BCA蛋白浓度测定试剂盒进行蛋白浓度测定，，并计算得出上样量26-28
• 3.3 western blot28
• 3.4 数据处理28-29
• 4 仔鼠血液和海马组织中铅浓度的结果分析29-30
• 讨论30-31
• 结论31-32
• 参考文献32-37
• 参与项目37
• 已发表论文37-38
• 致谢38

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本文编号：520135